《植物脫毒技術(shù)》ppt課件

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1、第九章植物脫毒技術(shù)宜職院08.9目的與要求了解脫毒意義，學(xué)習(xí)植物莖尖脫毒原理及其操作程序，了解其他組織脫毒方法及應(yīng)用，掌握植物理化脫毒方法。學(xué)習(xí)植物脫毒苗的鑒定方法，掌握各方法的鑒定原理，了解植物脫毒苗的保存和繁殖方法。具備植物莖尖脫毒技術(shù)基礎(chǔ)，具有指示植物鑒定脫毒苗的基本能力，有脫毒苗保存的認(rèn)知。全世界已發(fā)現(xiàn)植物病毒有近788種。病毒的危害：組織和細(xì)胞病變新陳代謝等生理機(jī)能受到干擾外觀表現(xiàn)不正常狀態(tài)由于危害可通過(guò)營(yíng)養(yǎng)體傳給后代，病毒對(duì)寄主植物可造成毀滅性危害，導(dǎo)致大幅度減產(chǎn)，甚至全株死亡。世界作物生產(chǎn)中，病毒危害程度僅次于真菌。危害一些植物的病毒數(shù)目植物種類感染病毒種類植物種類感染病毒

2、種類植物種類感染病毒種類菊花19矮牽牛5蘋(píng)果36康乃馨11百合6柑橘23水仙4馬鈴薯17葡萄26唐菖蒲5大蒜24草莓24風(fēng)信子3豌豆15桃23月季10櫻桃44梨11所謂脫毒就是采用一定的方法除去植物體內(nèi)病毒的技術(shù)。無(wú)病毒苗：指不含該種植物的主要危害病毒，即經(jīng)檢測(cè)主要病毒在植物體內(nèi)的存在表現(xiàn)陰性反應(yīng)的苗木。應(yīng)用植物脫毒技術(shù)意義植物脫毒技術(shù)可使植物恢復(fù)原來(lái)優(yōu)良特性，生長(zhǎng)勢(shì)增強(qiáng)，明顯提高產(chǎn)量、改善品質(zhì)，產(chǎn)量的提高幅度最高可達(dá)300%。植物脫毒技術(shù)不僅脫除了病毒，還可以去除多種真菌、細(xì)菌及線蟲(chóng)病害，使種性得以恢復(fù)，植株生長(zhǎng)健壯，減少肥料和農(nóng)藥施用量，降低生產(chǎn)成本，保護(hù)了環(huán)境第一節(jié)脫毒方法一、莖尖

3、培養(yǎng)脫毒（一）通過(guò)莖尖培養(yǎng)脫毒的原理1、病毒在植物體內(nèi)的分布病毒濃度不同，離尖端越遠(yuǎn)病毒濃度越高。莖尖或根尖，離體培養(yǎng)便可獲得無(wú)病毒再生植株。2、莖尖大小與脫毒莖尖外植體的大小與脫毒效果成反比。莖尖分生組織不能合成自身需要的生長(zhǎng)素，但下部葉原基能提供，因而帶葉原基的莖尖生長(zhǎng)快，成苗率高。但莖尖越大，脫毒效果差。（二）莖尖脫毒方法1、取樣與消毒可直接選定的植株上取頂芽進(jìn)行消毒接種。采頂芽與側(cè)芽消毒接種。消毒方法是：剪取頂芽梢段3、5厘米，剝?nèi)ゴ笕~片，用自來(lái)水沖洗干凈，在75%酒精中浸泡30秒左右，用1%-3次氯酸鈉或5%-7%的漂白粉溶液消毒10-20分，最后用無(wú)菌水沖洗材料4-

4、5次。酒精擦拭手外植體消毒浸泡5min器械消毒酒精燈灼燒酒精擦拭培養(yǎng)皿2、莖尖剝離和接種將已消毒的芽放在帶濾紙的培養(yǎng)皿上—器械固定—解剖鏡下剝?nèi)ビ兹~—切下帶1-2個(gè)葉原基的生長(zhǎng)點(diǎn)（0.3-0.5mm）—切下的莖尖轉(zhuǎn)至培養(yǎng)基上（頂部向上）。酒精擦拭旋轉(zhuǎn)灼燒顯微鏡下獲取莖尖接種蓋好瓶塞脫毒馬鈴薯試管苗3．培養(yǎng)25+2℃，1500-5000LX，10-16h一般光照培養(yǎng)比暗培養(yǎng)效果好。其間應(yīng)更換新鮮培養(yǎng)基。提高培養(yǎng)基中BA的濃度可形成大量從生芽。4．生根誘導(dǎo)誘導(dǎo)生根的方法是將2-3cm高的無(wú)根苗轉(zhuǎn)入生根培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)1-2個(gè)月可生根。（三）培養(yǎng)基與培養(yǎng)方式1、培養(yǎng)基：MS，White,Mor

5、el等2、培養(yǎng)方式：一般采用半固體培養(yǎng)基。（四）影響莖尖脫毒效果的因素（莖尖脫毒技術(shù)的關(guān)鍵）植物種類、病毒種類、剝離莖尖的大?。?.3-0.5mm帶1-3個(gè)葉原基）、培養(yǎng)基營(yíng)養(yǎng)用于脫毒的適宜莖尖大小植物病毒名稱剝離莖尖大?。╩m）植物病毒名稱剝離莖尖大小（mm）馬鈴薯馬鈴薯卷葉病毒馬1.0～3.0百合花葉病0.2～1.0鈴薯Y病毒1.0～3.0鳶尾花葉病0.2～0.5馬鈴薯X病毒0.2～0.5菊花各種病毒0.2～1.0馬鈴薯G病毒0.2～0.3康乃馨各種病毒0.2～0.8馬鈴薯S病毒0.2以下大麗花花葉病0.6甘薯斑紋花葉病毒1.0～2.0大蒜花葉病毒0.3～1.0縮葉花葉病毒1.0

6、～2.0甘蔗花葉病0.7～3.0羽毛狀花葉病毒0.3～1.0草莓各種病毒0.2～1.0二、熱處理脫毒脫毒原理即熱處理脫毒，一些病毒對(duì)熱不穩(wěn)定，在高于常溫的溫度下（35-40度）即鈍化失活。1、溫湯浸漬處理脫毒法材料置于50℃左右熱水中浸漬幾十分鐘到數(shù)小時(shí)。特點(diǎn)：簡(jiǎn)單易行，成本低，但易使材料受傷。適用：甘蔗、木本植物和休眠器官的處理。2、熱空氣處理脫毒法將植物用35～40℃的熱空氣處理2～4周或更長(zhǎng)時(shí)間。特點(diǎn)：損傷較小，操作簡(jiǎn)便，須嚴(yán)格控制溫度時(shí)間適用：多數(shù)植物3、熱處理結(jié)合莖尖培養(yǎng)脫毒目前常采用將熱處理和莖尖分生組織培養(yǎng)結(jié)合起來(lái)的方法脫毒。特點(diǎn)：既可縮短熱處理時(shí)間，提高植株成活率，

7、又可剝離較大的莖尖，提高莖尖培養(yǎng)的成活率和脫毒率。適用：大多數(shù)植物，并可除去一般培養(yǎng)難以去除的紡錘塊莖類病毒三、其他組織培養(yǎng)脫毒方法（一）愈傷組織培養(yǎng)脫毒將感染病毒的組織離體培養(yǎng)獲得愈傷組織，再誘導(dǎo)愈傷組織分化成苗，從而獲得無(wú)病害毒植株的方法，即愈傷組織培養(yǎng)脫毒法。部分愈傷組織細(xì)胞不帶病毒可能有以下兩方面的原因：一是愈傷組織細(xì)胞分裂增殖速度快，而病毒復(fù)制速度較慢，趕不上細(xì)胞的繁殖；二是愈傷組織發(fā)生了抗病毒突變。（二）珠心胚