蘇云金芽孢桿菌nbin863 菌株對番茄根結(jié)線蟲的防治效果和促生作用

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1、2015（10）：57-60中國蔬菜CHINAVEGETABLES研究論文蘇云金芽孢桿菌NBIN863菌株對番茄根結(jié)線蟲的防治效果和促生作用121*1*111黃大野　葉良階　劉曉艷　姚經(jīng)武　曹春霞　楊妮娜　龍　同11胡洪濤　楊自文12（湖北省生物農(nóng)藥工程研究中心，湖北武漢430064；湖北省石首市農(nóng)業(yè)技術(shù)推廣中心，湖北石首434400）摘　要：在溫室條件下，研究蘇云金芽孢桿菌（Bacillusthuringiensis）NBIN863菌株對番茄根結(jié)線蟲的生物防治效果，對番茄植株的促生作用及在番茄根際周圍的定殖能力。

2、結(jié)果表明：NBIN863菌株對番茄根結(jié)線蟲的溫室防效達到54.48%；對番茄植株具有促生作用，株高、根長和全株鮮質(zhì)量分別比空白對照增加49.10%、43.69%和52.50%；該菌株能穩(wěn)定在番茄根際5-1周圍定殖，接種30d后，其定殖濃度為8.37×10cfu·g。關(guān)鍵詞：蘇云金芽孢桿菌；NBIN863菌株；根結(jié)線蟲；生物防治效果；促生根結(jié)線蟲是農(nóng)業(yè)生產(chǎn)過程中一類重要的植物病會伴隨芽孢的形成而產(chǎn)生特異性的高毒力殺蟲晶體原線蟲，廣泛分布于世界各地，可侵染3000多種蛋白（Insecticidalcrystalpr

3、oteins，ICPs），具有對昆分屬114個科的植物（劉維志，1998）。據(jù)估計，蟲天敵、人畜安全，不污染環(huán)境，且不易誘發(fā)產(chǎn)世界范圍內(nèi)每年由根結(jié)線蟲等植物寄生性線蟲造成生抗性等特點，現(xiàn)已成為世界上應(yīng)用最廣泛而且的損失超過1200億美元，嚴重為害蔬菜和其他作最成功的生物殺蟲劑（喻子牛，1993）。自1972年物生產(chǎn)（Chitwood，2003）。Prasad首次報道Bt對線蟲有拮抗活性以來（Prasad生物防治以其安全、高效和無污染的特點越etal．，1972），越來越多的抗植物寄生線蟲的來越受到重視，是根結(jié)線蟲未來

4、防控策略中的主要Bt制劑在田間應(yīng)用，并取得了很好的防治效果方向之一。芽孢桿菌是自然界中廣泛存在的一類細（Yuetal.，2015）。菌，種類繁多，遺傳類型多樣，對多種植物病原真蘇云金芽孢桿菌NBIN863是由湖北省生物農(nóng)菌、細菌和線蟲具有拮抗活性，營養(yǎng)要求相對簡單，藥工程研究中心分離和保存的具有高殺線蟲活力很容易存活、定殖，以其為主劑開發(fā)的生防制劑具的菌株（中國典型培養(yǎng)物中心保存，編號CCTCC有加工制作簡單、使用方便和耐貯存等優(yōu)點，是最NO.M2013612）。本文對其殺線蟲活性、促生作用為理想的生防菌。目前，國

5、內(nèi)外已經(jīng)報道的對根結(jié)及定殖能力進行研究，為進一步開發(fā)針對作物根結(jié)線蟲具有拮抗活性的芽孢桿菌種類達14種。線蟲的生防制劑奠定基礎(chǔ)。蘇云金芽孢桿菌（Bacillusthuringiensis，Bt）1　材料與方法是土壤中廣泛存在的革蘭氏陽性細菌，生長過程中1.1　試驗材料黃大野，男，博士，助理研究員，專業(yè)方向：作物病害生物防治，E-mail：xiaohuangdaye@126.com菌株：蘇云金芽孢桿菌NBIN863，由湖北省生*通訊作者（Correspondingauthors）：姚經(jīng)武，男，助理研究員，專業(yè)方向：物農(nóng)藥

6、工程研究中心分離自安徽省九華山附近（東微生物發(fā)酵，E-mail：bt543150@163.com；劉曉艷，女，博士，副研究員，經(jīng)117°29′，北緯30°39′）的土壤；藥劑：1.8%專業(yè)方向：土傳性病害生物防治，E-mail：xiaoyanliu6613@163.com阿維菌素乳油，由山東濰坊雙星農(nóng)藥有限公司生收稿日期：2015-02-09；接受日期：2015-07-29產(chǎn)；番茄品種：中蔬4號，由中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院蔬菜基金項目：湖北省農(nóng)科院青年基金項目（2012NKYJJ21），國家“863”科技計劃項目（2011AA10A

7、203），農(nóng)業(yè)部“948”項目（2011-G25）花卉研究所選育而成?！?57—《中國蔬菜》學(xué)術(shù)論文下載www.cnveg.org研究論文中國蔬菜CHINAVEGETABLES1.2　試驗方法株根際土壤，0、1、5、10、20d和30d后取整個試驗于2014年7月在武漢市東西湖區(qū)農(nóng)業(yè)科根系及其周圍緊密黏著的土壤。取1g土樣浸泡在-1學(xué)研究所溫室進行。9mL的磷酸緩沖液（50mmol·L）中，置于轉(zhuǎn)速-11.2.1　NBIN863菌株防治番茄根結(jié)線蟲盆栽試驗為150r·min搖床振蕩30min。梯度稀釋所

8、得含-1挑取飽滿度一致的番茄種子，用1%次氯酸鈉溶菌緩沖液，涂布于含20μg·mL利福平的LB培液表面消毒10min，之后用無菌水反復(fù)沖洗5次，養(yǎng)基上，平板于28℃靜置培養(yǎng)2d后進行菌落計-1放入墊有濾紙的培養(yǎng)皿中25℃條件下催芽處理，數(shù)，根際定殖細菌量以logcfu·g計數(shù)。然后放入育苗缽