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1、中藥天年飲對脾衰老的延緩作用研究論文陳志宏程麗梅張宏凱謝利德高福祿【摘要】目的觀察脾的衰老變化及中藥天年飲延緩免疫器官衰老的作用。方法D半乳糖連續(xù)腹腔注射建立亞急性衰老的大鼠模型;待模型成功建立后,用藥組大鼠給予天年飲灌胃。分別檢測各組大鼠血脂和脾臟指數(shù)的變化,觀察脾增殖細(xì)胞核抗原(PA)、p53和p16表達(dá)的變化。結(jié)果與正常組大鼠比較,模型組大鼠的血脂和脾p53、p16的表達(dá)明顯升高,模型組的脾臟指數(shù)和脾PA的表達(dá)明顯下降(P<0.05,P<0.01)。中藥天年飲可明顯改善模型大鼠脾的各種變化:與模型組大鼠比較,天年飲用
2、藥組大鼠血脂和脾p53、p16的表達(dá)明顯下降,而脾臟指數(shù)和脾PA的表達(dá)明顯升高(P<0.05.freelmuneorgans.Methods30SDratslydividedinto3groupsandeachgrouphad10rats:normal,agingmodelandTiannianyingroups.ThesubacutelyagingmodelratsadebyinjectingDgalintoabdominalcavitycontinually.AftertheagingmodelinistratedT
3、iannianyinbyintragastricadministration.Thebloodlipidandthespleenindexofratsineachgroupeasured,andtheexpressionsofPA,p53andp16ofspleenalrats,thespleenindexandtheexpressionofPAinspleenofagingmodelratsdecreasedobviously;odelratsincreasedobviously(P<0.05,P<0.01).Tianni
4、anyincouldimprovethesenescentchangesinspleenofagingratssignificantly:paredodelrats,thespleenindexandtheexpressionofPAinspleenincreasedremarkablyandthebloodlipid,theexpressionsofp53andp16inspleendecreasedinTiannianyingroupremarkably(P<0.05,P<0.01).ConclusionsTiannia
5、nyincanimprovetheimmunefunctionofagedbypreventingatropyofspleenandfacilitatingthereproductiveactivityoflymphocytes,thushasbetterantiagingeffects.【Keyg/kg給藥,每天1次,連續(xù)40d)制作亞急性衰老的動(dòng)物模型;模型組大鼠造模成功后不再做任何處理,用藥組大鼠造模成功后每天用天年飲灌胃,共30d。1.2藥品與試劑天年飲由灸何首烏、懷牛膝、肉從蓉、淫羊藿、丹參、茯苓六味中藥組成,煎
6、制后每ml含生藥1.5g,按16.2g/kg灌胃給藥。檢測血清中總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)和高密度脂蛋白(HDLC)含量的試劑盒購自北京中法生物公司;增殖細(xì)胞核抗原(proliferatingcellneuclearantigen,.freel),貼于涂有APES的載玻片上。1.5.1HE染色蘇木精伊紅染色觀察脾的組織結(jié)構(gòu)。1.5.2免疫組化染色及定量分析采用SABC免疫組化染色觀察大鼠脾PA、p53、p16的表達(dá)情況(PA一抗為小鼠抗體,p53、p16一抗均為兔抗體,一抗稀釋比例均為1∶100),以細(xì)胞核出現(xiàn)棕
7、黃色為陽性反應(yīng),以PBS代替一抗作為陰性對照。每只大鼠于顯微鏡下(10×20)任選5張切片,每張切片選取3個(gè)陽性細(xì)胞分布均勻的視野,采用MiVnt圖像分析系統(tǒng),計(jì)算陽性細(xì)胞面積占視野面積的比值,取平均值作為這只大鼠的陽性率。1.6統(tǒng)計(jì)學(xué)處理采用SPSS11.0統(tǒng)計(jì)軟件,以方差分析進(jìn)行統(tǒng)計(jì)處理,組間比較采用q檢驗(yàn)。2結(jié)果2.1大鼠血脂的變化與正常組大鼠比較,模型組大鼠血清TC、TG含量明顯升高,HDLC含量明顯下降(P<0.05,P<0.01);中藥天年飲可明顯降低衰老大鼠血清TC和TG含量,提高HDLC含量,用藥組與模型
8、組比較差異顯著(P<0.05,P<0.01)(見表1)。表1大鼠血脂及脾臟指數(shù)與正常組比較:1)P<0.01,2)P<0.05;與模型組比較:3)P<0.01,4)P<0.052.2大鼠脾臟指數(shù)的變化與正常組比較,模型組大鼠脾臟指數(shù)顯著下降(P<0.05);中藥天年飲可明顯提高衰老大鼠的脾