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《正交設計法優(yōu)選老鷹茶總皂苷的提取工藝研究》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關內(nèi)容在應用文檔-天天文庫。
1、正交設計法優(yōu)選老鷹茶總皂苷的提取工藝研究作者：陸維麗李俊周維晨程文明湯文建【摘要】 目的對從老鷹茶中提取總皂苷的工藝進行優(yōu)化。方法以齊墩果酸為對照品，香草醛-高氯酸法顯色，用紫外分光光度法在550nm處測定總皂苷含量。采用L9（34）正交設計，以老鷹茶總皂苷含量為考察指標，考察乙醇濃度、提取時間、乙醇用量、提取次數(shù)4個因素對提取的影響。結果最佳提取工藝為80%乙醇，12倍量，回流提取3次，1h/次。結論該工藝經(jīng)實驗重復性好，對進一步的工藝開發(fā)有較好的參考價值。【關鍵詞】老鷹茶總皂苷正交實驗紫外分光光度法 老鷹茶系樟科木姜子屬毛豺皮樟LitseacoreanaLev
2、e的葉，俗稱“白茶”，分布于云南、貴州、四川、安徽等地。民間飲用表明老鷹茶具有解毒消腫、明目益思、生津止渴、解表防暑等功效，且無毒副作用，為藥食同源植物［1］，長期飲用有益于健康。老鷹茶中含有黃酮、皂苷、有機酸、香豆素和鞣質等成分，其中皂苷類成分含量豐富［2］。研究老鷹茶的化學成分，對研究天然產(chǎn)物化學多樣性，以及尋找新的藥用成分具有重要意義。為了有效開發(fā)和利用資源，本文采用正交實驗對老鷹茶總皂苷的提取工藝進行了研究。 1儀器與試藥 1.1儀器722S分光光度計；8453紫外-可見分光光度計(Agilent)；電子天平BP211D(Sartorius)；GSY-8電
3、熱恒溫水浴鍋；EK-S5AB電熱真空干燥箱?！ ?.2試藥齊墩果酸標準品，購自中國藥品生物制品檢定所；老鷹茶，2006-05購自安徽省寧國縣茶農(nóng)，陰干備用，經(jīng)植物學鑒定為樟科木姜子屬毛豺皮樟LitseacoreanaLeve的葉。試劑均為分析純，水為雙蒸餾水?！ ?方法與結果 2.1標準曲線的制作［3］精密稱取經(jīng)120℃干燥至恒重的齊墩果酸標準品5.0mg，置于25ml容量瓶中，甲醇定容，搖勻，即得對照品溶液(每毫升含齊墩果酸標準品0.2mg)。精密量取對照品溶液0.0，0.2，0.4，0.6，0.8，1.0ml于10ml試管中，抽干甲醇，加0.2ml5%香草醛，0
4、.8ml高氯酸，搖勻于60℃水浴中加熱15min，冷卻，加冰醋酸5ml，搖勻。以相應試劑做空白，在8453紫外-可見分光光度計上進行全波長掃描，最大吸收波長為（λmax）550nm。按分光光度法在550nm波長處測定吸光度。以吸光度值(Y)為縱坐標，對照品濃度(X)為橫坐標繪圖，得回歸線性方程Y=53.666X-0.0674，r=0.9999，線性范圍：6.6667～33.3333mg·L-1。 2.2提取溶劑的選擇 2.2.1水提取法精密稱取老鷹茶5g，加水50ml，在水浴上加熱回流提取1h，趁熱過濾，共提取2次，洗滌殘渣，合并濾液和洗滌液，蒸干溶劑。固體水溶后
5、，正丁醇萃取，萃取液過氧化鋁柱，收集流出液，定容至200ml容量瓶中，搖勻，待用。 2.2.2乙醇提取法精密稱取老鷹茶5g，加80%乙醇50ml，在水浴上加熱回流提取1h，趁熱過濾，共提取2次，洗滌殘渣，合并濾液和洗滌液，蒸干溶劑。固體水溶后，正丁醇萃取，萃取液過氧化鋁柱，收集流出液，定容至200ml容量瓶中，搖勻，待用?！ ?.2.3樣品中總皂苷的含量測定精密量取供試品溶液0.3ml，按標準曲線方法進行操作，測定吸光度值，由回歸方程計算樣品中總皂苷的含量。結果見表1?！ ”?提取溶劑與含量的關系（略） 2.3正交實驗設計與結果根據(jù)藥材性質和生產(chǎn)實際要求，擬定影響
6、浸出效果的4個主要因素，即A為乙醇濃度(%)，B為乙醇用量(倍體積)，C為提取時間(h/次），D為提取次數(shù)，每個因素選擇3個水平，編制因素水平表見表2?！ ”?因素水平（略） 稱取適量老鷹茶干燥粗粉9份，按正交實驗設計的工藝進行提取，以老鷹茶提取物中總皂苷含量為考核指標，對正交實驗結果進行方差分析見表3～4?！ ”?正交試驗(L934)直觀分析（略） 表4方差分析（略） 根據(jù)分析結果可知，各個因素對老鷹茶總皂苷提取效果的影響程度依次為A（乙醇濃度）>D（提取次數(shù)）>C（提取時間）>B（乙醇用量），且對提取效果影響有統(tǒng)計學意義的因素是因素A（乙醇
7、濃度）。綜合直觀分析和方差分析的結果，老鷹茶總皂苷理想的提取工藝方案是A3B3C1D3，即用12倍量的80%乙醇，回流提取3次，1h/次。 2.4提取工藝的驗證實驗為進一步考察上述最佳工藝的穩(wěn)定性和合理性，按該工藝條件進行重復性實驗3次，分別測定老鷹茶總皂苷的含量。結果見表5。測定的結果均等于或優(yōu)于正交實驗表中的任何一組，重復性好，RSD=0.934%(n=3)。說明該工藝穩(wěn)定可行?！ ”?最佳工藝的驗證實驗（略） 3討論 香草醛-高氯酸法顯色體系最大吸收波長在550nm處，該顯色體系呈色穩(wěn)定，但由于老鷹茶粗提物中有色物質的干擾，粗提物須經(jīng)過氧
