非小細胞肺癌肺耐藥相關(guān)蛋白定量分析及其臨床意義

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1、非小細胞肺癌肺耐藥相關(guān)蛋白定量分析及其臨床意義【摘要】目的探討非小細胞肺癌(NSCLC)組織肺耐藥相關(guān)蛋白（LRP）表達及其臨床意義。方法應用組織芯片技術(shù)結(jié)合免疫組化PV9000二步法檢測術(shù)前未經(jīng)化療的72例NSCLC組織中LRP的表達，并采用圖像分析技術(shù)進行定量測定。結(jié)果LRP主要在NSCLC的細胞漿表達，細胞膜有少量表達，總陽性表達率為77.78％。LRP表達強度與組織學類型有關(guān)，在腺癌中陽性顆粒的平均吸光度與積分吸光度均高于鱗癌(t=6.977、6.114，P<0.001)；LRP表達強

2、度與腫瘤細胞分化程度有關(guān)，隨分化程度的降低平均吸光度與積分吸光度均降低（F=4.717、5.324，P<0.05）；其表達強度與臨床分期、有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、腫瘤大小及年齡無關(guān)（F=1.901、2.165，t=0.837～2.165，P>0.05）。結(jié)論檢測LRP在NSCLC組織中的定量表達，能準確地反映NSCLC組織的耐藥性及對化療的敏感性，在指導腫瘤化療方面具有重要的臨床意義?！娟P(guān)鍵詞】肺耐藥相關(guān)蛋白癌非小細胞肺組織學技術(shù)［ABSTRACT］ObjectiveTostudytheexpre

3、ssionoflungresistancerelatedprotein(LRP)innonsmallcelllungcancer(NSCLC)anditsclinicalsignificance.MethodsNSCLCspecimens(n=72)inedbythebinedtechniquesoftissuechipandimmunohistochemistry.TheexpressionofLRPageanalysissystem.Chemotherapyedinallcasesbefore

4、surgery.ResultsExpressionofLRPainlyinthecytoplasmofNSCLC,feembrane.ThetotalpositiverateofLRPexpressionmunostainingulateddensityofLRPathaninsquamouscellcarcinoma（t=6.977，6.114；P<0.001）,andhigherinphnodemetastasis,patientsageortumorsize（F=1.901，2.165

5、;t=0.837-2.165；P>0.05）.ConclusionQuantitativeanalysisofLRPexpressioninNSCLCcanotherapy.Itisofclinicalsignificancetoguidethechemotherapy.［KEYa,nonsmallcelllung;histologicaltechniques肺癌是我國最常見的惡性腫瘤之一，其發(fā)病率近年來也呈迅速上升趨勢。在我國一些大城市，其發(fā)病率占成年人惡性腫瘤發(fā)病率的第一位，已經(jīng)成為人類因

6、腫瘤致死的首位病因，其中非小細胞肺癌(NSCLC)占所有肺癌的75%～80%。NSCLC單純手術(shù)治療效果不佳，5年生存率平均只有50％左右。目前多采用手術(shù)與放、化療結(jié)合的綜合治療方案，化療仍是肺癌主要的治療手段之一［1］。腫瘤細胞產(chǎn)生的耐藥性是影響化療效果最常見而又最難解決的問題。已有許多研究表明，肺耐藥相關(guān)蛋白(LRP)過度表達與肺癌化療耐藥密切相關(guān)［2］。檢測LRP在NSCLC組織中的表達，以往多采用定性的方法，而檢測其定量表達目前未見報道。本研究應用組織芯片及免疫組織化學技術(shù)結(jié)合形態(tài)學計量，檢測

7、LRP在NSCLC組織中的定量表達，探討其與NSCLC生物學行為的關(guān)系，預測腫瘤對化療的敏感性，從而指導腫瘤化療。1材料和方法1.1標本收集青島大學醫(yī)學院附屬醫(yī)院2003～2005年經(jīng)病理證實的非小細胞肺癌手術(shù)標本共72例，均為石蠟包埋標本，術(shù)前病人未進行化療,其中年齡<60歲35例，≥60歲37例；腫瘤直徑≤3cm組30例，>3cm組42例；鱗癌30例，腺癌42例；淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組39例，淋巴結(jié)無轉(zhuǎn)移組33例；高分化組16例，中分化組26例，低分化組30例；按臨床分期(1997年肺癌國際分期

8、修正系統(tǒng)):Ⅰ期29例,Ⅱ期19例,Ⅲ期24例。復習全部病例的臨床病理資料及蘇木精伊紅染色切片，每例標本選取癌組織典型代表區(qū)域，直徑約2mm，制作成2枚組織芯蠟塊。1.2免疫組織化學染色鼠抗人LRP單克隆抗體、PV9000檢測試劑盒及DAB顯色劑均購自北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司。4μｍ厚組織芯石蠟切片脫蠟,系列乙醇水化至蒸餾水，體積分數(shù)為0.03的過氧化氫滅活內(nèi)源性過氧化物酶，微波修復，采用免疫組織化學PV9000二步法染色，用DAB顯色。切片不