韭子對(duì)老年小鼠免疫功能影響的實(shí)驗(yàn)研究_1

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1、從本學(xué)科出發(fā)，應(yīng)著重選對(duì)國(guó)民經(jīng)濟(jì)具有一定實(shí)用價(jià)值和理論意義的課題。課題具有先進(jìn)性，便于研究生提出新見(jiàn)解，特別是博士生必須有創(chuàng)新性的成果韭子對(duì)老年小鼠免疫功能影響的實(shí)驗(yàn)研究【摘要】目的研究韭子水煎劑對(duì)老年小鼠免疫功能的影響。方法以韭子水煎劑灌胃老年小鼠30d，應(yīng)用流式細(xì)胞技術(shù)檢測(cè)小鼠T淋巴細(xì)胞亞群、放射免疫方法檢測(cè)血清白介素2含量，ELISA方法檢測(cè)血清中免疫球蛋白G的含量。結(jié)果　老年組脾臟T淋巴細(xì)胞亞群比例失調(diào)，血清IL2和IgG含量下降；老年韭子水煎劑治療組脾臟T淋巴細(xì)胞亞群由失衡恢復(fù)到平衡，血清

2、IL2和IgG含量提高。結(jié)論韭子水煎劑具有恢復(fù)老年小鼠免疫功能的作用?！娟P(guān)鍵詞】韭子水煎劑；老年小鼠；免疫功能中藥韭子為百合科植物韭的種子，含有生物堿、揮發(fā)油、皂甙、硫化物、蛋白質(zhì)、氨基酸、油脂、維生素C等成分。研究表明，中藥韭子具有補(bǔ)肝腎，暖腰膝，壯陽(yáng)，抗炎抑菌、祛痰等藥理作用〔1〕，并能增強(qiáng)小鼠非特異性免疫和體液免疫功能〔2〕。但對(duì)老年個(gè)體的免疫功能調(diào)節(jié)作用目前尚未見(jiàn)報(bào)道。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)檢測(cè)老年小鼠T淋巴細(xì)胞亞群，IL2活性以及IgG含量，探討韭子對(duì)老年小鼠免疫功能的影響?！?材料與方法11　材料

3、課題份量和難易程度要恰當(dāng)，博士生能在二年內(nèi)作出結(jié)果，碩士生能在一年內(nèi)作出結(jié)果，特別是對(duì)實(shí)驗(yàn)條件等要有恰當(dāng)?shù)墓烙?jì)。從本學(xué)科出發(fā)，應(yīng)著重選對(duì)國(guó)民經(jīng)濟(jì)具有一定實(shí)用價(jià)值和理論意義的課題。課題具有先進(jìn)性，便于研究生提出新見(jiàn)解，特別是博士生必須有創(chuàng)新性的成果韭子購(gòu)于佳木斯市藥材公司?？剐∈驝D3、抗小鼠CD4、抗小鼠CD8單克隆抗體：北京醫(yī)科大學(xué)免疫系。IL2試劑盒：解放軍總醫(yī)院科技開(kāi)發(fā)中心放免所；IgGELISA檢測(cè)試劑盒：北京邦定生物試劑公司。1對(duì)象健康昆明種小鼠來(lái)自本校實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心，30只,雌雄各半，青年

4、組(2月齡)10只,體重g,老年組(12月齡)20只,體重(50±5）g。13方法131中藥制備韭子50g，按傳統(tǒng)方法水煎煮2次，合并兩次濾液后加熱濃縮制成含生藥量為1g/ml的韭子水煎液。132實(shí)驗(yàn)分組實(shí)驗(yàn)分為三組,青年組10只，老年組10只,老年韭子水煎劑治療組10只。治療組根據(jù)每鼠體重灌胃給予韭子水煎劑0ml每日1次〔2〕;老年組、青年組,灌服生理鹽水0ml/只，每日1次。連續(xù)30d后，取小鼠眼球血，離心分離血清，凍存，待檢；小鼠斷髓處死，無(wú)菌取脾，于Hanks液中研碎，制成1×10

5、6/ml脾細(xì)胞懸液。1指標(biāo)檢測(cè)141T淋巴細(xì)胞亞群測(cè)定將脾細(xì)胞懸液分別加入2個(gè)試管內(nèi)，1ml/管。第1管加入FITC標(biāo)記的抗小鼠CD3+單克隆抗體40課題份量和難易程度要恰當(dāng)，博士生能在二年內(nèi)作出結(jié)果，碩士生能在一年內(nèi)作出結(jié)果，特別是對(duì)實(shí)驗(yàn)條件等要有恰當(dāng)?shù)墓烙?jì)。從本學(xué)科出發(fā)，應(yīng)著重選對(duì)國(guó)民經(jīng)濟(jì)具有一定實(shí)用價(jià)值和理論意義的課題。課題具有先進(jìn)性，便于研究生提出新見(jiàn)解，特別是博士生必須有創(chuàng)新性的成果μl、第二管同時(shí)加入PE標(biāo)記的抗小鼠CD4+單克隆抗體和FITC標(biāo)記的抗小鼠CD8+單克隆抗體各20μl，

6、作用30min后，加入1ml熒光洗液，200r/min離心min，去上清。加入1ml熒光保存液，流式細(xì)胞儀檢測(cè)106個(gè)細(xì)胞中各細(xì)胞亞群的百分率。14血清IL2的檢測(cè)采用放射免疫法測(cè)定法，按試劑盒說(shuō)明書(shū)操作。14血清IgG檢測(cè)ELISA法，按試劑盒說(shuō)明書(shū)操作。1統(tǒng)計(jì)學(xué)處理實(shí)驗(yàn)各項(xiàng)指標(biāo)以x±s表示，通過(guò)SPSS100軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，組間進(jìn)行方差分析、q檢驗(yàn)?！〗Y(jié)果1韭子水煎劑對(duì)老年小鼠T淋巴細(xì)胞亞群的影響見(jiàn)表1。老年組與青年組比較，CD4+亞群的比例、CD4+/CD8+的比值明顯降低，統(tǒng)

7、計(jì)學(xué)有顯著性差異，說(shuō)明模型成功；應(yīng)用韭子水煎劑治療后，治療組CD4+亞群和CD4+/CD8+的比值與青年組比較無(wú)明顯差異。表1韭子水煎劑對(duì)衰老小鼠脾臟T淋巴細(xì)胞亞群功能的影響(略)韭子水煎劑對(duì)老年小鼠血清IL2和IgG含量的影響課題份量和難易程度要恰當(dāng)，博士生能在二年內(nèi)作出結(jié)果，碩士生能在一年內(nèi)作出結(jié)果，特別是對(duì)實(shí)驗(yàn)條件等要有恰當(dāng)?shù)墓烙?jì)。從本學(xué)科出發(fā)，應(yīng)著重選對(duì)國(guó)民經(jīng)濟(jì)具有一定實(shí)用價(jià)值和理論意義的課題。課題具有先進(jìn)性，便于研究生提出新見(jiàn)解，特別是博士生必須有創(chuàng)新性的成果　　見(jiàn)表2。老年組與青年組比較

8、，血清IL2和IgG水平明顯降低，具有顯著性差異，說(shuō)明模型成功；應(yīng)用韭子水煎劑治療后，治療組與青年組比較，血清IL2和IgG含量水平無(wú)明顯差異。表韭子水煎劑對(duì)小鼠血清IL2的影響(略)　討論　　在衰老個(gè)體，免疫器官出現(xiàn)萎縮,淋巴細(xì)胞總數(shù)下降,各亞群的功能也降低,CD4細(xì)胞和CD8細(xì)胞比例改變,表面的CD4受體和CD8受體的密度也下降；淋巴細(xì)胞分泌的細(xì)胞因子如IL2的含量也發(fā)生了改變，造成個(gè)體一生中第二個(gè)發(fā)病高峰〔3〕。通過(guò)本實(shí)驗(yàn)證明,