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《熱療對(duì)肺癌a549細(xì)胞周期和凋亡的影響》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在應(yīng)用文檔-天天文庫(kù)。
1、熱療對(duì)肺癌A549細(xì)胞周期和凋亡的影響：蔣東，李芳，沈文明，鄭世營(yíng)【摘要】目的：研究在不同溫度、不同加熱時(shí)間的條件下熱療對(duì)人肺腺癌A549細(xì)胞生長(zhǎng)的影響。方法：不同溫度、不同時(shí)間加熱后，采用流式細(xì)胞技術(shù)觀察熱療對(duì)人肺腺癌A549細(xì)胞株細(xì)胞周期和凋亡的影響。結(jié)果：流式細(xì)胞技術(shù)檢測(cè)顯示A549細(xì)胞經(jīng)熱療處理后，細(xì)胞生長(zhǎng)相應(yīng)的滯留于細(xì)胞生長(zhǎng)周期的G1期，細(xì)胞凋亡明顯，細(xì)胞減少。熱療在不同溫度、不同時(shí)間加熱時(shí)間的條件下，導(dǎo)致A549細(xì)胞出現(xiàn)凋亡和壞死的程度不同，其中加熱至42℃維持2h處理組中凋亡最為明顯。結(jié)論:熱療可抑制人肺腺癌A549細(xì)胞的增殖,使細(xì)胞
2、周期阻滯于G1期,并且在加熱至42℃維持2h時(shí)細(xì)胞凋亡最為明顯?！娟P(guān)鍵詞】肺癌；熱療；細(xì)胞周期；凋亡[Abstract]Objective:ToinvestigatetheinfluenceofthermotherapyonthegroonarycarcinosisA549cellunderdifferenttemperatureandheatingtime.Methods:ThefloetryonarycarcinosisA549cell,afterthecellotherapyunderdifferenttemperatureandheatin
3、gtime.Results:ThefloetershoberofA549cellongthedifferentconditionsofthermotherapyandinthegroupheatedfor2hoursunder42℃,remarkableapoptosiscouldbeobserved.Conclusion:TheproliferationofpulmonarycarcinosisA549cellotherapy,andremarkableapoptosiscouldbeobservedonarycarcinoma;Thermoth
4、erapy;Cellcycle;Apoptosis近年來(lái)腫瘤熱療已成為繼手術(shù)、化療、放療、生物治療之后的對(duì)腫瘤的第5類有效治療手段，但其機(jī)制還不完全清楚。本實(shí)驗(yàn)以我們培養(yǎng)的肺癌A549細(xì)胞株為研究對(duì)象，觀察不同溫度、不同時(shí)間熱療對(duì)其細(xì)胞周期及凋亡的影響。流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞周期及凋亡情況，以期對(duì)臨床治療提供有益的探索，并初步探討其機(jī)制。1材料和方法1.1材料人肺癌A549細(xì)胞株為蘇州大學(xué)醫(yī)學(xué)院分子生物實(shí)驗(yàn)室提供。RPMI1640培養(yǎng)基（Gibco），小牛血清（杭州四季青），水浴箱（北京長(zhǎng)風(fēng)公司），培養(yǎng)箱（德國(guó)賀利氏集團(tuán)公司），低速離心機(jī)（北京醫(yī)用離心
5、機(jī)廠），流式細(xì)胞儀BeckmanFC500(美國(guó))。1.2方法1.2.1細(xì)胞培養(yǎng)肺癌A549細(xì)胞常規(guī)在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)液中，37℃、5%CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng),待細(xì)胞生長(zhǎng)匯合達(dá)85%時(shí),用0.25%胰酶消化，按1∶3傳代。實(shí)驗(yàn)時(shí)選取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期細(xì)胞。1.2.2加溫實(shí)驗(yàn)將對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期細(xì)胞用0.25%胰酶消化、打勻，分裝入無(wú)菌10ml離心管。實(shí)驗(yàn)分為實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組：（1）不同時(shí)間熱療組實(shí)驗(yàn)組：將對(duì)數(shù)生長(zhǎng)細(xì)胞放置入離心管中在42℃水浴中加熱30min，1h，2h，4h；對(duì)照組將細(xì)胞消化裝入離心管放置37℃水浴放置30min，1h，2h，4h
6、；（2）不同溫度熱療組實(shí)驗(yàn)組：將對(duì)數(shù)生長(zhǎng)細(xì)胞放置入試管中分別在40℃，42℃，44℃，46℃水浴中加熱1h；對(duì)照組將細(xì)胞消化裝入試管放置37℃水浴放置1h。1.2.3流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞周期及凋亡將上述細(xì)胞離心后,新鮮培養(yǎng)液打勻繼續(xù)37℃、5%CO2培養(yǎng)24h，收集細(xì)胞，用4℃預(yù)冷的PBS洗2次，加70%的冰乙醇固定過(guò)夜后，脫乙醇離心棄上清后，預(yù)冷的PBS洗1次，加入含RNA酶（100μg/ml）的PI（50μg/ml）染液1ml，避光30min后上機(jī)檢測(cè)。觀察細(xì)胞周期的變化。分析軟件為PHOENIXFLOSMulticycleAVfor期細(xì)胞都明顯
7、增加(P<0.05)，凋亡指數(shù)也都明顯增加（P<0.05）。37℃組內(nèi)細(xì)胞周期及凋亡指數(shù)無(wú)明顯差異(P>0.05)。而在42℃組內(nèi)，以加熱2h組的細(xì)胞周期變化最為明顯，42℃，2h組與其它不同加熱時(shí)間組相比較，G0/G1期細(xì)胞明顯減少(P<0.05)，S期細(xì)胞明顯增加(P<0.05)，凋亡指數(shù)也明顯增加（P<0.05）。3討論熱療治療腫瘤比較可靠的文獻(xiàn)首推1866年德國(guó)醫(yī)師Busch的報(bào)道。自上世紀(jì)60年代以來(lái)，熱療已悄然走進(jìn)治療領(lǐng)域，近20年來(lái)，在細(xì)胞生物、分子生物、蛋白質(zhì)及基因等各個(gè)水平上關(guān)于熱療的基礎(chǔ)研究都
8、取得了明顯的進(jìn)步[1]。目前有關(guān)腫瘤熱療的生物學(xué)研究遠(yuǎn)遠(yuǎn)領(lǐng)先于臨床應(yīng)用，且側(cè)重于臨床應(yīng)用。在臨床實(shí)踐中，常用熱療來(lái)配合腫瘤
