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1、子宮內(nèi)膜癌PTEN蛋白表達(dá)及其臨床意義【摘要】目的:探討抑癌基因第10染色體同源丟失性磷酸酶―張力蛋白基因(PTEN)蛋白表達(dá)與子宮內(nèi)膜癌的發(fā)生、發(fā)展的關(guān)系。方法:采用免疫組織化學(xué)ＳＰ法檢測PTEN蛋白在56例子宮內(nèi)膜癌及30例正常子宮內(nèi)膜組織的表達(dá)。結(jié)果:56例子宮內(nèi)膜癌中PTEN蛋白表達(dá)缺失率為571%,明顯高于正常子宮內(nèi)膜中的完全表達(dá)(P<005)。PTEN蛋白在低分化組的表達(dá)缺失率明顯高于中高分化組(P<005)。結(jié)論:抑癌基因PTEN蛋白表達(dá)缺失在子宮內(nèi)膜癌的發(fā)生、發(fā)展、浸潤等過程中有一定作用。
2、【關(guān)鍵詞】PTEN基因;子宮內(nèi)膜癌;免疫組化【ABSTRACT】Objecctive:ToinvestigatetheexpressionofPTENproteininendometrialcarcinomaanditsrelationshipwithclinicalfeature.Methods:TotesttheexpressionsofPTENproteinof56caseswithendometrialcarcinomaand30nomalwomenbyimmunohistochemistry.Results
3、:ThepositiveexpressionratesofPTENwere429%inendometrialcarcinomaand100%innormaledometriun(P<005).Conclusion:PTENgeneparticipatesintheoriginationanddevelopmentofendometrialcarcinoma.【KEYWORDS】Endometrialcarcinoma;PTEN;5Immunohistochemistry第10染色體同源丟失性磷酸酶―張力蛋白基因
4、(PTEN)是1997年發(fā)現(xiàn)的一種腫瘤抑制基因,在許多腫瘤中出現(xiàn)表達(dá)缺失或突變。為研究PTEN與子宮內(nèi)膜癌發(fā)病之間的關(guān)系,我們采用免疫組化ＳＰ法檢測子宮內(nèi)膜癌組織中PTEN蛋白的表達(dá)及其與臨床病理特征的關(guān)系,探討其與子宮內(nèi)膜癌發(fā)生、發(fā)展、治療及預(yù)后的相關(guān)性。1資料與方法11一般資料河北北方學(xué)院附屬第一醫(yī)院20038~20055月收治的資料完整的子宮內(nèi)膜癌患者56例及正常子宮內(nèi)膜30例和非典型增生子宮內(nèi)膜32例。年齡39~70歲，平均50歲。按照子宮內(nèi)膜癌的手術(shù)病理學(xué)分期（FIGO,1998）其中Ⅰ期30例，Ⅱ期16例
5、，Ⅲ期10例。病理分級中G128例；G220例；G38例。肌層浸潤≤1/2者43例，淋巴轉(zhuǎn)移19例?；颊咝g(shù)前均未行放療、化療和激素治療。12方法采用免疫組化鏈霉素抗生素蛋白―過氧化物酶（SP）法檢測PTEN蛋白的表達(dá)，PTEN基因多克隆抗體和ＳＰ試劑盒均購于福州邁新生物技術(shù)公司,操作按ＳＰ試劑盒要求進(jìn)行,步驟如下:所有組織蠟塊5μｍ連續(xù)切片,65℃5烘烤、脫蠟,3%過氧化氫滅活內(nèi)源性過氧化物酶15min,高壓加熱修復(fù)抗原,10%的正常血清封閉，依次滴加一抗(PTEN羊多抗)、二抗、鏈霉菌抗生物素蛋白過氧化酶液,ＤＡＢ
6、顯色10min,蘇木素復(fù)染,脫水,透明。中性樹膠封片,顯微鏡下觀察:陽性對照為已知陽性的子宮內(nèi)膜癌，用PBS液取代一抗做陰性對照。13結(jié)果判定PTEN蛋白定位于細(xì)胞胞漿,呈棕黃色顆粒,細(xì)胞核和細(xì)胞膜均不著色。在高倍鏡下計(jì)數(shù)1000個(gè)細(xì)胞,計(jì)算陽性細(xì)胞所占的百分比(<15%為-,15%～50%為+,>50%為++)。14統(tǒng)計(jì)學(xué)處理采用SPSS100軟件包進(jìn)行χ2檢驗(yàn)及Fishers精確檢驗(yàn)(P<005為有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義)。2結(jié)果21PTEN在子宮內(nèi)膜癌中的表達(dá)PTEN在正常子宮內(nèi)膜中表達(dá)無缺失,子宮內(nèi)膜癌
7、中表達(dá)缺失為571%,見表1。22PTEN在子宮內(nèi)膜癌中的表達(dá)及臨床病理特征PTEN在子宮內(nèi)膜癌中的表達(dá)缺失與臨床分期和病理分級有關(guān)，Ⅰ/Ⅱ期的表達(dá)缺失率明顯高于PTENⅢ期(P<005);與肌層浸潤、淋巴轉(zhuǎn)移無關(guān)（P>005），見表2表1PTEN在子宮內(nèi)膜癌中的表達(dá)表2PTEN在子宮內(nèi)膜癌中的表達(dá)及臨床病理特征（略）3討論531PTEN基因的結(jié)構(gòu)及功能PTEN蛋白定位于胞漿,由403個(gè)氨基酸組成,分子量為47122Ｕ,主要結(jié)構(gòu)功能區(qū)位于Ｎ端,含有一個(gè)蛋白酪氨酸磷酸酶催化區(qū),與一個(gè)較長的張力蛋白和輔助蛋白
8、的同源區(qū)。目前認(rèn)為,該基因是一抑癌基因,其作用主要表現(xiàn)在以下幾個(gè)方面:調(diào)控細(xì)胞周期,誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,調(diào)節(jié)細(xì)胞遷移、浸潤、整合素介導(dǎo)的細(xì)胞鋪展及局部粘附的形成等。PTEN的功能異常主要通過基因突變、基因同源性丟失、啟動子甲基化、表達(dá)缺失等方式發(fā)生。其基因變化中,以突變最為常見,主要為體細(xì)胞突變。另外,ｍＲＮＡ以及蛋白表達(dá)的異常也是失活的重要方式。3
