細(xì)胞成脂、成骨、成神經(jīng)誘導(dǎo)實(shí)驗服務(wù)

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1、細(xì)胞成脂、成骨、成神經(jīng)誘導(dǎo)實(shí)驗服務(wù)實(shí)驗操作流程：成骨誘導(dǎo)培養(yǎng)液配備與誘導(dǎo)操作：?1、準(zhǔn)備含10%FBS的α-MEM培養(yǎng)液；?2、在備好的α-MEM培養(yǎng)液中添加50μM?抗壞血酸,?10mmβ-磷酸甘油和100nm地塞米松；?3、準(zhǔn)備6孔培養(yǎng)板，將P4細(xì)胞按照5×103個/平方厘米的規(guī)格接種于原始α-MEM培養(yǎng)液中；?4、待細(xì)胞長至基本融合后，更換上述制備完成的成骨誘導(dǎo)培養(yǎng)液；?5、每三天換液一次，細(xì)胞長至7天時進(jìn)行堿性磷酸酶染色；?6、二十八天后再進(jìn)行礦化結(jié)節(jié)的茜素紅染色。?【晶萊生物】素紅染色方法介紹：?1、去除細(xì)胞當(dāng)前使

2、用培養(yǎng)液，使用PBS清洗兩次；?2、使用10%甲醛室溫固定15分鐘，完成后使用重蒸餾水沖洗兩次；?3、按照1ml/孔加入40mM的茜素紅染色液，室溫孵育20min并輕微振蕩；?4、清除掉沒有完全結(jié)合的染料，用重蒸餾水漂洗并振蕩5min重復(fù)4次；?5、傾斜放置2min,吸取多余的重蒸餾水；倒置顯微鏡觀察拍照記錄。成脂誘導(dǎo)培養(yǎng)液配備與誘導(dǎo)操作：?1、配置FBS10%含量的HG-DMEM培養(yǎng)液；?2、在配制完成的HG-DMEM培養(yǎng)液中加入1μM地塞米松,10μg/ml胰島素，200μM吲哚美辛和0.5mM?IBMX；?3、準(zhǔn)備6孔

3、培養(yǎng)板，將P4細(xì)胞按照2×104個/平方厘米的規(guī)格接種于原始HG-DMEM培養(yǎng)液中?4、待細(xì)胞長至基本融合后，更換上述制備完成的成脂誘導(dǎo)培養(yǎng)液培養(yǎng)2天，在用只含有10μg/ml胰島素的成脂維持培養(yǎng)液培養(yǎng)1天，如此交替循環(huán)培養(yǎng)至14天，使用紅油O染色。?紅油O染色方法介紹：1、去除細(xì)胞使用的當(dāng)前培養(yǎng)液，使用PBS清洗兩次；?2、27.5%甲醛室溫固定20分鐘；?3、重蒸餾水清洗3此，空氣中干燥；?4、加入0.5%的紅油室溫孵育一小時；?5、配制70%乙醇溶液清洗3次；?6、倒置顯微鏡觀察拍照記錄。?實(shí)驗注意事項：客戶提供：細(xì)胞

4、種類和誘導(dǎo)分化細(xì)胞類型。交付標(biāo)準(zhǔn)：1、成功定向誘導(dǎo)分化的細(xì)胞。2、完整項目報告（材料、試劑、儀器、方法、數(shù)據(jù)分析、實(shí)驗結(jié)果）。做實(shí)驗，找晶萊！您的科研生涯，我們一路相伴！【平臺項目開展范圍】慢病毒，腺病毒，RNAi類，分子生物實(shí)驗，病理實(shí)驗，免疫學(xué)實(shí)驗，細(xì)胞實(shí)驗，動物實(shí)驗，蛋白組學(xué)實(shí)驗，芯片類實(shí)驗，并為廣大客戶朋友們提供課題設(shè)計指導(dǎo)、基金申請指導(dǎo)、SCI、核心期刊等服務(wù)。