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《toll樣受體4在佐劑性關(guān)節(jié)炎模型大鼠外周血單核細(xì)胞中的表達(dá)及意義》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在應(yīng)用文檔-天天文庫。
1、Toll樣受體4在佐劑性關(guān)節(jié)炎模型大鼠外周血單核細(xì)胞中的表達(dá)及意義：張殿增，孟列素，王紅英【摘要】目的研究佛氏完全佐劑性關(guān)節(jié)炎(AIA)大鼠外周血單核細(xì)胞(PBMC)對Toll樣受體4(Toll-likereceptor4,TLR4)、TLR4mRNA的表達(dá)及其與關(guān)節(jié)炎評分的關(guān)系。方法流式細(xì)胞儀測定CD14+TLR4+細(xì)胞占CD14+細(xì)胞的比例和TLR4-PE的平均熒光強度(MIF)；Northernblot法測定PBMCTLR4mRNA的表達(dá)量。比較造模后15d與正常對照組和造模后25d時CD14+TLR4+/CD14+、MIF及其TLR4mRNA表達(dá)量的差異，并用Mann-IF的相關(guān)性。
2、結(jié)果在造模后15d，CD14+TLR4+/CD14+、TLR4MIF和PBMCTLR4mRNA的表達(dá)較正常對照組和造模后25d明顯增高(P<0.01)，而且TLR4MIF與關(guān)節(jié)炎的評分有明顯的相關(guān)性(15d：r=0.826，P<0.01；25d：r=0.688，P<0.05)。但造模后25d，CD14+TLR4+/CD14+、TLR4MIF和PBMCTLR4mRNA的表達(dá)與正常對照組和造模前相比無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。結(jié)論TLR4與AIA發(fā)病有密切關(guān)系，提示固有免疫反應(yīng)在類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎(RA)及其他自身免疫性疾病的發(fā)病中有重要的作用。【關(guān)鍵詞】佐劑性關(guān)節(jié)炎；大鼠
3、；Toll樣受體4；外周血單核細(xì)胞 ABSTRACT:ObjectiveTodemonstratetheroleofinnateimmunityreactioninrheumatoidarthritisandotherautoimmunediseasesbystudyingtheexpressionoftoll-likereceptor4(TLR4)byperipheralbloodmononuclearcell(PBMC)inratseanintensityoffluorescence(MIF)ofTLR4+cellsetry.ExpressionofTLR4mRNAbyPBMCined
4、byNorthernblot.CD14+TLR4+/CD14+ratio,TLR4MIFandexpressionofTLR4mRNAbyPBMCinthemodelgroupat15daysafterAIAalcontrolgroupandmodelgroupat25days.ThecorrelationbetRNAexpressioninmodelgroupat15daysafterAIAodelgroupsat25days(P<0.01),andagoodcorrelationbetodelgroupat25daysafterAIA(P>0.05).Itindicatedt
5、hatTLR4participatedinthepathogenesisofrheumatoidarthritis.ConclusionTLR4expressedbyPBMCiscloselyassociatedatoidarthritis,munityresponseplaysanimportantroleinpathogenesisofRAandotherautoimmunediseases. KEYP)，介導(dǎo)宿主先天性免疫反應(yīng)，并激活后天獲得性免疫反應(yīng)。TLR4是表達(dá)于除T、B淋巴細(xì)胞和NK細(xì)胞以外的所有免疫細(xì)胞的表面，對PAMP具有廣譜識別功能［1］。近來的研究發(fā)現(xiàn)，葡萄球菌的細(xì)胞
6、壁不能使TLR信號傳導(dǎo)連接蛋白缺乏的小鼠產(chǎn)生關(guān)節(jié)炎［2］，TLR4缺乏小鼠關(guān)節(jié)炎的嚴(yán)重程度明顯減輕［3］，在小鼠關(guān)節(jié)內(nèi)注射TLR配體可使之產(chǎn)生嚴(yán)重的關(guān)節(jié)炎［4-7］，在類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎(RA)患者的關(guān)節(jié)內(nèi)存在由微生物產(chǎn)生的TLR配體。由此我們推測，TLR信號傳導(dǎo)系統(tǒng)在RA的發(fā)生和發(fā)展過程中起著重要的作用。因此，在本研究中，我們通過檢測RA小鼠模型外周血單核細(xì)胞(PBMC)表面TLR4及其mRNA的表達(dá)情況，并分析其與關(guān)節(jié)炎嚴(yán)重程度的關(guān)系，闡明TLR在RA發(fā)病和進展中的作用?！ ?材料與方法 1.1實驗動物及模型建立 體重為150-200g的SD品系大白鼠，雄性，由西安交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院實驗動物中
7、心提供。群居籠養(yǎng)，供丸劑飼料和自來水，自由攝食飲水。造模時于大鼠尾巴根部注射弗氏完全佐劑，誘發(fā)類似于人類RA的關(guān)節(jié)炎，根據(jù)動物耳部、尾部結(jié)節(jié)的數(shù)目和足跖關(guān)節(jié)腫脹度，按0-4級評分(Score)［8］?！ ?.2主要試劑和儀器 CD14-FITC和TLR4-PE單克隆抗體分別購自GenemyInc和SantaCruz生物技術(shù)公司；RT-PCR所用的酶及其試劑盒購自北京天為時代科技有限公司。FACSCalibu
