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《高效液相色譜法與酶聯(lián)免疫法檢測小麥中嘔吐毒素的比較研究》由會員上傳分享,免費在線閱讀,更多相關內(nèi)容在學術論文-天天文庫。
1、糧食與食品工業(yè)Vol.22,2015,No.3標準與檢測CerealandFoodIndustry高效液相色譜法與酶聯(lián)免疫法檢測小麥中嘔吐毒素的比較研究賈衛(wèi)昌,朱寅常州市糧油質(zhì)量監(jiān)督檢測站(常州213016)摘要:以小麥為樣品,通過高效液相色譜法和酶聯(lián)免疫法檢測結(jié)果對比分析,改進高效液相色譜法中的洗脫方法,稀釋酶聯(lián)免疫法中的樣品量。結(jié)果顯示:高效液相色譜法與酶聯(lián)免疫法檢測小麥中嘔吐毒素在200~1500μg/kg存在相關性,即嘔吐毒素含量CHPLC<CELISA,兩者相差平均為149.2μg/k
2、g,RSD為12.6%。酶聯(lián)免疫法操作簡便快速,適用于大量樣品的快速初篩,而高效液相色譜法檢測時間較長,成本較高,更適合經(jīng)ELISA法初篩后呈陽性樣品的確證以及嘔吐毒素含量的準確定量。關鍵詞:小麥;高效液相色譜法;酶聯(lián)免疫法;嘔吐毒素中圖分類號:TS210.7文獻標識碼:A文章編號:1672-5026(2015)03-097-03AcomparativeresearchonthedeterminationofdeoxynivalenolinwheatwithHPLCmethodandELISAJ
3、iaWeichang,ZhuYinChangzhouSupervisionandInspectionStationforGrainandOil(Changzhou213016)Abstract:Usingwheatassample,thedetectionresultsofHPLCandELISAwerecomparedandanalyzed,toimprovetheelutionmethodofHPLC,dilutethesamplequantityofELISA.Theresultsshow
4、thatthereiscorrelationofdetectingtheDONinwheatwithHPLCandELISAwhosecontentisfrom200to1500μg/kg,meaningthattheDONcontentisthatCHPLC<CELISA,andtheaveragedifferencebetweentwomethodsis149.2μg/kg,RSDis12.6%.TheELISAmethodisquickandeasytobeoperatedandsuita
5、blefortherapidscreeningoflargenum-bersofsamples.WhileHPLCmethodtakeslongerandcostshighertodetect,soitismoresuit-ablefortheconfirmationofpositivesamplepreliminarilyscreenedbyELISA,andtheaccuratequantitativeofDONcontent.Keywords:wheat;HPLC;ELISA;DON脫氧雪
6、腐鐮刀菌烯醇又名嘔吐毒素(DON),與1000μg/kg,而根據(jù)調(diào)查監(jiān)測發(fā)現(xiàn)我國部分省份夏雪腐鐮刀菌烯醇均屬于單端孢霉烯族毒素,主要由季小麥的嘔吐毒素超標現(xiàn)象較為嚴重,直接影響了某些鐮刀菌產(chǎn)生。根據(jù)糧食衛(wèi)生標準(GB2715—收儲糧食的質(zhì)量安全。因此加強對小麥中嘔吐毒素2005),小麥中的嘔吐毒素限量要求不超過的監(jiān)測也成為糧食部門每年夏糧收購的重點工作。目前,對小麥中嘔吐毒素檢測主要采用的是高收稿日期:2015-01-09[1-2]效液相色譜法和酶聯(lián)免疫法。高效液相色譜法作者簡介:賈衛(wèi)昌,男,1
7、966年出生,工程師,主要從事糧食質(zhì)量監(jiān)管及糧油檢測工作。按照GB/T23503—2009《食品中脫氧雪腐鐮刀菌97標準與檢測賈衛(wèi)昌等:高效液相色譜法與酶聯(lián)免疫法檢測小麥中嘔吐毒素的比較研究烯醇的測定免疫親和層析凈化高效液相色譜法》方要,準確吸取一定量的脫氧雪腐鐮刀菌烯醇標準儲法進行檢測,其過程是用提取液提取試樣中的脫氧備液,用流動相稀釋,分別配成相當于0.1、0.2、雪腐鐮刀菌烯醇,經(jīng)免疫親和柱凈化后,用高效液相0.5、1.0、2.0、5.0μg/mL的標準工作液。色譜紫外檢測器測定。而酶聯(lián)免
8、疫法是按照GB/T1.2儀器與設備5009.111—2003《谷物及其制品中脫氧雪腐鐮刀菌JXFM110錘式旋風磨,上海賽霸精密儀器有限烯醇的測定》中第二法免疫測定法(ELISA)方法來公司;WZ-2A微量振蕩器,江蘇金壇恒豐儀器廠;檢測,其過程是利用抗原—抗體原理,在已含有抗原1200高效液相色譜儀(配有紫外檢測器),美國安捷的酶標板微孔中加入一定量的單克隆抗體與標準溶倫公司;HSC-12A氮吹儀,天津市恒奧科技發(fā)展液或樣品提取液,孵育后形成抗原抗體復合物,然后有限公司;78HW-1恒溫磁力攪