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《黑籽重樓種內(nèi)形態(tài)標(biāo)記和issr標(biāo)記的遺傳分化研究的論文》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、黑籽重樓種內(nèi)形態(tài)標(biāo)記和ISSR標(biāo)記的遺傳分化研究的論文作者：陳照，葉睿超，張瑞，李偉陽，王麗【摘要】 該文對黑籽重樓paristhibetica種內(nèi)兩變種——黑籽重樓原變種paristhibeticavar.thibetica與無瓣黑籽重樓paristhibeticavar.apetala在形態(tài)學(xué)及issr分子標(biāo)記上的差異進行了研究和比較。形態(tài)特征分析表明黑籽重樓原變種與無瓣黑籽重樓在萼片長寬、花藥數(shù)、花絲長等7個花器官性狀方面有顯著差異，但通過在主成分分析圖上不能明顯區(qū)分兩個變種，兩變種總體形態(tài)上的分化不明顯
2、。issr分析上，從100個issr引物中篩選出8個引物，在300～1500bp間共擴增出36條帶，其中黑籽重樓原變種特征帶有5條，無瓣黑籽重樓擴特征帶有8條?！娟P(guān)鍵詞】黑籽重樓變種形態(tài)差異issr abstract:themorphologicaldifferentiationanalysisonparisthibeticavar.thibeticaandparisthibeticavar.apetalaorphologicaldifferentiationbeters100issrprimers.and36
3、bandsplifiedbyissr-pcr,oforphologicaldifferentiation;issr 重樓是延齡草科(trilliaceae)重樓屬(parisl.)植物的統(tǒng)稱，是一類極具藥用價值的植物。.《神農(nóng)本草經(jīng)》《本草綱目》《植物名實圖考》及《中國藥典》等都有所記載［1］，常用于治療疔瘡腫毒以及流行性腮腺炎等疾病。由于它還有抗癌止血，祛痰抑制細菌等功效［1］，現(xiàn)在是云南白藥等許多中成藥的主要成分［2］。在李恒系統(tǒng)中，重樓屬植物有24種，由于其形態(tài)變異較大，在種間、種內(nèi)又有交叉重疊，這對于其
4、形態(tài)分類及種質(zhì)資源利用造成一定困難［3］。歷年的《中國藥典》只收載了滇重樓和華重樓2個種，實際上在民間除了少數(shù)稀有種外，幾乎所有重樓屬植物均能入藥［3］?！ 『谧阎貥牵╬aristhibetica）主要分布于西藏南部、云南西北部至西部,四川西半部至峨眉山、甘肅南部、錫金、不丹也有。其下有黑籽重樓原變種(p.thibeticavar.thibetica)與無瓣黑籽重樓(p.thibeticavar.apetala)兩個變種［1］。研究表明黑籽重樓有明顯的鎮(zhèn)靜作用［4］，其富含的偏諾皂苷，是重樓的主要藥效成分［1］。
5、在滇重樓等利用過度的情況下［5］，對黑籽重樓進行種內(nèi)分化和遺傳多樣性等研究，使其充分的了解種質(zhì)資源，顯得迫切并有必要?！ 鹘y(tǒng)的形態(tài)標(biāo)記是遺傳標(biāo)記的基礎(chǔ)［6］，是檢測遺傳多樣性和區(qū)分種屬間差別最直接的方法。但形態(tài)特征的變異除與自身遺傳基礎(chǔ)的變異相關(guān)外，還與其所處的環(huán)境等因素相關(guān)，是對基因的間接反映，并且形態(tài)標(biāo)記的結(jié)果在缺乏嚴(yán)密的生物統(tǒng)計學(xué)分析下，結(jié)論往往不夠完善。隨著分子生物學(xué)的發(fā)展，dna分子標(biāo)記由于具有直接分析遺傳物質(zhì)，與基因表達無關(guān)，信息量大和所需樣品量小等優(yōu)點，目前被普遍認為是評判遺傳結(jié)構(gòu)最好的方法。簡單
6、重復(fù)序列間標(biāo)記(inter-simplesequencerepeat，issr)是一種基于微衛(wèi)星序列發(fā)展起來的分子標(biāo)記［7］,具有簡便、多態(tài)性高,穩(wěn)定性和重復(fù)性好等優(yōu)點，在分類學(xué)、種系發(fā)生學(xué)、保護生物學(xué)和種群遺傳學(xué)等方面得到迅速應(yīng)用［6］?！ ”緦嶒炌ㄟ^形態(tài)差異分析結(jié)合數(shù)量統(tǒng)計方法對不同生境下黑籽重樓原變種和無瓣黑籽重樓的14項形態(tài)特征進行測定和分析，觀察黑籽重樓的種內(nèi)形態(tài)分化的水平，以達到了解其遺傳多樣性水平的目的。并采用issr分子標(biāo)記技術(shù)對同域生長的黑籽重樓種下的黑籽重樓原變種和無瓣黑籽重樓進行分子水平的遺
7、傳分化的研究，尋找區(qū)別兩變種的特征帶?！ ?材料和方法 1.1材料用于形態(tài)分析的黑籽重樓共來自于10個居群，其中黑籽重樓原變種（paristhibeticavar.thibetica）分別來自于不同的7個居群，無瓣黑籽重樓(paristhibeticavar.apetala)分別來自于不同的3個居群（見表1）。表1形態(tài)分析材料（略） 用于issr分析的黑籽重樓原變種（paristhibeticavar.thibetica）和無瓣黑籽重樓(paristhibeticavar.apetala)均采集于四川彭州龍門
8、山（海拔2560m），各變種各取3株，葉片均用硅膠干燥。憑證標(biāo)本藏于四川大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院植物標(biāo)本室?！ ?.2方法 1.2.1形態(tài)指標(biāo)測量及相關(guān)數(shù)據(jù)分析選取10個居群的黑籽重樓的14個形態(tài)學(xué)指標(biāo)進行測定。用spss13.0軟件計算各形態(tài)學(xué)指標(biāo)的平均值（x）、標(biāo)準(zhǔn)差（δ）、單因素方差分析、使用ntsys-pc2.10進行主成分分析［8］?！ ?.2.2基因組dna提取基因
