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《牛初乳中乳鐵蛋白的分離純化與免疫功能檢測》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關內(nèi)容在學術論文-天天文庫。
1、維普資訊http://www.cqvip.com2082005,Vo1．26,No．7※營養(yǎng)衛(wèi)生牛初乳中乳鐵蛋白的分離純化與免疫功能檢測葉震敏1，王志耕一，余為一2(1．蘇州大學醫(yī)學院，江蘇蘇州215007；2．安徽農(nóng)業(yè)大學動物科技學院，安徽合肥230061)摘要：牛初乳經(jīng)離心、鹽析后獲得乳鐵蛋白粗提物，通過CM—SephadexC50離子交換色譜和Heparin．SepharoseCL一6B親和色譜純化獲得純度分別為76．98％和92．75％的乳鐵蛋白，經(jīng)SDS．PAGE檢測乳鐵蛋白存在分子質(zhì)量分別為76000Da和78000Da的兩種異構體，免疫電泳說明提純樣品與乳鐵蛋白標準品
2、具有相同的免疫原性。小白鼠喂養(yǎng)和免疫實驗說明乳鐵蛋白可提高機體免疫功能。關鍵詞：初乳：乳鐵蛋白；分離提純；免疫功能IsolationandPurificationofLactoferrininBovineColostrumsandDelectionofItsIm／iluneFunctionYEZhen—min，WANGZhi—geng一，YUWei—yi(1．CollegeofMedicine，SooChowUniversity，Suzhou215007，China；2．ColegeofAnimalScience，AnhuiAgriculturalUniversity，Hefei2
3、30061，China)Abstract：Thelactoferrinwaspurifiedbycenlrifugationandam．momumsulfatepreeipitationfromthebovinecolosmnns．ThepurityoflactoferrinafterCM—SephadexC50ion—exchangechromatographandHeparin—SepharoseCL-6Baffmitychromato-graphWas76．98％and92．75％respectively．Thetwokindsoflactoferrinisomerswere
4、assayedbySDS—PAGEandHPLCwiththemolecularweights76000Daand78000Darespectively．Thepurifiedsampleandstand~dlactoferrinshowedthesameimmunogensthrough．Theisolatedlactoferrinimprovedtheimmunefunctionsignificantlyinmiceexperiments．Keywords：colostrums；lactoferrin；isolationandpurification：immunefunctio
5、n中圖分類號：$852．4文獻標識碼：A文章編號：1002．6630(2005)07．0208．04乳鐵蛋I~l(Lf，lactoferrin)是一種主要存在于大多數(shù)初乳取自合肥奶牛場：CM．SephadeXC50樹脂、哺乳動物乳汁中的鐵結合性糖蛋白，它在增強機體免疫Heparin．SepharoseCL．6B樹脂購自Pharmacia公司；能力，調(diào)節(jié)機體生理狀態(tài)平衡，改善胃腸功能，抗菌、AKTA．FPLCunicom3．21、monosHR5／5高效液相色譜系抗病毒等方面起著重要作用?。乳鐵蛋白己被廣泛應用統(tǒng)購自Pharmacia公司；中分子量標準蛋白來自上海生于食品、醫(yī)藥、飼料
6、、生化以及化妝品領域。作為化所；乳鐵蛋白標準品購自Sigma公司；弗氏佐劑自行純天然功能因子，其開發(fā)利用已引起人們的高度關注制備；實驗動物來源于安徽醫(yī)科大學實驗動物中心。【：】。本文建立了實驗室分離提純具有生物學活性的較高l_2方法純度乳鐵蛋白的技術路線和方法，并對其提高機體體液1．2．1粗提免疫的活性進行了驗證性研究，以期為高純度乳鐵蛋白取中國荷斯坦奶牛產(chǎn)犢后24h內(nèi)的牛初乳，4℃下工業(yè)化生產(chǎn)提供技術參考。4000g離心30min脫乳脂，調(diào)pH。至4．6，25℃下4000g離心30min去除酪蛋白后，用1材料與方法42％飽和(NH4)zSO,鹽析后2000g離心20rain。1．
7、1材料取乳清即為乳鐵蛋白粗提物。收稿日期：2004．10．27$通訊作者基金項目：安徽省“十五”農(nóng)產(chǎn)品加工重大專項(01703004)作者簡介：葉震敏(1977．)，博士生，主要從事腫瘤免疫研究。維普資訊http://www.cqvip.com※營養(yǎng)衛(wèi)生2005,VoL26,No．72091．2-2離子交換色譜將透析的乳清樣品加入平衡過的2×33cmCM．SephadexC50離子交換柱。分別用pH8．0含0、0．3、0．5、0．7mo1／LNaCl的0．05mol／
