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《多種產(chǎn)前分子診斷技術(shù)在產(chǎn)前診斷中的應(yīng)用》由會員上傳分享,免費在線閱讀,更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、多種分子技術(shù)在產(chǎn)前診斷中的應(yīng)用鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院遺傳與產(chǎn)前診斷中心孔祥東2016.8優(yōu)生優(yōu)育是我國一項基本國策預(yù)防出生缺陷提高人口素質(zhì)出生缺陷的原因?宮內(nèi)環(huán)境因素(非遺傳性)?遺傳性因素出生缺陷預(yù)防的兩個目標?克服環(huán)境因素導(dǎo)致的出生缺陷?克服遺傳因素導(dǎo)致的出生缺陷環(huán)境因素出生缺陷的預(yù)防?單純環(huán)境因素或環(huán)境和遺傳因素共同作用導(dǎo)致的出生缺陷所占比例高?導(dǎo)致出生缺陷的環(huán)境因素病毒、細菌、輻射、藥物、孕母疾病、情緒等因素?環(huán)境因素導(dǎo)致的出生缺陷特點不確定性,難以控制性因素較多環(huán)境因素出生缺陷預(yù)防較為困難單一遺傳
2、因素出生缺陷的預(yù)防?單純遺傳因素導(dǎo)致出生缺陷所占比例低?遺傳因素導(dǎo)致的出生缺陷特點遺傳病病因大多明確,可通過遺傳學(xué)手段明確診斷遺傳病有特定的遺傳方式,不受環(huán)境因素的影響,可準確預(yù)測發(fā)病風(fēng)險已知病因的遺傳病預(yù)防相對容易實現(xiàn)定點,明確、高效遺傳病三級防治?一級防治——孕前隱性遺傳病篩查?二級防治——PGD,產(chǎn)前基因診斷,胚胎、宮內(nèi)基因治療?三級防治——新生兒篩查、治療(基因治療)相對于常見病、多發(fā)病,遺傳病已經(jīng)成為最容易防治的疾病產(chǎn)前診斷遺傳病分類?染色體病46條染色體異常導(dǎo)致的疾病唐氏綜合征,Turner綜
3、合征,流產(chǎn)?基因組拷貝數(shù)異常染色體微重復(fù)、微缺失疾病DiGorge綜合征,流產(chǎn)等?單基因病編碼基因的突變導(dǎo)致的疾病遺傳性耳聾苯丙酮尿癥白化病血友病產(chǎn)前遺傳學(xué)診斷的方法?染色體病常規(guī):核型分析快速:FISH、QF-PCR、MLPA、BoBs?基因組拷貝數(shù)變異染色體微陣列分析、高通量測序、FISH、MLPA?單基因病PCR、Sanger測序、高通量測序、DNA芯片產(chǎn)前基因診斷步驟1.病因?qū)W診斷先證者基因診斷2.攜帶者診斷先證者親屬基因診斷3.預(yù)測胎兒患病風(fēng)險胎兒產(chǎn)前診斷產(chǎn)前基因診斷材料的種類產(chǎn)前基因診斷=胎兒
4、取材+基因診斷?絨毛、羊水、臍血介入性產(chǎn)前診斷?受精卵卵裂球胚胎植入前基因診斷?孕母游離DNA無創(chuàng)性胎兒基因診斷介入性產(chǎn)前診斷羊膜腔穿刺?最常用的侵襲性產(chǎn)前診斷技術(shù)?時間:孕18~30周?用途:胎兒染色體病和單基因遺傳病的產(chǎn)前診斷?安全:與之相關(guān)的流產(chǎn)率0.1-0.2%絨毛活檢(CVS)?孕10周-14周?經(jīng)腹或經(jīng)宮頸CVS?流產(chǎn)率0.2-0.5%www.themegallery.com臍靜脈穿刺?18-32周?進入胎兒循環(huán)?羊水或絨毛檢查失敗補救快速胎兒核型分析胎兒宮內(nèi)感染的診斷胎兒血液系統(tǒng)疾病產(chǎn)前診斷
5、?安全:流產(chǎn)率1%染色體病產(chǎn)前診斷技術(shù)比較報告產(chǎn)前診斷細胞檢測所覆蓋染色體儀器要求時間技術(shù)培養(yǎng)成本23對染色體顯微鏡核型分析是14-21低13,18,21,X,Y染色體熒光顯微鏡FISH否5-7天高13,18,21,X,Y染色體PCR儀,測QF-PCR否<48h低序儀13,18,21,X,Y染色體PCR,測序MLPA否<48h低儀13,18,21,X,Y染色體和9種微流式熒光檢BoBs否<72h高缺失綜合征測儀,軟件技術(shù)比較報告產(chǎn)前診斷細胞檢測所覆蓋染色體儀器要求時間技術(shù)培養(yǎng)成本23對染色體顯微鏡核型分析
6、是14-21低13,18,21,X,Y染色體熒光顯微鏡FISH否5-7天高13,18,21,X,Y染色體PCR儀,測QF-PCR否<48h低序儀13,18,21,X,Y染色體PCR,測序MLPA否<48h低儀13,18,21,X,Y染色體和9種微流式熒光檢BoBs否<72h高缺失綜合征測儀,軟件病例分析?孕婦,張某,38歲,唐篩高風(fēng)險(1/30)分析方法:?樣本類型:羊水?快速染色體非整倍分析?孕周:18+3W?細胞培養(yǎng)核型分析三體峰三體峰三體峰病例分析?孕婦,張某,38歲,唐篩高風(fēng)險(1:30)21-三
7、體!?樣本類型:羊水三體峰24小時出結(jié)果三體峰?孕周:18+3W三體峰QF-PCR結(jié)果病例分析羊水培養(yǎng)核型分析結(jié)果:47,XY,+2115天出報告熒光定量PCR技術(shù)在產(chǎn)前診斷中的應(yīng)用專家共識中華婦產(chǎn)科雜志2014年8月染色體病產(chǎn)前診斷策略?染色體核型快速診斷(5ml羊水DNA提?。〧ISH、MLPA、QF-PCR、BoBs(初步診斷)?染色體羊水核型分析(15ml羊水培養(yǎng)制備)(結(jié)果驗證)?綜合比較,得出結(jié)論抽取羊水后,先快速診斷,再核型羊水制備,綜合比較,得出結(jié)論?。?!胎兒核型分析的局限性?常規(guī)羊水染色
8、體分析發(fā)現(xiàn)微小異常,但無法明確與定位;?超聲或MRI發(fā)現(xiàn)多發(fā)畸形,但羊水染色體分析結(jié)果正常;?懷疑胎兒染色體異常,但無條件進行胎兒染色體分析。?早中孕流產(chǎn)、停育、死胎組織難于培養(yǎng)染色體數(shù)目異常和大片段的結(jié)構(gòu)變異,小片段的結(jié)構(gòu)改變不能檢出或識別染色體拷貝數(shù)變異染色體微陣列分析染色體拷貝數(shù)變異?拷貝數(shù)變異(Copynumbervariation,CNV)是一般指長度為1kb以上的基因組大片段的拷貝數(shù)增加或者減少?主要表現(xiàn)為亞顯微水