丹參多糖提取影響因素研究.pdf

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1、·762·山東中醫(yī)雜志2014年9月第33卷第9期·中藥園地·丹參多糖提取影響因素研究包華音，劉楊，李巧玉，李峰(山東中醫(yī)藥大學(xué)，山東濟(jì)南250355)[摘要]目的：考察不同提取方式和不同因素水平對(duì)丹參多糖提取率的影響，優(yōu)化丹參藥材多糖提取工藝。方法：采用苯酚一硫酸比色法，以丹參藥材多糖提取率為評(píng)價(jià)指標(biāo)，采用單因素實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)，考察提取方式、料液比、醇沉濃度、提取時(shí)間對(duì)丹參多糖提取率的影響。結(jié)果：回流提取方式的丹參多糖得率顯著高于超聲提取方式。料液比為1：20時(shí)丹參多糖提取率最高，醇沉濃度以70％效果最好，提取時(shí)間以提取70min時(shí)得到的多

2、糖量最高。結(jié)論：不同提取方式和不同因素水平對(duì)丹參藥材多糖提取率有顯著影響。[關(guān)鍵詞]丹參；丹參多糖；苯酚一硫酸法；回流提??；提取工藝[中圖分類號(hào)]R256．22[文獻(xiàn)標(biāo)志碼]A[文章編號(hào)]0257—358X(2014)09—0762—03丹參(SalviamiltiorrhizaBge．)為唇形科植物，Bge．)的干燥根，研磨成細(xì)粉，過(guò)四號(hào)篩。以根部人藥，味苦，性微寒，具有活血化瘀、通經(jīng)止4方法與結(jié)果痛、清熱安神的功效[1]。藥理研究表明，丹參多糖對(duì)4．1標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制對(duì)照品溶液的制備：精確稱小鼠淋巴細(xì)胞增殖反應(yīng)有著顯著的促進(jìn)作用，具有

3、取105℃干燥至恒重的無(wú)水葡萄糖對(duì)照品100mg．較好的免疫調(diào)節(jié)保護(hù)活性E21。本研究以丹參多糖得加水適量使其溶解并定容至100mL，混勻，得對(duì)照率為指標(biāo)，比較了超聲和回流兩種提取方式對(duì)丹參品溶液(葡萄糖濃度為1．0000Izg·mL)顯色劑的多糖得率的影響，并用單因素考察法確定料液比、提配制：將分析純苯酚重蒸，收集180cI二餾分，取重蒸取時(shí)間、醇沉濃度對(duì)丹參多糖得率的影響，為本課題苯酚80g，溶于20mL蒸餾水中，配成80％苯酚，于后續(xù)丹參藥材多糖提取工藝的進(jìn)一步優(yōu)化研究和丹棕色瓶中4℃保存，臨用前加蒸餾水稀釋成6％苯參藥材的質(zhì)量評(píng)

4、價(jià)奠定基礎(chǔ)。酚。最大吸收波長(zhǎng)的測(cè)定：精密量取3mL對(duì)照品溶1儀器液，稀釋至10mL，后取2．0mL于潔凈試管中，加入CP225D型十萬(wàn)分之一電子天平(上海越平科學(xué)6％苯酚1．0mL，混勻。迅速加入濃硫酸5．0mL混勻，儀器有限公司)：紫外一可見(jiàn)分光光度計(jì)(uv一9000型．放置5rain。將試管于沸水浴中加熱15rain，取出冷上海云析儀器有限公司)；恒溫水浴鍋(SL型，上海至室溫；另精密量取蒸餾水2．0mL，同法操作作為空樹(shù)立儀器儀表有限公司)；醫(yī)用離心機(jī)(TL-1型，姜白對(duì)照，待測(cè)溶液用紫外一可見(jiàn)分光光度計(jì)200～堰市天力醫(yī)療器械有

5、限公司)；數(shù)顯式電熱恒溫干燥800nm掃描測(cè)試，選擇葡萄糖有最大吸收的490nm箱(101一OA型，上海佰奧生物科技有限公司)；超聲為測(cè)定波長(zhǎng)。標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制：依次精密吸取對(duì)照品波清洗器(KQ2200，昆山市超聲儀器有限公司)；冰溶液0、20、40、60、80、100L于試管中，加水補(bǔ)至箱(BCD一215TBDZ，青島海爾)。2．0mL。采用苯酚一硫酸法在490nm波長(zhǎng)處測(cè)定，以2試劑第1支試管中的溶液為空白對(duì)照。按照分光光度法D一葡萄糖(中國(guó)藥品生物制品檢定所，批號(hào)：(《中國(guó)藥典)2010年版一部附錄VA)，測(cè)定其余5l10支試管中溶

6、液的吸光度。以葡萄糖濃度(g·mL)為833—200302)。無(wú)水氯化鈣、濃硫酸、重蒸苯酚、氯仿、橫坐標(biāo)，吸光度(A)為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得到無(wú)水乙醇、正丁醇均為分析純，水為雙蒸水。的線性回歸方程為：Y=0．0162X一0．0034(r=O．9991)．3藥材線性范圍為0～100g。所用藥材均經(jīng)鑒定為丹參(Salviamiltiorrhiza4．2精密度實(shí)驗(yàn)精密吸取對(duì)照品溶液40L于試管中，加水補(bǔ)至2．0mL，采用苯酚一硫酸法在490nm[收稿日期]2013—11—4測(cè)定吸光度，重復(fù)測(cè)定6次，計(jì)算吸光度A的RSD=[基金項(xiàng)目]山東省

7、農(nóng)業(yè)良種工程重大課題(編號(hào)：2011LZ01—03)，山東省自然科學(xué)基金(編號(hào)：ZR2011CQ045)0．98％(n=6)，表明儀器精密度良好。[作者簡(jiǎn)介]包華音(1979一)，女，山東榮成人，講師，博士研究生4．3多糖提取方式的比較稱取丹參藥材粉末6在讀，主要從事中藥質(zhì)量控制與資源研究。份，各1．000g。向其中一份中加入30mL蒸餾水，稱[通信作者]李峰(1957一)．男，山東安丘人．博士研究生導(dǎo)師，教授，從事中藥質(zhì)量控制研究。E—mail：lifeng@studcm．edu．cn定重量。超聲提取30rain，稱定重量并補(bǔ)足失重山

8、東中醫(yī)雜志2014年9月第33卷第9期·763·4000rpm離心5min，吸取上清液，將其濃縮至25mL，作為超聲待測(cè)提取液。向另一份粉末中加入30mL蒸餾水。加熱回流提取1．5h，冷至室溫，4000rp