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1、分類藥植與鑒定年級(專業(yè))2009級藥學(專)成都中醫(yī)藥大學藥學院??飘厴I(yè)專題論文姓名:趙旭亮學號:200930310039論文題目:丹參的多糖研究指導教師:嚴鑄云職稱:教授實習單位:成都中醫(yī)藥大學論文提交時間:2012年05月成都中醫(yī)藥大學藥學院2012年05月8成都中醫(yī)藥大學藥學院2012年6月目 錄摘要………………………………………….01前言………………………………………….02實驗設計…………………………………………021.實驗原理………………………………022.實驗材料………………………………023.實驗方法………………………………03
2、實驗內容…………………………………………031.樣品制備…………………………….032.制備活性炭柱……………………….033.上樣洗脫…………………………….044.紙層析檢測………………………….04實驗結果及結論………………………………..05實驗討論…………………………………………05參考文獻…………………………………………068丹參的多糖研究實驗員:趙旭亮指導教師:嚴鑄云摘要目的:研究丹參多糖的種類,以便于分析丹參的藥理作用。方法:通過對丹參藥材的煎煮得到丹參藥液,對藥液進行醇沉除去里面的鞣質和其他雜質。再對藥液進行濃縮,濃縮至浸膏狀,加入
3、甲醇使其溶解,取出部分用蒸餾水進行稀釋并上樣。(事先做好的活性炭柱子)用不同濃度的乙醇進行梯度濃度洗脫,最后進行紙層析檢測。結果:丹參中含有多種多糖成分,在紙層析檢測中可看到兩處淺黃色的帶和多層次分布的不同色澤的帶譜,根據(jù)紙層析檢測的原理可知,不同帶譜代表不同的多糖,紙層上呈現(xiàn)出八條不同的帶譜。結論:丹參中含有多種多糖成分,關鍵詞:丹參多糖8前言多糖是中藥中一類天然高分子化合物,是維持生命正常運轉的基本物質之一,具有調節(jié)免疫功能,抗氧化以及抗衰老等作用,具有巨大的開發(fā)潛力。丹參(SalviamiltiorrhizaBunge)為唇形科鼠尾草屬植物,以
4、其根及根莖入藥,為我國傳統(tǒng)的名貴中藥材。國內主要分布在河北,山西,陜西,山東,河南,江蘇,浙江,安徽,江西及湖南等地;生于山坡、林下草叢或溪谷旁,海拔120—1300米。本論文通過該實驗進一步了解丹參的多糖成分,以便于更好的分析丹參的藥理作用。實驗方法為紙層析檢測法。預期目標:通過此實驗得到丹參多糖的種類。實驗設計1.實驗原理1.1.中藥材通過煎煮一些成分可進入煎煮液中形成藥液。1.2.藥液中的一些物質可與乙醇作用形成沉淀,稱為醇沉。1.3.活性炭具有較強的吸附作用??晌剿幰褐械囊恍┏煞?。1.4.用乙醇的梯度濃度洗脫可得到不同的丹參多糖成分。1.5
5、.紙層析法又稱紙色譜法。以紙為載體的色譜法。固定相一般為紙纖維上吸附的水分,流動相為不與水相溶的有機溶劑;也可使紙吸留其他物質作為固定相,如緩沖液,甲酰胺等。將試樣點在紙條的一端,然后在密閉的槽中用適宜溶劑進行展開。當組分移動一定距離后,各組分移動距離不同,最后形成互相分離的斑點。將紙取出,待溶劑揮發(fā)后,用顯色劑或其他適宜方法確定斑點位置。根據(jù)組分移動距離(Rf值)與已知樣比較,進行定性。紙層析檢測法可得到丹參多糖各成分的含量情況。2.實驗材料丹參藥材,蒸餾水,活性炭,鹽酸,乙醇,甲醇,四氯化碳,電子天平,電磁爐,磁盆,燒杯,燒瓶,玻璃棒,水浴鍋,試
6、管,減壓抽濾機,5號藥篩,研缽,膠頭滴管,量筒,三角漏斗,棉花,濾紙,鐵架臺,試管夾,裝柱管。濾紙纖維。毛細吸管等。83.實驗方法通過對丹參藥材的煎煮得到丹參藥液,對藥液進行醇沉除去里面的鞣質和其他雜質。過濾得到濾液,再對藥液進行濃縮,濃縮至浸膏狀,加入甲醇溶液使其溶解,取出部分藥物浸膏用蒸餾水進行稀釋并上樣。(事先做好的活性炭柱子,按要求將活性炭進行處理,使其符合實驗標準,再將其洗至中性。)用不同濃度的乙醇進行梯度濃度洗脫,得到相應的洗脫液,最后對洗脫液進行紙層析檢測。實驗內容1.樣品制備1.1.稱取丹參藥材10千克,置于磁盆中加蒸餾水煎煮三次,每
7、次加水30升,第一次煎煮時間為藥液沸騰后再煎煮三十分,第二,三次煎煮時間為藥液沸騰后再煎煮十五分鐘。濾出藥液,并將三次煎煮得到的藥液混合后存于容器中備用。1.2.將得到的藥液放入盆中,置于電磁爐上進行加熱濃縮,期間用玻璃棒進行攪拌,將藥液濃縮至3升,冷卻備用。1.3.向冷卻后的濃縮藥液按比例1:1加入95%的乙醇3升,進行醇沉,并將其放置二十四小時備用。1.4.對經過醇沉處理的藥液進行減壓抽濾,在事先準備好的濾紙上鋪上一層薄薄的硅膠粉,將藥液進行減壓抽濾。(由于經乙醇處理后的藥液沉淀較多,故需要不斷的更換濾紙,以便于藥液能順利通過)將得到的濾液密封備
8、用。1.5.將濾液置于燒瓶中放入水浴鍋中進行減壓濃縮,水浴溫度為55——65度,回收乙醇,并將濾液濃縮至流浸