生理實(shí)驗(yàn)報(bào)告蟾蜍骨骼肌生理

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1、人體解剖及動(dòng)物生理學(xué)實(shí)驗(yàn)報(bào)告實(shí)驗(yàn)　名　稱蟾蜍骨骼肌生理姓名學(xué)號(hào)系別組別同組姓名實(shí)驗(yàn)室溫度實(shí)驗(yàn)日期2015年5月7日一、實(shí)驗(yàn)題目蟾蜍骨骼肌生理A蟾蜍腓腸肌刺激強(qiáng)度與骨骼肌收縮反應(yīng)的關(guān)系B蟾蜍骨骼肌單個(gè)肌肉收縮分析（潛伏期、收縮期和舒張期的確定）C蟾蜍腓腸肌刺激頻度與骨骼肌收縮的關(guān)系二、實(shí)驗(yàn)?zāi)康拇_定蟾蜍骨骼肌收縮的（1）閾水平和最大收縮以及刺激強(qiáng)度與肌肉收縮之間的關(guān)系曲線（2）收縮的三個(gè)時(shí)期：潛伏期、縮短期、舒張期（3）刺激頻度與肌肉收縮的關(guān)系三、實(shí)驗(yàn)方法1、蟾蜍坐骨神經(jīng)-骨骼肌標(biāo)本的制作及電路連接1)雙毀髓處死蟾蜍后，剝?nèi)テつw，暴露腰骶叢神經(jīng)，游離大腿肌肉之間的

2、做個(gè)神經(jīng)及小腿的腓腸肌，注意不要將脛神經(jīng)與腓神經(jīng)分離。神經(jīng)端結(jié)扎后，剪去無(wú)關(guān)分支后游離至膝關(guān)節(jié)處；肌肉端結(jié)扎在肌腱上，將腓神經(jīng)也一起結(jié)扎，結(jié)扎線留長(zhǎng)。保留膝關(guān)節(jié)，剪去腿骨，將標(biāo)本離體。注意保持神經(jīng)肌肉濕潤(rùn)。2)用大頭釘將標(biāo)本的膝關(guān)節(jié)固定于標(biāo)本盒R2和R3兩記錄電極之間的石蠟凹槽內(nèi)，保證神經(jīng)、肌肉與電極充分接觸。神經(jīng)中樞端接觸刺激電極S1和S2，肌肉接觸記錄電極R3和R4，之間接觸接地電極。1)肌肉的結(jié)扎線從標(biāo)本盒中穿出，連接張力換能器。注意連線盡量短，以減小阻力。在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，注意標(biāo)本的休息：將神經(jīng)搭在肌肉上，用浸濕了任氏液的棉花覆蓋神經(jīng)肌肉，保持濕潤(rùn)。但標(biāo)本

3、盒內(nèi)避免有過(guò)多的液體，防止短路。2)換能器插頭接RM6240通道1。刺激輸出線兩夾子分別連接標(biāo)本盒的刺激電極S1和S2，插頭接刺激輸出插口。如果需要記錄肌肉的動(dòng)作電位，則在肌肉所搭置的記錄電極上連接輸入導(dǎo)線，注意接地，插頭接通道2。2、蟾蜍骨骼肌生理各項(xiàng)數(shù)據(jù)測(cè)定A蟾蜍腓腸肌刺激強(qiáng)度和骨骼肌收縮反應(yīng)的關(guān)系1)打開信號(hào)采集軟件，從“實(shí)驗(yàn)”菜單中選取“刺激強(qiáng)度對(duì)骨骼肌收縮的影響”，出現(xiàn)軟件自動(dòng)設(shè)置界面，各項(xiàng)參數(shù)已設(shè)置好，但需要將“采集頻率”修改成“20kHz”，掃描速度仍然是“1.0s/div”。界面的采集通道默認(rèn)為RM6240B面板上的通道1.刺激模式自動(dòng)設(shè)置為強(qiáng)

4、度遞增刺激，起始強(qiáng)度為0.02V（可根據(jù)標(biāo)本特性靈活選擇）2)檢查裝置連接正確后，點(diǎn)擊“開始記錄”，屏幕下出現(xiàn)掃描線，軟件處于記錄狀態(tài)。（主義不要點(diǎn)擊“開始示波”，在示波狀態(tài)下，文件不能保存。）掃描線如偏離零點(diǎn)較遠(yuǎn)，需要調(diào)零：將換能器與標(biāo)本盒的棉線放松，旋轉(zhuǎn)換能器的調(diào)零鈕，使基線恢復(fù)零點(diǎn)。3)將換能器連接的棉線拉直，如果基線偏移零位（肌肉被牽拉的程度會(huì)影響基線位置），不必去管（不必重新調(diào)零，測(cè)量時(shí)，將偏移量減去即可）。點(diǎn)擊“開始刺激”，刺激器按一定時(shí)間間隔自動(dòng)輸出單個(gè)刺激方波，后一次比前一次強(qiáng)度遞增。將“刺激標(biāo)注”激活，顯示出每次發(fā)放的刺激的強(qiáng)度。屏幕上應(yīng)出現(xiàn)

5、一系列由刺激觸發(fā)的肌肉收縮曲線，同時(shí)可以觀察到標(biāo)本盒中肌肉的收縮。注意文件的保存（不要移動(dòng)標(biāo)本盒與換能器的位置，即肌肉被牽拉的程度保持固定。此要求也適用于ⅡB和ⅡC。）4)當(dāng)收縮幅度不再變化時(shí)，停止刺激，停止記錄。5)應(yīng)用測(cè)量工具，確定收縮的閾水平和最大收縮。并確定最大收縮所對(duì)應(yīng)的最小刺激強(qiáng)度（即最適刺激強(qiáng)度）。記錄下收縮幅度，刺激和放大器的參數(shù)設(shè)置。（注意在測(cè)量時(shí)。需將波形適當(dāng)展開，確保測(cè)量數(shù)據(jù)更準(zhǔn)確。）1)繪制刺激強(qiáng)度與肌肉收縮幅度之間的關(guān)系曲線。B單個(gè)肌肉收縮分析（確定潛伏期、縮短期、舒張期）1)將ⅡA實(shí)驗(yàn)得到的最大刺激強(qiáng)度對(duì)應(yīng)的收縮曲線展開，應(yīng)用測(cè)量工

6、具確定收縮的三個(gè)時(shí)期：潛伏期、縮短期、舒張期。2)至少測(cè)量三次。計(jì)算幾次重復(fù)測(cè)量得到的三個(gè)時(shí)期的平均值和標(biāo)準(zhǔn)差。C蟾蜍腓腸肌刺激頻度與骨骼肌收縮的關(guān)系1)打開信號(hào)采集軟件，關(guān)閉通道3和4，保留通道1和2，分別對(duì)應(yīng)肌肉收縮信號(hào)和肌肉動(dòng)作電位信號(hào)。示波狀態(tài)下修改參數(shù)設(shè)置：采集頻率20kHz；通道1：通道模式為張力，掃描速度400ms/div，靈敏度7.5g（可根據(jù)收縮幅度合理選擇），放大器時(shí)間常數(shù)設(shè)為直流，濾波頻率100Hz；通道2：通道模式為生物電，掃描速度400ms/div，靈活度2mv，放大器時(shí)間常數(shù)0.001s，濾波頻率1kHz。刺激模式為串單單刺激，波寬

7、1ms，延時(shí)20ms，選擇一定的刺激脈沖個(gè)數(shù)（10-60個(gè)，避免讓肌肉受到過(guò)多刺激）和刺激強(qiáng)度（閾上刺激強(qiáng)度即可，不必達(dá)到最大刺激強(qiáng)度，避免收縮幅度過(guò)大，超出換能器量程）。2)點(diǎn)擊“開始記錄”，軟件進(jìn)入記錄狀態(tài)。3)記錄過(guò)程中逐漸提高刺激頻率，在一定的刺激頻率下，點(diǎn)擊“開始刺激”，刺激器按此頻率連續(xù)發(fā)放設(shè)定的刺激脈沖個(gè)數(shù)，肌肉出現(xiàn)相應(yīng)的收縮。4)觀察肌肉收縮的總和現(xiàn)象，確定肌肉收縮的最小融合頻率，觀察肌肉動(dòng)作電位與收縮的關(guān)系。5)觀察不同頻率引起肌肉收縮的幅度變化。四、實(shí)驗(yàn)結(jié)果A蟾蜍腓腸肌刺激強(qiáng)度和骨骼肌收縮反應(yīng)的關(guān)系圖1.蟾蜍腓腸肌刺激強(qiáng)度和骨骼肌收縮反應(yīng)的

8、關(guān)系圖表1蟾蜍腓腸肌刺激強(qiáng)度與骨骼肌收