尖銳濕疣患者外周血t淋巴細(xì)胞亞群與局部細(xì)胞 免疫功能的相關(guān)性研究

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1、尖銳濕疣患者外周血T淋巴細(xì)胞亞群與局部細(xì)胞免疫功能的相關(guān)性研究【關(guān)鍵詞】尖銳濕疣；T細(xì)胞亞群；流式細(xì)胞儀；免疫組織化學(xué)［摘要］目的研究尖銳濕疣（condylomaacuminatum,CA）患者外周血T細(xì)胞亞群（CD4+、CD8+）及皮損局部T細(xì)胞亞群（CD4+、CD8+）的變化及二者的相關(guān)性。方法應(yīng)用流式細(xì)胞儀檢測42例CA患者及30例正常對照者外周血T細(xì)胞亞群（CD4+、CD8+、CD4+/CD8+）的百分比；同時(shí)用免疫組織化學(xué)S-P法對尖銳濕疣患者皮損的表、真皮T細(xì)胞亞群進(jìn)行測定。結(jié)果CA組外周血CD4+T細(xì)胞表達(dá)率（25.21±5.

2、77）%明顯低于正常對照組（35.05±3.06）%，CD8+T細(xì)胞表達(dá)率（39.34±7.46）%，顯著高于正常對照組（26.39±2.32）%，二者均具有非常顯著性差異（P＜0.01），CD4+/CD8+比值患者組（0.67±0.26）顯著低于正常對照組（1.35±0.19）（P＜0.01）；且CA組真皮每高倍視野中CD4+T細(xì)胞表達(dá)（185.39±31.69）明顯高于正常對照組CD4+T細(xì)胞（60.64±9.11）（P＜0.01），CA組CD8+T細(xì)胞表達(dá)（228.86±33.26）顯著高于正常對照組（35.59±6.17）（P＜0.

3、01），CA組CD4+/CD8+的比值（0.81±0.10）顯著低于正常對照組（1.73±0.25）（P＜0.01）；經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析CA患者外周血CD4+T細(xì)胞、CD8+T細(xì)胞的變化與皮損局部的CD4+T細(xì)胞、CD8+T細(xì)胞的變化尚不能認(rèn)為有相關(guān)性（P＞0.05）。結(jié)論CA患者存在細(xì)胞免疫功能降低，CA的發(fā)?。ò▉喤R床感染、潛伏感染）、復(fù)發(fā)及再感染與機(jī)體的細(xì)胞免疫功能密切相關(guān)，從而為CA的治療提供理論依據(jù)。［關(guān)鍵詞］尖銳濕疣；T細(xì)胞亞群；流式細(xì)胞儀；免疫組織化學(xué)PeripheralTcellsubsetandlocalcytoimmunef

4、unctionincondylomaacuminatum［Abstract］ObjectiveTostudythechangesofTcellsubset（CD4+,CD8+）inbothperipheralbloodandpartiallesionsinpatientsaacuminatum（CA）,andtherelationship.MethodsTodescribethelevelsofCD4+Tcell,CD8+TcellandCD4+/CD8+in42patientsalcontrolsbyfloetry;tocountthen

5、umbersofTcellsubsetinpartiallesionsediatedimmunodeficiencyexistsinpatientsediatedimmunity,aacuminatum；Tcellsubset；floetry；immunohistochemistry尖銳濕疣（condylomaacuminatum，CA）又稱尖圭濕疣、生殖器疣（genitall至抗凝管中；2％利多卡因注射液局麻手術(shù)切除0.5cm大小皮損。1.2.2試劑外周血CD4+T細(xì)胞,CD8+T細(xì)胞抗體（CD4+FITC/CD8+PE）購自法國IMMU

6、NOTECH公司。免疫組化CD4+T細(xì)胞,CD8+T細(xì)胞抗體購自福建邁新生物技術(shù)開發(fā)公司。CD4+T細(xì)胞抗體為鼠抗人單克隆抗體（編號(hào)MAB－0251），工作濃度1∶20，CD8+T細(xì)胞抗體為鼠抗人單克隆抗體（編號(hào)MAB－0021），為工作即用型。SP試劑盒為福建邁新公司產(chǎn)品。1.2.3流式細(xì)胞儀分析采用美國COULTER公司生產(chǎn)的流式細(xì)胞儀。1.2.4免疫組化福爾馬林浸泡組織，常規(guī)石蠟包埋組織，切片厚5μm。石蠟脫水3％雙氧水室溫孵育10min以消除內(nèi)源性過氧化物酶的活性。蒸餾水洗滌5min。PBS液洗滌3遍。CD4+T細(xì)胞用EDTA進(jìn)行抗

7、原修復(fù)，CD8+T細(xì)胞用枸櫞酸熱修復(fù)。血清封閉20min。傾去血清，分別加一抗，4℃過夜。室溫放置30min。PBS沖洗，5min×3次。滴加二抗，37℃孵育30min。PBS沖洗，5min×3次。滴加三抗，37℃孵育30min。PBS沖洗，5min×3次。DAB顯色。自來水充分沖洗，復(fù)染，封片。1.2.5統(tǒng)計(jì)學(xué)方法應(yīng)用SPSS10.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析。兩樣本均數(shù)比較采用t檢驗(yàn)，兩組指標(biāo)間做相關(guān)分析。1.3結(jié)果判定流式細(xì)胞：計(jì)數(shù)每1萬個(gè)細(xì)胞中標(biāo)記細(xì)胞的百分比。免疫組化：以細(xì)胞膜出現(xiàn)棕黃色染色為陽性細(xì)胞。獨(dú)立觀察每張切片5個(gè)具有代表性的高表達(dá)

8、視野，分別計(jì)數(shù)每個(gè)高倍鏡視野下陽性細(xì)胞的數(shù)量，計(jì)算均數(shù)和標(biāo)準(zhǔn)差。2結(jié)果2.1外周血CD4+T細(xì)胞、CD8+T細(xì)胞的表達(dá)見表1。表1外周血T淋巴細(xì)胞亞群檢測結(jié)果注：各組兩兩比較，*