pcna、bcl2和bax在喉癌組織中的表達(dá)及其意義

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1、PCNA、Bcl2和Bax在喉癌組織中的表達(dá)及其意義：李正賢，劉庚勛，劉陽(yáng)云，顏美榮【摘要】目的檢測(cè)喉鱗狀細(xì)胞癌組織中PA、Bcl2和Bax的表達(dá)水平，探討PA、Bcl2和Bax在LSCC發(fā)病機(jī)制中的作用。方法采用免疫組化Elivision法檢測(cè)30例喉鱗狀細(xì)胞癌、10例聲帶非典型增生中PA、Bcl2和Bax的表達(dá)水平。結(jié)果30例喉鱗狀細(xì)胞癌中PA、Bcl2和Bax的陽(yáng)性表達(dá)率分別為96.6%(29/30)，93.3%(28/30)和60%(18/30)，聲帶非典型增生中PA、Bcl2和Bax的陽(yáng)性表達(dá)率分別為60%(6/10)，30%(3/10)和

2、70%(7/10)。PA和Bcl2陽(yáng)性表達(dá)兩組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P<0.05，而B(niǎo)ax陽(yáng)性表達(dá)兩組間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P>0.05。結(jié)論喉鱗狀細(xì)胞癌的發(fā)生發(fā)展可能與PA的高表達(dá)和Bcl2與Bax表達(dá)失衡有關(guān)，可能是細(xì)胞異常增生和凋亡失衡的共同結(jié)果【關(guān)鍵詞】PA；Bcl2；Bax;喉腫瘤;鱗狀細(xì)胞癌；凋亡；免疫組織化學(xué)Abstract：ObjectiveTostudytheexpressionsofPA,Bcl2andBaxinlaryngealsquamouscellcarcinoma(LSCC)andtheirroles.MethodsI

3、mmunohistochemicalElivisionmethodinetheexpressionsofPA,Bcl2andBaxin30casesofLSCCand10casesofvocalcordsatypicalhyperplasia(VCAH).ResultsThepositiveratesofPA,Bcl2andBaxaybeapositivefactorinthepathogenesisofLSCC.ItissuggestedthatLSCCdevelopmentmayresultfromacooperationofabnormalproli

4、ferationandunbalancedapoptosis.Key;squamouscellcarcinoma;apoptosis;immunohistochemistry喉鱗狀細(xì)胞癌（LaryngealsquamouscellCarcinoma，LSCC）的形成是一非常復(fù)雜的過(guò)程，與多個(gè)基因或多個(gè)分子水平變化密切相關(guān)。細(xì)胞失控性增殖與凋亡異常可能是腫瘤發(fā)生的原因之一。我們應(yīng)用免疫組織化學(xué)Elivision法檢測(cè)LSCC組織中凋亡相關(guān)基因Bcl2、Bax和表示細(xì)胞增殖指標(biāo)的PA的表達(dá),旨在探討PCAN，Bcl2和Bax基因產(chǎn)物在LSCC發(fā)病機(jī)制中的作用。為

5、LSCC的基因治療提供新依據(jù)。1資料與方法1.1一般資料選擇本院1995—2005年門(mén)診及住院的30例初發(fā)的進(jìn)行期LSCC患者的手術(shù)標(biāo)本。本組病例中男27例，女3例,平均年齡57.3歲，臨床分型：聲門(mén)上型3例，聲門(mén)型25例，聲門(mén)下型2例；臨床分期按國(guó)際抗癌協(xié)會(huì)1997年修訂的TNM分類(lèi)及分期：T14例，T215例，T39例，T42例；N019例，N17例，N24例；Ⅰ期2例，Ⅱ期19例，Ⅲ期6例，Ⅳ期3例；組織學(xué)分級(jí)：高分化鱗癌18例，中分化鱗癌7例，低分化鱗癌5例。對(duì)照組為同期手術(shù)的10例聲帶非典型增生（vocalcordsatypicalhyperplasi

6、a，VCAH），平均年齡45.6歲。標(biāo)本經(jīng)10%甲醛固定,常規(guī)脫水、石蠟包埋。1.2方法標(biāo)本經(jīng)固定后，常規(guī)脫水石蠟包埋，作3μm連續(xù)切片，分別進(jìn)行HE染色和免疫組織化學(xué)染色。切片脫蠟至水化，3％過(guò)氧化氫孵育10min，消除內(nèi)源性過(guò)氧化物酶活性，蒸餾水沖洗，PBS浸泡3×2min，微波爐抗原修復(fù)（95～98℃），自然冷卻至室溫，加入即用型Bcl2、Bax和1：100PA單克隆抗體，37℃孵育30min，或4℃過(guò)夜，用普通小鼠IgG及PBS代替一抗作陰性及空白對(duì)照，PBS沖洗3×2min，滴加增強(qiáng)劑（A），37℃孵育30min，PBS沖洗3×2min，滴加生物素聚

7、合物（B），37℃孵育30min，PBS沖洗3×2min。二氨基聯(lián)苯胺顯色，蘇木素復(fù)染，中性樹(shù)膠封片，顯微鏡觀察照相。1.3染色結(jié)果判斷陽(yáng)性細(xì)胞為呈棕黃色顆粒的陽(yáng)性反應(yīng)產(chǎn)物。每張切片在高倍顯微鏡下(200倍)隨機(jī)選擇5個(gè)視野，計(jì)算每個(gè)視野陽(yáng)性細(xì)胞率，取平均值作為該標(biāo)本的陽(yáng)性細(xì)胞率。表達(dá)結(jié)果分為陰性（-）：無(wú)陽(yáng)性細(xì)胞；弱陽(yáng)性（+）：陽(yáng)性細(xì)胞率<50%；強(qiáng)陽(yáng)性（++）：切片中陽(yáng)性細(xì)胞率>50%。1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法結(jié)果應(yīng)用χ2檢驗(yàn)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。所有數(shù)據(jù)在SPSS11.0統(tǒng)計(jì)軟件上進(jìn)行，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。2結(jié)果2.1Bcl2、Bax在

8、LSCC及VCAH中的表