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《牛初乳中乳鐵蛋白的分離純化與免疫功能檢測(cè)》由會(huì)員上傳分享,免費(fèi)在線閱讀,更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫(kù)。
1、維普資訊http://www.cqvip.com2082005,Vo1.26,No.7※營(yíng)養(yǎng)衛(wèi)生牛初乳中乳鐵蛋白的分離純化與免疫功能檢測(cè)葉震敏1,王志耕一,余為一2(1.蘇州大學(xué)醫(yī)學(xué)院,江蘇蘇州215007;2.安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院,安徽合肥230061)摘要:牛初乳經(jīng)離心、鹽析后獲得乳鐵蛋白粗提物,通過(guò)CM—SephadexC50離子交換色譜和Heparin.SepharoseCL一6B親和色譜純化獲得純度分別為76.98%和92.75%的乳鐵蛋白,經(jīng)SDS.PAGE檢測(cè)乳鐵蛋白存在分子質(zhì)量分別為76000Da和78000Da的兩種異構(gòu)體,免疫電泳說(shuō)明提純樣品與乳鐵蛋白標(biāo)準(zhǔn)品
2、具有相同的免疫原性。小白鼠喂養(yǎng)和免疫實(shí)驗(yàn)說(shuō)明乳鐵蛋白可提高機(jī)體免疫功能。關(guān)鍵詞:初乳:乳鐵蛋白;分離提純;免疫功能IsolationandPurificationofLactoferrininBovineColostrumsandDelectionofItsIm/iluneFunctionYEZhen—min,WANGZhi—geng一,YUWei—yi(1.CollegeofMedicine,SooChowUniversity,Suzhou215007,China;2.ColegeofAnimalScience,AnhuiAgriculturalUniversity,Hefei2
3、30061,China)Abstract:Thelactoferrinwaspurifiedbycenlrifugationandam.momumsulfatepreeipitationfromthebovinecolosmnns.ThepurityoflactoferrinafterCM—SephadexC50ion—exchangechromatographandHeparin—SepharoseCL-6Baffmitychromato-graphWas76.98%and92.75%respectively.Thetwokindsoflactoferrinisomerswere
4、assayedbySDS—PAGEandHPLCwiththemolecularweights76000Daand78000Darespectively.Thepurifiedsampleandstand~dlactoferrinshowedthesameimmunogensthrough.Theisolatedlactoferrinimprovedtheimmunefunctionsignificantlyinmiceexperiments.Keywords:colostrums;lactoferrin;isolationandpurification:immunefunctio
5、n中圖分類號(hào):$852.4文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A文章編號(hào):1002.6630(2005)07.0208.04乳鐵蛋I~l(Lf,lactoferrin)是一種主要存在于大多數(shù)初乳取自合肥奶牛場(chǎng):CM.SephadeXC50樹(shù)脂、哺乳動(dòng)物乳汁中的鐵結(jié)合性糖蛋白,它在增強(qiáng)機(jī)體免疫Heparin.SepharoseCL.6B樹(shù)脂購(gòu)自Pharmacia公司;能力,調(diào)節(jié)機(jī)體生理狀態(tài)平衡,改善胃腸功能,抗菌、AKTA.FPLCunicom3.21、monosHR5/5高效液相色譜系抗病毒等方面起著重要作用?。乳鐵蛋白己被廣泛應(yīng)用統(tǒng)購(gòu)自Pharmacia公司;中分子量標(biāo)準(zhǔn)蛋白來(lái)自上海生于食品、醫(yī)藥、飼料
6、、生化以及化妝品領(lǐng)域。作為化所;乳鐵蛋白標(biāo)準(zhǔn)品購(gòu)自Sigma公司;弗氏佐劑自行純天然功能因子,其開(kāi)發(fā)利用已引起人們的高度關(guān)注制備;實(shí)驗(yàn)動(dòng)物來(lái)源于安徽醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心。【:】。本文建立了實(shí)驗(yàn)室分離提純具有生物學(xué)活性的較高l_2方法純度乳鐵蛋白的技術(shù)路線和方法,并對(duì)其提高機(jī)體體液1.2.1粗提免疫的活性進(jìn)行了驗(yàn)證性研究,以期為高純度乳鐵蛋白取中國(guó)荷斯坦奶牛產(chǎn)犢后24h內(nèi)的牛初乳,4℃下工業(yè)化生產(chǎn)提供技術(shù)參考。4000g離心30min脫乳脂,調(diào)pH。至4.6,25℃下4000g離心30min去除酪蛋白后,用1材料與方法42%飽和(NH4)zSO,鹽析后2000g離心20rain。1.
7、1材料取乳清即為乳鐵蛋白粗提物。收稿日期:2004.10.27$通訊作者基金項(xiàng)目:安徽省“十五”農(nóng)產(chǎn)品加工重大專項(xiàng)(01703004)作者簡(jiǎn)介:葉震敏(1977.),博士生,主要從事腫瘤免疫研究。維普資訊http://www.cqvip.com※營(yíng)養(yǎng)衛(wèi)生2005,VoL26,No.72091.2-2離子交換色譜將透析的乳清樣品加入平衡過(guò)的2×33cmCM.SephadexC50離子交換柱。分別用pH8.0含0、0.3、0.5、0.7mo1/LNaCl的0.05mol/