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1、動物醫(yī)學進展,2014,35(12):110-114ProgressinVeterinaryMedicine豬精液常溫保存效果觀察張金玲1,房靈軍2,田國寧1,李凱1,孫軍1,劉煥奇3*(1.濰坊出入境檢驗檢疫局,山東濰坊261041;2.濱州六和隆達農(nóng)牧有限公司,山東濱州256600;3.青島農(nóng)業(yè)大學動物科技學院,山東青島266109)摘要:為研究不同保存條件對豬精液常溫保存效果的影響,觀察精子的活力和有效保存時間之間的關系,采用常溫下對精液添加抗生素、不同精液稀釋比例、光照、振蕩、混入尿液等,每隔12h顯微鏡檢測一次精子活力的方法
2、,以篩選常溫下豬精液保存方式。結果顯示,在精液保存過程中加入抗生素時,精液有效保存時間和精子活力明顯高于未加抗菌藥物的稀釋液,其中加入慶大霉素的保存效果最好;精液稀釋比例為1∶1~1∶2時保存效果最好;光照及劇烈振蕩條件下,精液活力下降很快;混入尿液很容易使精子死亡。上述研究結果表明,常溫下豬精液的理想保存方式是,在保證精子密度的前提下,精液與稀釋液比例為1∶1~1∶2;同時在精液稀釋液中添加廣譜抗生素;保存過程中應避免光照、振蕩、尿液污染等的影響。關鍵詞:精液;常溫保存;人工授精;豬中圖分類號:S814.3文獻標識碼:A文章編號:1
3、007-5038(2014)12-0110-05豬精液保存技術推廣應用的重要性在于通過擴水浴鍋。大精液使用的時間和地域范圍,提高優(yōu)秀種公豬的1.1.2稀釋液稀釋液配方:葡萄糖37g,NaH-利用效率,從而降低公豬飼養(yǎng)成本,加速豬的遺傳改CO31.2g,檸檬酸鈉6g,EDTA1.3g,KCl0.75g,良,避免通過交配傳播疾病,同時也在豬品種資源和蒸餾水1000mL。準確稱量各種成分放在燒杯里,原始資源及基因庫種質資源保存等方面起重要作按比例加入雙重蒸餾水溶解,如果不易溶解可適當用。我國于2010年-2012年分別實施生豬良種補加溫;用
4、濾紙過濾溶液,以去掉雜質;把過濾后的溶[1-2]貼計劃,以加快生豬改良步伐。要推進養(yǎng)豬產(chǎn)業(yè)液密封后進行高壓滅菌?;l(fā)展,提高種豬受精率和精液品質至關重要。1.1.3采精器材采用手握法采精,主要器材包括現(xiàn)行的精液保存方法按保存溫度分為3種,即滅菌乳膠手套,集精杯,過濾用滅菌紗布,生理鹽水。常溫保存(15℃~25℃)、低溫保存(0℃~5℃)和1.2方法超低溫保存(-79℃或-196℃)。由于冷凍豬精液1.2.1采精用手握法采集精液,將集精杯口用滅[3]精子成分丟失導致受精率下降,加之冷凍技術難菌紗布包好,一邊采集一邊過濾。要保持集精杯溫度
5、大,冷凍設備投資高,還不能在生產(chǎn)中廣泛應用。度在37℃左右。收集精液時要去除前段尿液和稀而公豬精液的低溫保存不如常溫保存效果好,因此,釋部分,收集濃厚部精液。如果精液中檢測成分較公豬精液常溫保存在生產(chǎn)上具有很大的實用價多要用紗布多過濾幾次除去。鮮精要在30min內[4-5]值。影響常溫豬精液保存效果的因素很多,本研送回實驗室。究針對我國種豬及商品豬飼養(yǎng)數(shù)量大,但主要為?。保玻簿夯盍Φ臏y定方法精液送到實驗室后規(guī)模和個體飼養(yǎng),無法發(fā)揮優(yōu)秀種公豬在品種改良放在37℃的水浴鍋里,加上少許的稀釋液。滴在有中作用的問題,自優(yōu)秀種公豬采集精液
6、,對影響精液熱臺加熱到37℃的血球計數(shù)板上,蓋上蓋玻片,在常溫保存的主要因素,如抗菌藥選擇、稀釋液比例、40倍光學顯微鏡下觀察,計算精子活力(精子活力光照、振蕩、尿液污染等進行了深入研究。=直線運動精子/精子總數(shù))。要求活力高于0.8,1材料與方法否則應當棄去。在常溫保存的條件下要求每隔12h1.1材料檢查一次,并把精液輕輕的搖勻。1.1.1儀器設備生物顯微鏡,恒溫箱,電子天平,1.2.3精子有效存活時間有效存活時間是指精收稿日期:2013-12-24作者簡介:張金玲(1974-),女,獸醫(yī)師,獸醫(yī)碩士,主要從事基礎獸醫(yī)學研究。*通訊
7、作者張金玲等:豬精液常溫保存效果觀察111[6]子活力不低于0.5的保存時間。用加慶大霉素的稀釋液5mL與5mL的精液混合,1.2.4精液的稀釋把剛剛送到實驗室的精液放試管編號K、L、M、N、O。保存環(huán)境K管給予光照;在37℃的水浴鍋中,同時也把稀釋液放在37℃水L管給與強烈振蕩;M管加1滴尿液;N管不搖動;浴鍋中,然后將稀釋液按要求加入到精液中。注意對照組對照管O要求避光、無強振、無尿液,每隔稀釋液與精液的溫差不能大于1℃,自然冷卻到室12h輕輕的搖勻。試驗重復4次。溫。2結果1.2.5常溫條件下不同種類抗生素的影響?。矗玻辈煌?/p>
8、生素對豬精液的保存效果個燒杯各加稀釋液100mL,分別編號1、2、3、4,其在常溫條件下添加不同抗生素的精液稀釋液對中,1號杯中不加抗生素,2、3、4杯分別加入慶大霉精子活力的影響,結果見表1。由表1可見,未添加素、青霉