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1、壽胎丸對SD孕鼠胚胎作者:劉丹卓,尤昭玲,趙新廣【摘要】目的探討壽胎丸對sd孕鼠胚胎-胎仔發(fā)育的毒性,對其生殖安全性進行研究。方法采用壽胎丸不同劑量對sd孕鼠體內染毒,觀察其吸收胎、畸胎等,并觀察胎仔內臟、骨骼及胎仔體質發(fā)育等異常狀況。結果其不同劑量對孕鼠胎仔活胎率、吸收胎率和畸胎率影響,以及對胎仔內臟、骨骼和體質發(fā)育影響,與溶劑對照比較均未見明顯差異。結論壽胎丸藥液在本研究所確定的50g/kg劑量濃度以下,初步認為對健康育齡sd孕鼠生殖功能及其胚胎發(fā)育無明顯毒性?!娟P鍵詞】壽胎丸;生殖毒性;安全性壽胎丸乃清代鹽山名醫(yī)張錫純
2、所創(chuàng),出自《醫(yī)學衷中參西錄》,原為護胎而設,后經多年來臨床醫(yī)家們反復實踐與錘煉,已演繹成為治療胎漏、胎動不安、自發(fā)流產、滑胎的首選方。壽胎丸被廣泛用于妊娠期,其藥效已得到了充分肯定,但臨床運用安全性研究至今未見詳細報道。有效評價藥物對女性生殖功能的毒性有著深遠的意義,女性生殖系統(tǒng)是藥物作用的一個特有的靶器官,女性生殖系統(tǒng)復雜且所有配子在出生前就已形成,所以其損害可能是多靶點及永久性的,并可導致完全絕育[1]。.有鑒于此,本文通過其不同劑量對sd孕鼠體內染毒,進行生殖毒性測定,以期獲得其繼藥效學之后的臨床前毒效學資料,為其孕期
3、合理和安全應用提供實驗學依據?! ?材料與儀器 1.1藥液制備 對所需中藥藥材的來源及品種進行鑒定,篩選優(yōu)質正品,原料經品種鑒定無誤后,再進行挑選和洗凈,然后炮制、切片、烘干、粉碎。嚴格按經典處方比例用量配備,制取工藝如下:①取經加工炮制的標準中藥飲片(菟絲子、續(xù)斷、桑寄生)加蒸餾水6~8倍量,水液煎煮2次,1.5h/次,合并濾液,濃縮至相對密度為1.1~1.2(50~60℃);②加入乙醇使醇含量達65%,冷藏24h,醇液濾過,濾液回收乙醇,至無醇味;③阿膠烊化;④以上兩液合并,濾過;⑤濾液冷藏放置,視無沉淀析出;⑥添加
4、蒸餾水,調ph值至6.5~7.0,并調整至相當于含生藥2g/ml;⑦精濾、灌封、滅菌即得。 1.2試劑與儀器 40%甲醛,北京化學試劑公司生產;冰乙酸,北京化學試劑公司生產;95%乙醇,北京化學試劑公司生產。丙三醇,北京化學試劑公司生產。光學顯微鏡,日本olymmpussz-st型。電子分析天平,美國ag-104,感量值0.01g。游標卡尺,天津儀器廠生產?! ?.3動物取經檢疫 1周的健康性成熟未經交配生育的sprague-dag/(kg·d)。 2.3實驗步驟及觀測指標 妊娠第20天頸椎脫臼處死孕鼠,切開腹部暴
5、露兩側子宮,縱切子宮,分離胎仔,記錄死胎、活胎和早晚吸收胎,稱量子宮與胎仔重量,并記錄仔代雄雌性別比。對每只活胎胎鼠先經肉眼檢查,肉眼不能確定某種畸形,則將胎鼠放在解剖顯微鏡下進一步確定并照相。將每窩一半胎鼠放入bouin's液固定,進行胎仔身長、尾長測定,并進行內臟檢查;另一半放入90%酒精中固定進行骨骼檢查,計算骨骼畸形發(fā)生率;檢查各臟器有無異常,計算內臟畸形發(fā)生率?! ?.4統(tǒng)計學分析 全部數據統(tǒng)計分析均采用sas9.13版軟件,由計算機完成。各組胎鼠平均體重、身長、尾長等計量資料以±s表示,數據采用t檢驗進行顯著性
6、分析?;钐ァ⑺捞?、畸胎、早晚吸收胎等計數資料以百分率(%)表示,數據采用χ2檢驗進行顯著性分析?! ?結果 3.1壽胎丸對妊娠期孕鼠生殖狀態(tài)影響 壽胎丸各劑量組活胎率為97.74%~98.51%,溶劑對照組活胎率為97.57%,壽胎丸各劑量組與溶劑對照組比較,其活胎率未見有明顯差異(p>0.05)。各劑量組孕鼠的死胎率與溶劑對照組相當,在0.0%~0.4%之間,僅偶見死胎。壽胎丸不同劑量組的吸收胎率,均與溶劑對照組相當,未見有明顯差異。在胎鼠畸形方面,其高、中、低不同劑量組胎鼠的畸胎率(0.75%~1.54%)與溶劑對照
7、組(1.24%)相比,差異無顯著性(p>0.05)。陽性對照組活胎率(87.94%)和死胎率(0.39%)均與溶劑對照組相近,但畸胎率(37.61%)和吸收胎率(11.67%)明顯高于溶劑對照組,具有非常顯著性意義(p<0.01)。結果見表1。表1壽胎丸不同劑量對妊娠期孕鼠生殖狀態(tài)影響(略) 3.2壽胎丸不同劑量對胎仔內臟及骨骼發(fā)育狀態(tài)影響 壽胎丸各劑量組、溶劑對照組及陽性對照環(huán)磷酰胺組做徒手切片共檢查611只胎仔內臟,未查出1例內臟畸形或變異。骨骼檢查畸形狀況,其各劑量組與溶劑對照組畸形率比較,無顯著性差異(p>
8、0.05)。陽性對照環(huán)磷酰胺組與溶劑對照組骨骼畸形率差異有非常顯著性(p<0.01)。結果見表2。表2壽胎丸不同劑量對胎仔內臟及骨骼發(fā)育狀態(tài)影響(略) 3.3壽胎丸不同劑量對胎仔體質發(fā)育狀態(tài)影響 壽胎丸各劑量組胎鼠的窩均體重、身長、尾長、胎盤重與溶劑對照組相當,未見顯著性差異(p