醋炙對(duì)延胡索成分及鎮(zhèn)痛作用的影響

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1、醋炙對(duì)延胡索成分及鎮(zhèn)痛作用的影響陸城宇，孫瑩潔，黃蓉，蔡群（南京中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院13中藥1，江蘇南京）摘要：目的采用外表一點(diǎn)法比較醋炙前后延胡索中延胡索乙素的含量及其對(duì)小鼠鎮(zhèn)痛效果的影響。方法采用HPLC法，以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，,流動(dòng)相:甲醇-0.1%磷酸溶液（85:15）(三乙胺調(diào)節(jié)pH=6.0)，等度洗脫；流速為1.0mL/min,柱溫為30℃,檢測(cè)波長(zhǎng)為280nm。結(jié)果醋炙品中延胡索乙素含量明顯高于生品且醋炙延胡索止痛效果最好。結(jié)論延胡索醋制后大量生物堿和醋酸反應(yīng)生成生物堿鹽提高煎出量，

2、但本實(shí)驗(yàn)中對(duì)小鼠的止痛作用并未有明顯體現(xiàn)。關(guān)鍵詞：延胡索;炮制;延胡索乙素;中藥延胡索為罌粟科植物延胡索CorydalisyanhusuoW.T.Wang的干燥塊莖，又名元胡、玄胡，延胡索味辛、苦，性溫，歸肝、脾經(jīng)，具有活血、利氣、止痛的功能。為理氣止痛、活血化瘀的要藥，常用于血瘀氣滯所致機(jī)體各部位疼痛，主要有效成分為生物堿，延胡索在中醫(yī)臨床使用中多用醋制品【1】。實(shí)驗(yàn)采用HPLC法測(cè)定了延胡索生品及醋煮炮制品中的延胡索乙素的含量，比較炮制前后的生物堿含量變化和鎮(zhèn)痛實(shí)驗(yàn)，驗(yàn)證中醫(yī)臨床使用中多用延胡索醋制品

3、及醋煮法炮制的理由。1材料Agilent1100高效液相色譜儀、延胡索飲片、鎮(zhèn)江產(chǎn)米醋、真空干燥箱、延胡索乙素標(biāo)準(zhǔn)品、高速離心機(jī)、炒鍋、鍋鏟、搪瓷盤(pán)、切藥刀、標(biāo)準(zhǔn)篩（50目，即3號(hào)篩）、研缽、萬(wàn)分之一電子天平、容量瓶（10ml、5ml）、移液管（25ml、50ml）、燒杯、玻璃漏斗、錐形瓶、量筒、微量進(jìn)樣器、流動(dòng)相過(guò)濾裝置、臺(tái)式天平、秒表、注射器、灌胃針、超聲儀、小鼠籠等，所用試劑均符合各條件下規(guī)定。2方法與結(jié)果2.1醋煮延胡索的制備取凈延胡索50g，加醋（10ml）浸潤(rùn)。加水200ml于煮鍋內(nèi)，先用大火

4、煮沸，然后加入延胡索及醋液于鍋內(nèi)（鍋內(nèi)液體要平藥面），調(diào)小火煮40min后，調(diào)大火收水，煮至醋液被吸盡，無(wú)硬心時(shí)取出，干燥，搗碎成顆粒狀。(每100kg延胡索，用醋20kg)1.1延胡索乙素含量測(cè)定1.1.1色譜條件色譜柱：C18色譜柱；檢測(cè)波長(zhǎng)280nm；流速:1.0mL/min；柱溫:30℃；進(jìn)樣量:10μL；流動(dòng)相:甲醇-0.1%磷酸溶液(三乙胺調(diào)pH至6.0)【2】；梯度方式：等度洗脫。理論塔板數(shù)按延胡索乙素計(jì)應(yīng)不低于3000。2.2.2對(duì)照品溶液的制備精密稱(chēng)取延胡索乙素對(duì)照品適量，加甲醇制成每1

5、ml含46ug的溶液，即得。2.2.3供試品溶液的制備取延胡索生品和醋炙品，打粉，過(guò)3號(hào)篩，用萬(wàn)分之一電子天平稱(chēng)得：延胡索生品1.0005g，醋炙延胡索1.0017g。將其分別置于100ml具塞磨口錐形瓶中，用移液管精密加水50ml，稱(chēng)定重量為：生品部分150.3g，醋炙部分142.0g，將其置于超聲儀中超聲30min，稱(chēng)重，加水補(bǔ)足失重，搖勻，濾紙濾過(guò)，用25ml移液管精密移取續(xù)濾液25ml，置于蒸發(fā)皿中蒸干，殘?jiān)铀芙?，轉(zhuǎn)移至10ml容量瓶中定容，分別吸取生品和對(duì)照品溶液若干，置于高速離心器中，以1

6、2000r/min，離心3分鐘，完畢后，各吸取至微量進(jìn)樣器中。2.2.4測(cè)定法分別精密吸取生品與對(duì)照品10ul，注入HPLC，測(cè)定，即得。按干燥品計(jì)算，分別計(jì)算延胡索生品和醋炙品中延胡索乙素的百分含量。如表1樣品組樣品取樣量（g）延胡索乙素含量（%）生延胡索1.00054.05%醋延胡索1.00175.29%表12鎮(zhèn)痛實(shí)驗(yàn)比較2.1樣品液的制備：稱(chēng)取延胡索生品及炮制品各10g，水煎煮1次(150ml水)，每次微沸30min，脫脂棉過(guò)濾，濾液濃縮至40mL，備用。（每毫升含有0.25g藥物）1.1實(shí)驗(yàn)方法：

7、化學(xué)刺激法-扭體法:取健康雄性6只小白鼠，體重18～34g，隨分為3組，對(duì)照組灌服等體積生理鹽水，給藥組分別灌以生品、醋煮延胡索水煎液0.6mL/只，40min后，各鼠腹腔注射O.7%醋酸0.1mL/10g【3】，觀察并記錄15min內(nèi)小鼠產(chǎn)生扭體反應(yīng)的次數(shù)(見(jiàn)表2)，延胡索不同炮制品鎮(zhèn)痛作用結(jié)果與生理鹽水組比較鎮(zhèn)痛效果（見(jiàn)表3）。組號(hào)組別12345678對(duì)照組17251733241013171372278151422生延胡索組98883115411981419678醋延胡索組77161836008814

8、3810550表2樣品組給藥劑量ml/只數(shù)量（n）0-15min平均扭體次數(shù)對(duì)照組0.61616.5000±3.2917生延胡索組0.6168.6250±0.9406醋延胡索組0.6169.0625±5.8975表3（粗炙組與對(duì)照組比較,△P<0.05；與生品組比較,P<0.05；醋炙組與生品組比較，△P>0.05;）4討論4.1延胡索是臨床常用活血止痛中藥，延胡索含多種生物堿，其中主要含延胡索甲素、乙素、及丑素等生物堿成分，