高效液相色譜法測定小薊中蘆丁含量的論文

高效液相色譜法測定小薊中蘆丁含量的論文

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1、高效液相色譜法測定小薊中蘆丁含量的論文【摘要】目的采用高效液相色譜法對小薊中蘆丁成分進(jìn)行定量。方法采用lichrospherc18色譜柱(4.6mm×200mm,5μm),柱溫30℃,甲醇-0.5%醋酸(體積比為35∶65)為流動相,流速1.0ml/min,檢測波長254nm。結(jié)果小薊中蘆丁的含量為0.5808mg/g。結(jié)論經(jīng)過系統(tǒng)的方法學(xué)考察,該方法具有簡便、專屬、穩(wěn)定、可重復(fù)的特點,可用于小薊中蘆丁的含量測定?!娟P(guān)鍵詞】小薊;蘆?。缓繙y定;高效液相色譜法abstract:objectivehplcethodfordeterminationofrutininherbacrisii

2、.methodslichrospherc18column(4.6mm×200mm,5μm)ethoanol-aceticacid(35∶65)asmobilephase,flol/min,columntemperatureat30℃,detection.resultsthecontentofrutininherbacrisiig/g.conclusionsthemethodisprovedtobesimple,rapid,andaccurate.itcanbeappliedtocontentdeterminationofrutininherbacrisii.keysetosum(b.

3、;rutin;contentdetermination;hplc    小薊為菊科植物小薊[cirsiumsetosum(b.]的干燥地上部分或根,具有涼血止血、祛瘀消腫的功能,可用于治療衄血、吐血、尿血、便血、崩漏、外傷出血、癰腫瘡毒等。.小薊中所含有機(jī)酸中有蘆丁、咖啡酸等,文獻(xiàn)記載蘆丁、咖啡酸為其止血活性成分。本實驗采用高效液相色譜法測定小薊中蘆丁的含量,方法穩(wěn)定、快速、重現(xiàn)性好?! ?實驗材料  1.1儀器lc-10at高效液相色譜儀,spd-10a檢測器,class-lc10色譜工作站;sartoriusbp211d電子天平;shimadzuay220電子天平;kq-500型

4、超聲波清洗器?! ?.2試劑與藥物  甲醇為色譜純,水為重蒸餾水,其它試劑均為分析純。蘆丁購自中國藥品生物制品檢定所(批號0080-9705)。小薊藥材分別購自江蘇(南京醫(yī)藥股份有限公司,批號020313)、安徽(安徽省亳州市永剛飲片有限公司,批號031205)、上海(上海華宇藥業(yè)有限公司,批號040802),經(jīng)本院藥用鑒定教研室陳建偉教授鑒定為小薊正品[cirsiumsetosum(b.]?! ?.3色譜條件及系統(tǒng)適用性試驗  1.3.1色譜條件的選擇  色譜柱:lichrospherc18(4.6mm×200mm,5μm),柱溫30℃,流動相:甲醇-0.5%醋酸(體積比為35∶6

5、5),流速1.0ml/min;檢測波長:254nm。對照品、樣品的高效液相色譜圖見圖1。  1.3.2提取溶劑的考察  取本品2份,各1.0g,精密稱定,置2個50ml具塞錐形瓶中,分別加入50ml甲醇和50ml40%甲醇,稱重,浸置1h,超聲處理(功率500in,補(bǔ)足稱重,濾過;微孔濾膜(0.45μm)濾過,即得。分別吸取上述2份溶液各10μl,注入高效液相色譜儀,按外標(biāo)法以峰面積計算。結(jié)果表明,以體積分?jǐn)?shù)為40%甲醇為提取溶劑效果較好?! ?方法與結(jié)果  2.1溶液制備  2.1.1對照品溶液的制備  精密稱取蘆丁對照品0.98mg,置25ml容量瓶中,加40%甲醇溶解并稀釋至刻

6、度,搖勻,即得。  2.1.2供試品溶液的制備  各取3個產(chǎn)地藥材粉末(過2號篩)1.0g,精密稱定,置具塞錐形瓶中,分別加入50ml40%甲醇,稱重,浸置1h,超聲處理(功率500in,補(bǔ)足稱重,過濾,微孔濾膜(0.45μm)濾過,即得。  2.2線性關(guān)系考察  分別精密吸取對照品溶液1、2、3、4、5ml稀釋10ml,依次精密吸取稀釋的對照品溶液10μl注入液相色譜儀,測定其峰面積值,以蘆丁的濃度(g/l)為橫坐標(biāo),峰面積積分值為縱坐標(biāo),進(jìn)行線性回歸。得回歸方程為:y=25845255x-28716,r=0.9996。結(jié)果表明,蘆丁在0.00392~0.0196g/l范圍內(nèi)具有良

7、好的線性關(guān)系。  2.3精密度試驗  吸取3號對照品溶液10μl,重復(fù)進(jìn)樣5次,測定其峰面積積分值,rsd=1.503%。表明本法精密度較好?! ?.4穩(wěn)定性試驗  分別于0、1、2、4、6、12、24h精密吸取同一份供試品溶液20μl進(jìn)樣,測定其峰面積積分值,計算6h內(nèi)rsd=1.972%。結(jié)果表明,供試品溶液在6h內(nèi)常溫保存基本穩(wěn)定?! ?.5重復(fù)性試驗  取同一批號小薊樣品共5份,每份1.0g,精密稱定,按供試品溶液的制備方法平行制備5份,分別進(jìn)樣1

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