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1、短波近紅外光譜法測定葛根中總異黃酮含量【摘要】目的建立短波近紅外光譜法測定葛根中總異黃酮含量的方法。方法應用吸光光度法測定葛根中總異黃酮的含量，并在此基礎上建立葛根中總異黃酮含量的短波近紅外數(shù)學模型。結果在850～1100nm分析譜區(qū)內，建模樣品集的標準值與短波近紅外預測值的相關系數(shù)r=0.981,檢驗樣品集的標準值與短波近紅外預測值的相關系數(shù)r=0.972。結論應用短波近紅外光譜法測定葛根中總異黃酮含量的方法是可行的?！娟P鍵詞】短波近紅外光譜法葛根總異黃酮 Abstract：ObjectiveTodeterminethecontentoftotalisoflavonesofP
2、.lobatabyshort.MethodsTakingthecontentoftotalisoflavonesofP.lobatabyspectrephotometryasthereferencevalue,athematicalmodelofthecontentoftotalisoflavonesofP.lobata.Results850～1100nmonstratedthatthecorrelationbetodelingsamplesetandtheshortplesetandtheshortinationofthecontentoftotalisoflanonesofP
3、.lobatabyshortisfeasible. Key；P.lobata；Totalisoflavones葛根為常用中藥，其主要有效成分為異黃酮［1］。葛根中的總異黃酮成分一般是利用紫外250nm處的吸收進行比色［2～6］，但前處理較復雜，需要時間較長。而原料質量的好壞直接關系到產品的質量和企業(yè)的經濟效益，因此生產上迫切需要快速、簡便的分析方法。近紅外光是指波長介于可見區(qū)與中紅外區(qū)的電磁波，其波長范圍約為0.8～2.5μm，波數(shù)范圍約為12500～4000cm-1。在實際應用中通常把近紅外譜區(qū)分為兩段，即800～1100nm的短波近紅外譜區(qū)和1100～2500nm的中長波近
4、紅外譜區(qū)。短波近紅外譜區(qū)更適合做透射分析，故又叫近紅外透射區(qū)，中長波近紅外區(qū)更適合做反射或漫反射分析，故又叫近紅外反射區(qū)。近紅外光譜分析的最大特點是對樣品無破壞性、操作簡便、分析迅速，采用近紅外透射、散射、漫反射法可直接對樣品進行分析［7］。用中長波近紅外光譜法測定葛根中總異黃酮等成分的含量已有研究［1］，作者使用的是德國BRUKER儀器公司生產的VECTOR22/N傅立葉變換近紅外光譜儀，但是由于該儀器的價格昂貴，在實際應用和普及中有一定的局限性。利用我國自行設計研發(fā)的短波近紅外光譜儀（國家“十五”科技專項），來建立快速檢測葛根中總異黃酮含量的數(shù)學模型，以探索其實際應用可行性。
5、現(xiàn)報道如下?！ ?器材 1.1儀器短波近紅外谷物分析儀（CCD陣列硅檢測器、波長范圍為650～1100nm），北京世農綠方高新技術發(fā)展中心；UV8500型紫外可見光光度計，上海天美科學儀器公司；Glanzg，用無水乙醇定容至25ml，即為母液。按照表1要求移取母液和無水乙醇，用蒸餾水定容至10ml，配成標準溶液。于紫外分光光度計250nm處測其吸光度，以葛根素計算總異黃酮的含量，以其吸光度對葛根素濃度作圖，其線性回歸方程為：Y=9.0947X+0.0603，相關系數(shù)r=0.9998，線性范圍為0～19.20μg/ml。表1標準溶液配制體積比例（略） 2.2葛根中總異黃酮含量的
6、測定將葛根粉末樣品置烘箱中于80℃下烘4h，精密稱取葛根粉末樣品0.2g，置于50ml三角瓶中，加入70%乙醇10ml，稱重，微波加熱60s，取出冷卻，再處理60s，取出冷卻，稱重，補足損失重量，混勻。取0.2ml于25ml試管中，加入無水乙醇2.5ml，定容至刻度，作為供試品溶液。于紫外分光光度計250nm處測供試品溶液吸光度，計算葛根樣品中總異黃酮的百分含量，作為其標準值?！ ?.3葛根中總黃酮含量的近紅外光譜法測定將葛根粉末樣品不經任何化學預處理,直接進行近紅外光譜的測定。測定的方法是將樣品置于一可旋轉的直徑為5cm，光程為3mm的圓柱狀樣品池中，使樣品的松緊度基本保持一致
7、，掃描區(qū)間為800～1100nm，掃描分辨率為8cm-1。將已測得化學值的葛根樣品光譜分成兩組，一組為建模集樣品，用以建立總異黃酮的近紅外分析數(shù)學模型。一組為檢驗集樣品，用以檢驗所建模型的效果。利用PLS法建立建模集樣品圖譜和葛根總異黃酮含量之間的數(shù)學模型。由于波長處于800～850nm時儀器噪聲較大，通過對模型的優(yōu)化，確定選取850～1100nm作為分析譜區(qū)，采用中心化和一階導數(shù)法對數(shù)據(jù)進行預處理。所建模型和預測模型可以用化學值和近紅外預測值的相關系數(shù)（R）和標準差兩個指標來共
