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《大豆抗胞囊線蟲的分子標記研究》由會員上傳分享,免費在線閱讀,更多相關內容在學術論文-天天文庫。
1、黑龍江農業(yè)科學2014(7):15~17HeilongjiangAgriculturalSciences大豆抗胞囊線蟲的分子標記研究安詠梅,王家軍,李進榮,于佰雙(黑龍江省農業(yè)科學院,黑龍江哈爾濱150086)摘要:為了在分子水平驗證大豆材料的抗病性,以對大豆胞囊線蟲3號生理小種表現(xiàn)為抗性和感性的大豆為試材,利用已經報道的與SCN抗病基因連鎖的SSR標記引物,對供試的大豆材料進行指紋圖譜鑒定。結果表明:引物Satt130無擴增結果,Satt301沒有多態(tài)性,Satt309和Satt082表現(xiàn)出多態(tài)性。聚類分析結果表明,所有供試材料被分成3大類,其中在合豐25×抗線4
2、號正反交組合中,抗病親本抗線4號與(抗線4號×合豐25)F2、(合豐25×抗線4號)F3抗病后代抗-221、抗-131聚為一類;感病親本合豐25與感病材料(合豐25×抗線4號)F2感-121被聚為一類,在這個區(qū)域將感病材料分開。而其它后代材料則聚為一類,并沒有將抗感材料區(qū)分開。關鍵詞:大豆;大豆胞囊線蟲;分子標記中圖分類號:S435.651文獻標識碼:A文章編號:1002-2767(2014)07-0015-03大豆胞囊線蟲(HeteroderaglycinesIchino-用于大豆遺傳研究中,目前,大豆上已定名的he)是世界大豆生產上的重要病害之一,抗病品SSR分
3、子標記就有900多個,其中約有450個已種選育是大豆胞囊線蟲(SCN)多種防治措施中經定位于大豆連鎖群上。因此SSR可以成為大豆?jié)?、有效和環(huán)境友好的方法。目前,SCN抗病育抗病育種研究中一種較好的分子標記。種中常用的溫室鑒定或田間鑒定費時、費力,受環(huán)1材料與方法境因素影響較大。分子標記技術給難以用傳統(tǒng)方1.1材料法深入進行的大豆遺傳研究帶來極大的方便,近以對大豆胞囊線蟲3號生理小種表現(xiàn)為抗性年來,研究者不斷探索分子標記與大豆品種對大和感性的大豆品種,即抗線4號(高抗)、哈98-豆胞囊線蟲抗性的關系,對大豆胞囊線蟲抗性基4598(抗病品系)、合豐25(高感)以及3個親
4、本的因進行分子標記、定位及應用。分子標記輔助選雜交后代為供試材料(見表1)。于田間采集供試擇是提高抗病育種效率的有效方法。隨著經典遺材料的新鮮葉片,放在冰壺內保存。傳學和分子遺傳學對大豆胞囊線蟲研究的深入,表1提?。模危恋木幪柤安牧显斍殛懤m(xù)發(fā)現(xiàn)了SCN的抗性位點,并把主抗性基因已Table1Theserialnumberofextracted經定位到經典連鎖群和分子連鎖群上,這為尋找DNAandmaterials[1]與之連鎖的分子標記提供了方便。近年來,隨著分子生物學技術的不斷發(fā)展,一些新的技術已DNA編號材料名稱備注DNAcodeNamesNote經應用到大豆抗
5、胞囊線蟲研究中。SSR(Simple1合豐25感病親本SequenceRepeats)簡單重復序列,也稱微衛(wèi)星2抗線4號抗病親本DNA(MicrosatelliteDNA),是一類有幾個(2~3(合豐25×抗線4號)F2感-1215)核苷酸為重復單位組成的串聯(lián)重復序列,一般[2]4哈98-4598抗病品系長達幾十個到幾百個核苷酸。在遺傳上SSR5(合豐25×抗線4號)F2感-120呈孟德爾式遺傳,為共顯性標記。其多態(tài)性、穩(wěn)定6(合豐25×哈98-4598)F2抗-321性、重復性和可信度遠高于RAPD。SSR廣泛應7(抗線4號×合豐25)F2抗-2218(合豐25×
6、抗線4號)F3抗-131收稿日期:2014-05-269(合豐25×哈98-4598)F2抗-322第一作者簡介:安詠梅(1965-),女,黑龍江省哈爾濱市人,學士,高級農藝師,從事植物保護研究。E-mail:anyongmei196510(合豐25×抗線4號)F2感-122@sina.com。11(哈98-4598×合豐25)F2抗-421通訊作者:于佰雙(1963-),男,黑龍江省巴彥縣人,博士,研究員,從事大豆病理研究。E-mail:bsyu100@163.com。12(合豐25×抗線4號)F3感-13115黑龍江農業(yè)科學7期利用已經報道的與SCN有關的SSR
7、引物:的條帶數(shù),Nxy代表在x和y中擴增出片段長度相Satt301、Satt130、Satt309和Satt082作為引物對同的條帶數(shù)。遺傳距離GD(geneticdistance):遺供試材料進行擴增(見表2)。傳距離=1-Sxy。當D=0,Sxy=1時,物種x和表2SSR引物名稱及序列物種y的擴增片段完全相同,二者有高度同一的Table2NameandsequenceofSSRprimersDNA序列;當D=1,Sxy=0時,二者擴增片段完SSR引物引物序列全不同,具有高度相異的遺傳性Sxy和GD可定量SSRPrimersSequenceofprimer地反