櫻桃自交不親和性在遺傳育種中的分析及應(yīng)用

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1、英文縮略表縮寫符號英文名中文名b0basepair堿基對cDNAcomplementaryDNA互補DNACTABCetyltrimethylammoniumbromide十六烷基澳化胺SDWSterilizeDistilledwater滅菌重蒸水DNADeoxyribonucleicacid脫氧核糖核酸dATPDeoxyadenosinetriphosphate脫氧腺苷三磷酸dCTPDeoxyctyidinetriphosphate脫氧胞苷三磷酸dGTPDeoxyguanosinetriphosphate脫氧鳥苷三磷酸dNTPD

2、eoxyribonueleosidetriphosphate脫氧核糖核苷酸三磷酸dTTPDeoxythmidinetriphosphate脫氧胸苷三磷酸EDTAEDTANa22H20二水乙二胺四乙酸二鈉GSIGametophyticself-incompatibility配子體自交不親和HVHyperiableregion高變區(qū)KbKilobase于堿基P_AGEPolyacrylamidegelelectrophoresis聚丙烯酰胺凝膠電泳PBPhosphatebuffer磷酸緩沖液AS-PCRAllelespecificPo

3、lymeraseChainReaction等位特異聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)rmprevolutionsperminute轉(zhuǎn)份SCSelf-eompatibility自交親和SISelf-incompatibility自交不親和SLGSlocusglycoproteins糖蛋白SRKSlocusreceptorkinases受體激酶SSISporophyticself-incompatability孢子體自交不親和1lisTrishydryxymethylaminomethane三羥甲基氨基甲烷山東農(nóng)業(yè)大學(xué)博士學(xué)位論文摘要鑫交不親和是被子植物

4、預(yù)防近寒繁殖芹器絳持遺傳交異靜一種重簧橇睪《。這一撬稍在植物界中普遍存在，許多聚樹如蘋萊、梨、櫻桃、杏都存在自交不親和現(xiàn)象。由于自交不親和怒植物生殖過程中的一個踅要現(xiàn)象，因此它已成為果樹敷其它撼物研究的熱點，毽自交不親和性在甜櫻桃遺傳商靜釉艨創(chuàng)新和親緣關(guān)系的鑒定等方聰?shù)募庞眠€鮮有報道。本研究以櫻亞屬中甜櫻桃，酸櫻桃，毛櫻桃等種為試材，探討了導(dǎo)致甜櫻桃鴦交親幫爆發(fā)生豹綴因，建立了AS零CR俘系對不囂越櫻拂晶穆懿s基麟型避行鑒定，并利用自交不親和基因進行了種質(zhì)創(chuàng)新，親緣關(guān)系鑒定等方面的研究。眼體結(jié)果＼懿下：1．根據(jù)核果類S基因序列的特

5、點在c2，c5保守區(qū)設(shè)計特異引物，建立了AS-PCR體系，嗣已知鎣豳登晶釋驗證箕胃靠往。辯57個匿內(nèi)外靜雒褸橇品種進行了自交不親和(sI)基因型的鑒定，首次鑒定了我國主栽的一些甜櫻桃品種的s熬因型，并發(fā)現(xiàn)了兩個新的s蕊閔型$1S6、$4S9，將自交不親和的組群擴展至《21個。同時對原有豹甜櫻桃蠱愛不親秘組群列表A(Tehraniat．elBrown，1992)進行了調(diào)整取補充，藿新鑒定了以前被歸類于。組群品種的基因型，其中Hedelfingen基因型為$3S5，應(yīng)屬于強縫群，Vega豹基邃型必$2S3，援于Ⅳ綴爨，誕疆0綴群著不存

6、在，京只是一終與已知組群的S基因型不同的品種的組合。2+鞋鴦交親羈熬耱絮蜒縋(stella)楚親零梅建轉(zhuǎn)交親辯群俸，禳攥s蒸囂分離涎特點可獲得基因型為$3S4’和S4’s4’的自交親和后代，利用AS．PCR技術(shù)體系對自交后代的萋函型讖行簽定，在獲樽的325棵植株中$3S4基因垂178株，$4S4蒸因鼙140株，其余7株基因裂為$3S3，占2。16％。$3S4，$4S4的比例為1．27：l，經(jīng)X2檢驗并不符合l：l的分離院鉚，這可能與S3基因禚遺傳中是有一定的選擇優(yōu)勢有關(guān)。3．遠緣雜交是櫻桃砧本及薪熱秘育靜熬奏效途徑，但在銀多種闖和

7、屬閩的雜交中，豳于種種原因不能形成凝有萌發(fā)力的種予。我們以甜櫻桃品種先鋒為母本，氌櫻楗為父本進行7秘裁雜交，獲餐藥雜交釋予嚴重皺纓，爨爨繯輕，琴戇蘩發(fā)，逶避憝培養(yǎng)斃服了邋緣雜種在自然狀態(tài)下胍敗育情況的發(fā)生，挽救形成了雜種磁代(代號G3)。零l臻AS·PCR露RAPD囂靜方法對獲得豹G3縫塔蘸遺行螢期親緣關(guān)系鑒定，得到～致結(jié)論，確定G3為邋緣雜交的新種質(zhì)，同時證實AS．PCR可以作為搽定親緣關(guān)系的一種輔韻方法。堡坐!奎至蔞塑絲壟望焦蔓壁主墮竺壅墨壁旦4．我們根據(jù)S等位基因在種間的保守性，利用AS-PCR對酸櫻桃，甜櫻桃，草原櫻桃的S

8、等位基因進行擴增，通過對S基因的專一性擴增和對擴增片段的克隆測序發(fā)現(xiàn)酸櫻桃品種(Favoriate)中也含有甜櫻桃的s1，s4等位基因和草原櫻桃中的一個等位基因(Sx)，從而證實了酸櫻桃，甜櫻桃，草原櫻桃之間存在親緣關(guān)系。在酸櫻桃品種Favodat