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1、半葉馬尾藻多糖對HL論文唐慎華賈秀紅朱淑霞李建廠陸羨【關(guān)鍵詞】半葉馬尾藻多糖；HL【摘要】目的探討半葉馬尾藻多糖對HL60細胞CD11b、CD11a表達的影響。方法MTT研究半葉馬尾藻多糖對HL60細胞體外增殖的影響，采用流式細胞術(shù)研究對CD11b、CD11a表達的影響。結(jié)果半葉馬尾藻多糖能增高CD11b、CD11a的表達率，且作用隨時間和濃度的增加而增強。結(jié)論半葉馬尾藻多糖在體外可影響HL60細胞CD11b、CD11a的表達，提示其在抗腫瘤方面有一定的開發(fā)應用前景。【關(guān)鍵詞】半葉馬尾藻多糖；HL60細胞；CD11
2、b；CD11a【Abstract】ObjectiveToexploretheeffectofseaSargassumconfusumontheexpressionofCD11bandCD11ainHL60cell.MethodTheMTTandFCMapproachesedependentmanner.ConslusionTheseaiadrug.【KeySargassumconfusum,SP）研究其對HL60細胞CD11b、CD11a表達的影響。1材料與方法1.1藥物與試劑SP（廣東醫(yī)學院劉秋英碩士惠贈），RP
3、MI1640培養(yǎng)基（GibcoCo,USA），F(xiàn)ITC標記的鼠抗人CD11a單克隆抗體（ExalphaBiologicalsInc,USA），F(xiàn)ITC標記的鼠抗人CD11b單克隆抗體（ExalphaBiologicalsInc,USA），F(xiàn)ITC標記的非特異鼠抗人IgG2a（ExalphaBiologicalsInc,USA）。1.2主要儀器OLYMPUSIMTI型倒置相差顯微鏡（Japan），EPICSXL流式細胞儀（CoulterCo,USA），丹尼酶標儀（MK3）(Denmark)，SI1640液體培養(yǎng)體系，
4、置37℃、5%CO2恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，隔天換液一次。實驗選用對數(shù)生長期細胞。1.3.2MTT抑制實驗：參照文獻［1，2］，將細胞以2×105/ml密度接種于96孔培養(yǎng)板中，加入不同濃度的SP，置37℃、5%CO2孵箱中分別培養(yǎng)24、48、72h后，每孔加入MTT（5mg/ml）20μl,繼續(xù)培養(yǎng)4h，加入MTT裂解液（20%SDS+50%DMF+30%H2O）100μl，37℃、5%CO2孵箱中孵育8h，酶標儀檢測各組細胞的A630/A570值，計算抑制率(IR)。抑制率（IR）＝（1－用藥組A值/對照組A值）×1
5、00%。1.3.3FCM檢測CD11b、CD11a的表達：取藥物處理后的細胞懸液1000r/min離心5min，PBS洗滌2次，并用PBS重懸細胞，調(diào)整細胞數(shù)為1×106/ml，取100μl細胞懸液，加入10μlCD11b單克隆抗體和10μlCD11a單克隆抗體；另取100μl細胞懸液，加入10μlIgG2a作陰性對照，4℃避光孵育30min，PBS洗滌2次，200目尼龍網(wǎng)過濾，上機檢測。1.3.4統(tǒng)計處理：實驗數(shù)據(jù)用x±s表示，使用SPSS11.5統(tǒng)計軟件進行統(tǒng)計描述，采用單因素方差分析（OneTT結(jié)果以不同濃度
6、（0、50、100、200、400、800μg/ml）的SP作用于HL60細胞24、48、72h，用MTT法檢測其對HL60細胞增殖的影響，如表1，圖1、2所示，隨著SP濃度的增加和作用時間的延長，抑制率逐漸增加。當濃度為800μg/ml，作用48h時抑制率為（5130±310）%，與對照組相比差異有顯著性（P001）。其24、48、72h的IC50為（77678±2830）μg/ml、（50897±2208）μg/ml、（35567±1023）μg/ml。表1SP對HL60細胞增殖的抑制作用（略）注：與0μg/m
7、l組相比◇P005，◆P001；*F=156214，**F=47032,***F=109831圖1抑制作用的劑效曲線（略）圖2抑制作用的時效曲線(略)2.2CD11b、CD11a的表達結(jié)果如表2、3所示，隨著藥物濃度及作用時間的增加，CD11a、CD11b表達逐漸上升。表2SP對HL60細胞CD11a表達的影響（略）注：與0μg/ml組相比△P005，◆P001；與300μg/ml組相比▲P001，與500μg/ml組相比★P001表3SP對HL60細胞CD11b表達的影響（略）注：與0μg/ml組相比◇P005，
8、◆P001；*F=21533，**F=26044，***F=366073討論白血病是人群發(fā)病率較高的惡性腫瘤之一，化療是重要的治療手段，但其副作用是幾乎不可克服的缺點。在祖國醫(yī)學中，中草藥在抗腫瘤中的應用源遠流長，如馬尾藻等治療乳腺癌和子宮癌?，F(xiàn)代研究證明近100種中藥多糖具有不同程度的抗腫瘤作用。我們的研究結(jié)果表明，SP對HL60細胞增殖呈明顯抑制作用，且
