四種藥物對(duì)斑馬魚(yú)急性毒性試驗(yàn)

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1、四種藥物對(duì)斑馬魚(yú)急性毒性試驗(yàn)胡秀彩1，2，邊延峰3，周捷1，呂愛(ài)軍1（1.徐州師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院，江蘇徐州221116；2.江蘇省藥用植物生物技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，江蘇徐州221116；3.天津生機(jī)集團(tuán)股份有限公司，天津300384）摘要：為探究消毒液和農(nóng)藥對(duì)斑馬魚(yú)的毒性與安全評(píng)價(jià)，首次選用高錳酸鉀、甲醛、精碘和卡螨死四種試劑進(jìn)行急性毒性試驗(yàn)，以24~96h半致死濃度（LC50）判斷斑馬魚(yú)對(duì)四種藥物的敏感性。結(jié)果表明，24、48、72、96h的LC50，高錳酸鉀分別為1.15、1.12、1.12、1.11mg/L；甲醛為48、45、45、40mg/

2、L；精碘分別為7.8×10-3、5.8×10-3、5.6×10-3、5.3×10-3mg/L；卡螨死分別為1.95×10-7、1.23×10-7、0.65×10-7、0.62×10-7mg/L。高錳酸鉀、甲醛、精碘和卡螨死的安全質(zhì)量濃度（SC）分別為1.07、11.8、0.96×10-3和1.48×10-6mg/L。參照我國(guó)化學(xué)物質(zhì)對(duì)魚(yú)類(lèi)毒性分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)，判定高錳酸鉀對(duì)斑馬魚(yú)急性毒性為Ⅱ級(jí)，甲醛為Ⅲ級(jí)，精碘和卡螨死對(duì)斑馬魚(yú)急性毒性為Ⅰ級(jí)。關(guān)鍵詞：斑馬魚(yú)；急性毒性；半致死濃度；安全質(zhì)量濃度中圖分類(lèi)號(hào)：Q176文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A文章編號(hào)：1004-2091

3、（2012）01-0043-05斑馬魚(yú)（Brachydaniorerio）作為一種模式生物，除了具有經(jīng)濟(jì)、觀賞價(jià)值外，目前已成為研究脊椎動(dòng)物胚胎發(fā)育及對(duì)外界環(huán)境變化，如紫外線、重金屬鹽類(lèi)、農(nóng)藥、消毒液、工業(yè)污水、放射性物質(zhì)等對(duì)人類(lèi)影響的良好研究材料，是一種極好的實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｊ紧~(yú)[1]。高錳酸鉀是一種外用消毒藥物，通過(guò)強(qiáng)氧化性和吸附作用殺蟲(chóng)，也可以殺死細(xì)菌，常用于殺滅不形成孢囊的原蟲(chóng)、蠕蟲(chóng)、三代蟲(chóng)等，也可用于消毒、防腐、防治細(xì)菌性疾病[2]。甲醛是日益受到重視的環(huán)境污染物之一，在工業(yè)上主要用于制造塑料、樹(shù)脂、橡膠等，在農(nóng)林畜牧業(yè)、生物學(xué)和醫(yī)藥中普遍用作

4、消毒、防腐和熏蒸劑[3]。近年來(lái)，化學(xué)農(nóng)藥的大量施用對(duì)生態(tài)系統(tǒng)造成了嚴(yán)重影響。我國(guó)目前農(nóng)藥年產(chǎn)量達(dá)80萬(wàn)噸，居世界第2位，精碘和卡螨死是常用農(nóng)藥之一[4，5]。這些農(nóng)藥被大量施入土壤中，經(jīng)過(guò)地表和地下徑流會(huì)污染飲用水和地表水源水，導(dǎo)致飲水污染事故的發(fā)生，造成大量的經(jīng)濟(jì)損失，給人們的生產(chǎn)生活帶來(lái)了不便。斑馬魚(yú)的急性毒性試驗(yàn)是一種較好的判斷水毒性的方法，已被應(yīng)用于廢水和化學(xué)藥品的毒性測(cè)試[6]。目前，國(guó)內(nèi)關(guān)于魚(yú)類(lèi)急性毒性的實(shí)驗(yàn)研究，常以鯉、金魚(yú)等作為實(shí)驗(yàn)對(duì)象[1-6]。斑馬魚(yú)急性毒性試驗(yàn)作為檢測(cè)工業(yè)污染及水體污染的重要手段之一，還未廣泛采用[7]。

5、本實(shí)驗(yàn)首次采用高錳酸鉀、甲醛、農(nóng)藥精碘和卡螨死四種試劑對(duì)斑馬魚(yú)進(jìn)行急性毒性試驗(yàn)，以便為水產(chǎn)養(yǎng)殖、魚(yú)病防治等提供一定的科學(xué)參考。材料與方法11.1材料高錳酸鉀（分析純）購(gòu)自徐州試劑總廠；甲醛購(gòu)自徐州試劑二廠；精碘（有效成分5%）購(gòu)自廣西金穗農(nóng)藥有限公司；卡螨死（24.5%阿維柴）購(gòu)自河南欣農(nóng)化工有限公司。實(shí)驗(yàn)室配制高錳酸鉀濃度為1.0g/L，甲醛120mg/L，精碘2.0×10-2mg/L，卡螨死儲(chǔ)備液1.3×10-3mg/L，稀釋至所需濃度，現(xiàn)用現(xiàn)配。斑馬魚(yú)購(gòu)于徐州市某花鳥(niǎo)市場(chǎng)，斑馬魚(yú)平均體長(zhǎng)2～3cm，平均體重0.15g，試驗(yàn)前在室內(nèi)馴養(yǎng)5d

6、以上，自然死亡率小于0.5%，試驗(yàn)前1d停止喂食，試驗(yàn)期間也不喂食。1.2方法參照呂愛(ài)軍等[7]實(shí)驗(yàn)方法進(jìn)行。試驗(yàn)開(kāi)始時(shí)連續(xù)觀察8h，觀察記錄魚(yú)的中毒情況（平衡、游動(dòng)、呼吸、體色變化）以及24～96h的死亡情況及開(kāi)始死亡時(shí)間及死亡數(shù)目。當(dāng)魚(yú)死亡時(shí)，立刻取出，觀察并記錄其體表特征和內(nèi)臟表面特征。實(shí)驗(yàn)時(shí)間為96h，96h后若仍有存活魚(yú)，繼續(xù)實(shí)驗(yàn)至7d。資助項(xiàng)目：國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(30800847)；江蘇省高?！扒嗨{(lán)工程”項(xiàng)目（2008）作者簡(jiǎn)介：胡秀彩（1976-），女，實(shí)驗(yàn)師，從事資源微生物學(xué)研究.E-mail:huxiucai126.c

7、om通訊作者：呂愛(ài)軍，副教授.E-mail:lajand@126.com實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)分析采用Bliss法計(jì)算斑馬魚(yú)的半致死濃度LC50，安全質(zhì)量濃度用公式：SC=48hLC50×0.3（/24hLC50/48hLC50）2。無(wú)明顯體色變化?？缹?duì)斑馬魚(yú)急性毒性試驗(yàn)結(jié)果表明：卡螨死濃度為2.1×10-8mg/L時(shí)，就出現(xiàn)斑馬魚(yú)死亡；卡螨死濃度為3.2×10-7mg/L，1h內(nèi)部分魚(yú)出現(xiàn)S型扭曲游動(dòng)，6h內(nèi)魚(yú)出現(xiàn)側(cè)翻游動(dòng)，高濃度組（6.4×10-7mg/L和8×10-7mg/L）出現(xiàn)魚(yú)的死亡，6～12h是實(shí)驗(yàn)魚(yú)集中死亡時(shí)段?？罎舛葹?.3×10-

8、8mg/L時(shí)，沒(méi)有出現(xiàn)斑馬魚(yú)死亡?？乐卸粳F(xiàn)象出現(xiàn)非?？?，表現(xiàn)為呼吸急促，并上下反復(fù)竄游，后表現(xiàn)為呼吸異常，如鰓外翻，嘴大張，身體急劇扭曲成S型，并