油橄欖葉中總黃酮含量測(cè)定方法探討

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1、第31卷,第2期光譜學(xué)與光譜分析Vol.31,No.2,pp547-5502011年2月SpectroscopyandSpectralAnalysisFebruary,2011油橄欖葉中總黃酮含量測(cè)定方法探討鄭媛媛1,2,李辰2,3,封士蘭1,黃新異2,劉永峰2,4,陳小芬2,4,邸多?。?,2*1.蘭州大學(xué)藥學(xué)院,甘肅蘭州7300002.中國科學(xué)院蘭州化學(xué)物理研究所,中國科學(xué)院西北特色植物資源化學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室和甘肅省天然藥物重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,甘肅蘭州7300003.五邑大學(xué)應(yīng)用物理與材料學(xué)院分析測(cè)試中心,廣東江門5290204.中國

2、科學(xué)院研究生院,北京100049摘要建立以蘆丁為對(duì)照品的油橄欖葉中總黃酮含量的測(cè)定方法。采用Al(NO3)3-NaNO2-NaOH和AlCl3兩種顯色法測(cè)定油橄欖葉中總黃酮的含量,并分別考察了兩種方法對(duì)測(cè)定結(jié)果的影響。結(jié)果表明,AlCl3顯色法適宜于油橄欖葉總黃酮的含量測(cè)定。該法操作簡便,線性關(guān)系良好,準(zhǔn)確度、重復(fù)性和穩(wěn)定性較好,可用于油橄欖葉總黃酮含量測(cè)定,并為中藥和天然產(chǎn)物中總黃酮的含量測(cè)定提供參考。關(guān)鍵詞油橄欖葉;總黃酮;紫外-可見分光光度法;AlCl3顯色法中圖分類號(hào):O657.3文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:ADOI:10.3964

3、/j.issn.1000-0593(2011)02-0547-04[9]。薄層色譜掃量時(shí),該方法需要較多的黃酮化合物對(duì)照品引言描法和超臨界流體色譜法存在靈敏度低,重現(xiàn)性差的缺點(diǎn),也需要較多的黃酮化合物對(duì)照品。紫外分光光度法是測(cè)定天油橄欖(OleaeuropareL.)為木犀科(Oleaceae)木樨欖屬然產(chǎn)物中總黃酮最常用的方法之一,具有儀器廉價(jià)、操作簡(Olea)植物,主要分布在歐洲地中海沿岸國家和美國加州地便,檢測(cè)成本低等優(yōu)點(diǎn),不需要總黃酮中各黃酮化合物對(duì)照區(qū)。自60年代起,油橄欖開始在我國引種,甘肅隴南市是我品,在分析

4、工作中無需對(duì)總黃酮中各黃酮化合物同時(shí)定性定[1,2]?,F(xiàn)代藥理學(xué)研究表明,國油橄欖最大的種植基地之一量,因此得到廣泛應(yīng)用。但由于中藥和天然藥物提取物成分油橄欖葉提取物具有抗氧化、抗真菌、降血壓、降血脂等活復(fù)雜,在應(yīng)用紫外分光光度法測(cè)定含量時(shí)很難避免基質(zhì)對(duì)測(cè)[3,4]。油橄欖葉中的化學(xué)成分包括裂環(huán)烯醚萜類、黃酮類、性定結(jié)果的干擾。本文針對(duì)油橄欖葉中的總黃酮,選用紫外分游離醇、甾醇、烷烴類及揮發(fā)性成分等。其中,裂環(huán)烯醚萜光光度法在不同顯色體系中進(jìn)行含量測(cè)定,探討干擾測(cè)定的類和黃酮類是其主要有效成分。油橄欖葉所含裂環(huán)烯醚萜類主要基

5、質(zhì)因素,以期為中藥或天然產(chǎn)物復(fù)雜基質(zhì)中總黃酮含主要是橄欖苦苷。黃酮類化合物主要有木犀草苷、芹菜苷、量測(cè)定方法提供參考。[1,5]。油橄欖葉中黃酮類化合物含槲皮素、蘆丁、山奈酚等量豐富,其藥理活性主要表現(xiàn)在抗氧化及清除自由基作用,1儀器、試劑與材料對(duì)心血管系統(tǒng)的作用,抗腫瘤、抗癌作用,對(duì)平滑肌的作用,抗炎、抗菌、抗病毒作用,雌激素作用,對(duì)中樞神經(jīng)系統(tǒng)的T6新世紀(jì)紫外-可見分光光度計(jì)(北京普析通用儀器有作用,降血糖作用,鎮(zhèn)痛止瀉、防治潰瘍的作用。此外,還可限責(zé)任公司),RE-52C型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(鞏義市予華儀器有限[6]。作為功能

6、食品添加劑、天然抗氧化劑食用責(zé)任公司),BT224S型電子天平(北京賽多利斯儀器系統(tǒng)有目前,總黃酮的含量測(cè)定方法主要有分光光度法、薄層限公司)。色譜掃描法、高效液相色譜法、超臨界流體色譜法和毛細(xì)管蘆丁對(duì)照品(批號(hào)為100081-200707)購于中國藥品生物[7,8]。其中,高效液相色譜法和毛電泳法等幾種主要的方法制品檢定所。橄欖苦苷對(duì)照品為本實(shí)驗(yàn)室自制:油橄欖葉乙細(xì)管電泳法具有較高的準(zhǔn)確性和靈敏度,但在測(cè)定總黃酮含酸乙酯部位提取物,以氯仿-甲醇(9:1,φ)為洗脫液經(jīng)硅膠收稿日期:2010-05-10,修訂日期:2010-

7、08-20基金項(xiàng)目:中國科學(xué)院“百人計(jì)劃”項(xiàng)目和中國科學(xué)院“科技支甘”項(xiàng)目資助作者簡介:鄭媛媛,女,1986年生,蘭州大學(xué)藥學(xué)院在讀碩士研究生e-mail:hn_zyy@163.com*通訊聯(lián)系人e-mail:didl@licp.cas.cn548光譜學(xué)與光譜分析第31卷柱色譜反復(fù)分離重結(jié)晶得到化合物,經(jīng)113為縱坐標(biāo)進(jìn)行線性回歸,得線性回歸方程、相關(guān)系數(shù)分別yHNMR和C-NMR確定化合物為橄欖苦苷,并由HPLC-DAD法-面積歸一化法2=8.355x+0.0369,R=0.9939,n=6。由此可知,蘆丁對(duì)測(cè)得其含量大于

8、95%。油橄欖葉(干燥品)采于甘肅省隴南照品溶液在0.00788-0.0473mg·mL-1的濃度范圍內(nèi)呈市?,F(xiàn)良好的線性關(guān)系。Al(NO3)3,NaNO2,NaOH和AlCl3為分析純,實(shí)驗(yàn)用2.3.2AlCl3顯色法乙醇為工業(yè)純,實(shí)驗(yàn)用水為蒸餾水。分別精密量取蘆丁對(duì)照品溶液Ⅰ0.0,1

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