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1、關(guān)于龍葵果中原花青素優(yōu)化提取試驗研究 摘要以野生龍葵果為原料,以原花青素提取率為考察指標,研究提取溶劑濃度、料液比、提取溫度、提取時間等因素對原花青素提取效果的影響。通過正交試驗,確定野生龍葵果中原花青素的最佳提取工藝條件為:提取溶劑為60%的乙醇,料液比1∶15,提取溫度25℃,提取時間80min。此優(yōu)化條件下提取野生龍葵果中原花青素的含量最高,達0.0552%?！ ￡P(guān)鍵詞龍葵果;原花青素;優(yōu)化提取 中圖分類號TS255.4Y=2.0458C+0.0093(R2=0.9953) 其中,Y為吸光度值;C為原花青素的濃度(μg/mL);R
2、為校正系數(shù)?！ ?.4.4原花青素含量測定。準確量取1mL提取液,加入5mL現(xiàn)配制的顯色劑,在25℃條件下反應15min,以60%的乙醇和顯色劑混合溶液為空白,在500nm處測定吸光度值[13]?！ ?結(jié)果與分析 2.1提取溫度的選擇 由圖1可知,隨著提取溫度的升高,原花青素的提取效果增強。因為溫度升高,分子運動速度加快,滲透、擴散、溶解速度加快,同時高溫可以引起細胞膜結(jié)構(gòu)的變化,使原花青素由龍葵果的外層細胞轉(zhuǎn)移到溶劑中,但是高溫也使原花青素的結(jié)構(gòu)被氧化破壞,導致其提取效果下降。因此,提取溫度以25℃為宜?！ ?.2提取溶劑料液比的
3、確定 由圖2可知,在料液比為1∶(5~15)范圍內(nèi),原花青素吸光度顯著增加,料液比1∶15為原花青素吸光度最高點,當料液比增大到一定程度時,提取效果趨于穩(wěn)定,即一定比例的溶劑已將有效成分基本溶出完全。因此,最適宜料液比為1∶15?！ ?.3提取溶劑濃度的確定 由圖3可知,提取溶劑濃度在30%~60%(v/v)區(qū)間,原花青素吸光度隨乙醇濃度的增大而提高,但當乙醇濃度大于70%(v/v)以后,原花青素吸光度開始下降。根據(jù)有機溶劑的相似相溶原理,原花青素的溶出度與其本身的極性及溶劑的極性相關(guān),極性相似可以達到最大溶出度。試驗過程中也發(fā)現(xiàn)低濃度
4、的乙醇提取溶液較渾濁,這主要是由于低濃度的乙醇液中含有更多蛋白的原因。本試驗在乙醇濃度為60%(v/v)時,吸光度達到峰值,因此乙醇濃度控制在50%~70%(v/v)較好?！ ?.4提取時間的確定 由圖4可知,原花青素提取效果隨時間不同而不同。當提取達到一定時間時,龍葵果內(nèi)外有效成分濃度達到平衡,提取效果最好;隨著時間的進一步延長,其提取效果有所下降,因為原花青素在溶液中長時間受熱可能使部分酚結(jié)構(gòu)被破壞;但是,如果提取時間過短,原花青素則不能很快從龍葵果細胞中溶出。因此,提取時間以80min為宜?！ ?.5pH值的影響及提取次數(shù)的確定
5、 由圖5可知,原花青素在偏酸性較穩(wěn)定,在pH值為3或4左右提取效果較好,尤其是在3時達到最高點,以后隨著pH值的增加,含量反而下降,故以pH值為3時提取效果最好。浸提次數(shù)過多原花青素會在乙醇水浴蒸發(fā)中損失部分,影響含量測定。原花青素為不穩(wěn)定物質(zhì),隨時間延長,原花青素會有部分衰減,穩(wěn)定性減弱。綜合考慮,以浸提2次為宜?！ ?.6正交試驗確定最佳的提取工藝 由表2可知,各種因素對提取效果影響的主次順序依次為提取溫度>乙醇濃度>料液比>提取時間。故選用的最佳組合為A1B1C2D2,即料液比為1∶15,用60%乙醇,在25℃溫
6、度下提取2次,每次提取時間80min。此時野生龍葵果中原花青素的百分含量最大,達到0.0552%。 3結(jié)論 龍葵果中原花青素優(yōu)化提取試驗結(jié)果表明,原花青素在料液比為1∶15,用60%乙醇,在25℃溫度下提取2次,每次提取時間80min時獲得的原花青素的百分含量最大,達到0.0552%。中國.l.編輯整理?！ ?
