大烏泡葉中總黃酮含量測定

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1、大烏泡葉中總黃酮含量測定：程偉,秦文杰,陳素紅,葉祖光【摘要】目的為大烏泡資源的合理開發(fā)和利用提供試驗依據(jù)。方法采用60%甲醇提取大烏泡葉總黃酮,分光光度法測定其含量；并通過穩(wěn)定性、重復性、精密度和回收率試驗檢驗了該方法的可靠性和重復性。結(jié)果標準液和供試液均在510nm處有最大吸收。重復性、精密度、加樣回收率試驗的RSD值分別為2.11%、0.97%、2.34%,含量測定結(jié)果表明大烏泡葉中總黃酮含量為3.8%。結(jié)論以60%甲醇提取、硝酸鋁顯色、510nm測定的分光光度法適用于大烏泡葉中總黃酮含量的測定。【關(guān)鍵詞】大烏泡；總黃酮；含

2、量測定；分光光度法Abstract：ObjectiveTosupplyscientificbasisforthereasonabledevelopmentandutilizationofRubusmultibracteatusLevl.etVant.resources.MethodThetotalflavonoidsRubusmultibracteatusLevl.etVant.ethanolanditscontentinedbyspectrophotometry.Thereliabilityandrepeatabilityoft

3、hemethodents.ResultBothstandardandtestedsolutionshadthemaximumabsorbanceat510nm.TheRSDvaluesofrepeatability,accuracyandrecoveryexperimentsinationshoultibracteatusLevl.etVant.ethanol,colorediniumnitrateanddeterminedbyspectrophotometryat510nminationoftotalflavonoidsinRu

4、busmultibracteatusLevl.etVant..KeyultibracteatusLevl.etVant.；totalflavonoids；contentdetermination；spectrophotometry大烏泡為薔薇科懸鉤子屬植物大烏泡(RubusmultibracteatusLevl.etVant.),又名倒生根、黃水泡、無刺烏泡、糖泡葉、馬莓葉,以根及全株入藥。全國大部分地區(qū)均有分布,主產(chǎn)于四川、云南、貴州等地。其味苦、性涼,入脾、肝二經(jīng),具清熱解毒、祛風除濕、涼血、止血、接骨的功效。大烏泡為苗藥的常

5、用藥,但目前尚未見對大烏泡化學成分研究的報道,我們通過對大烏泡葉的化學成分的系統(tǒng)研究,發(fā)現(xiàn)其中含有許多黃酮類成分(另文報道),現(xiàn)就大烏泡葉中總黃酮的含量測定方法報道如下?！　?儀器與試藥UV-757CRT紫外分光光度計(上海UNICO),AB135-S電子分析天平(瑞士梅特勒-托利多公司),CQ-250超聲波清洗器(上海超聲儀器廠),電熱恒溫水浴鍋(北京市永光明醫(yī)療儀器廠),索氏提取器。蘆丁對照品(中國藥品生物制品檢定所提供,批號10080-200306)。本研究所用大烏泡葉于2007年7月采集于貴州省黔西南州普安縣,經(jīng)秦文杰副研

6、究員鑒定為薔薇科懸鉤子屬大烏泡(RubusmultibracteatusLevl.etVant.),標本存放于中藥復方新藥開發(fā)國家工程研究中心。甲醇為分析純,5%亞硝酸鈉、10%硝酸鋁、4%氫氧化鈉等均采用分析純自配。　　2方法與結(jié)果　　2.1供試品溶液的制備干燥大烏泡葉粉末約2.0g,精密稱定,置索氏提取器中,加入60%甲醇100mL,于恒溫水浴鍋上90℃提取6h,過濾,減壓濃縮并定容至50mL容量瓶中,得供試品溶液。　　2.2蘆丁對照品溶液的制備精密稱取干燥至恒重的蘆丁對照品4.75mg,用少量60%甲醇溶解,置50mL容量瓶

7、中,用60%甲醇定容至50mL,搖勻,靜置,配成濃度為95μg/mL的蘆丁對照品貯備液?！　?.3測定波長的選擇以蘆丁為對照品測定大烏泡葉中總黃酮的含量。精密吸取對照品液、供試品液各適量分別加入到25mL容量瓶中,按“2.4”項下方法操作,并在400～600nm范圍內(nèi)掃描,結(jié)果均在510nm處有最大吸收波長,其他成分對測定無干擾,故選擇510nm為測定波長?！　?.4標準曲線的繪制精密吸取濃度為95μg/mL的蘆丁對照品溶液0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0mL,分別置于25mL量瓶中,分別加入5%亞硝酸鈉溶液1.

8、0mL,搖勻,放置6min后各加入10%硝酸鋁溶液1.0mL,搖勻后放置6min,分別加入4%氫氧化鈉溶液10mL,用60%甲醇稀釋至刻度,搖勻,放置10min,在510nm處測定吸光度?；貧w方程為：Y＝0.0012X＋0.001,r＝0.9996