vegf、mir-205及其靶蛋白ezrin、lamina%2fc在卵巢癌中表達及意義

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1、原創(chuàng)性聲明本人聲明,所呈交的學(xué)位論文是本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進行的研究工作及取得的研究成果。盡我所知,除了論文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方外,論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果,也不包含為獲得中南大學(xué)或其他單位的學(xué)位或證書而使用過的材料。與我共同工作的同志對本研究所作的貢獻均已在論文中作了明確的說明。作者簽名:粒日期.盟年上月生日關(guān)于學(xué)位論文使用授權(quán)說明本人了解中南大學(xué)有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定,即:學(xué)校有權(quán)保留學(xué)位論文并根據(jù)國家或湖南省有關(guān)部門規(guī)定送交學(xué)位論文,允許學(xué)位論文被查閱和借閱;學(xué)??梢怨紝W(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容,可以采用復(fù)印、縮印或其它手段保存學(xué)位論文。同時授權(quán)中國

2、科學(xué)技術(shù)信息研究所將本學(xué)位論文收錄到《中國學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫》,并通過網(wǎng)絡(luò)向社會公眾提供信息服務(wù)。作者躲牲聊簽送嘿叢年上月立日VEGF、miR.205及其靶蛋白Ezrin、LaminA/C在卵巢癌中的表達及意義摘要:背景早期轉(zhuǎn)移是卵巢癌的惡性特征之一,但其轉(zhuǎn)移機制尚未明確。血管內(nèi)皮生長因子(vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)在卵巢癌患者血清以及癌組織中高表達,并促進腫瘤細(xì)胞的生長、侵襲和轉(zhuǎn)移。本課題組前期對VEGF誘導(dǎo)上皮性卵巢癌細(xì)胞株HO.8910后進行比較蛋白質(zhì)組學(xué)研究,鑒定出17種差異蛋白,結(jié)合文獻發(fā)現(xiàn)其中兩種差異蛋白:Ezrin和Lam

3、inA/C與上皮性卵巢癌侵襲轉(zhuǎn)移高度相關(guān),推測ⅦGF可能通過直接或間接調(diào)控二者,參與卵巢癌侵襲轉(zhuǎn)移。同時利用生物信息學(xué)方法預(yù)測miR.205在Ezfin和Lamin~C的3'UTR均有結(jié)合位點。進一步通過miRNA基因芯片檢測VEGF誘導(dǎo)后HO.8910的miRNA表達譜,發(fā)現(xiàn)其miR.205表達上調(diào)。由此推測,ⅦGF可能部分通過miR.205調(diào)節(jié)Ezfin和LaminA/C的表達實現(xiàn)調(diào)控卵巢癌侵襲和轉(zhuǎn)移。目的進一步探討VEGF、miR-205及其靶蛋白Ezrin、Lamin~C在卵巢癌組織中的表達及意義。方法采用ELISA檢測上皮性卵巢癌及健康志愿者血清中VEGF的含量;采用免疫組

4、化檢測上皮性卵巢癌組織、卵巢良性腫瘤組織和正常卵巢組織中血管內(nèi)皮生長因子受體1(vascularendothelialgrowthfactorreceptorl,VEGFR.1)、VEGFR-2、Ezrin、LaminA/C蛋白的表達情況和CD31所標(biāo)記的MVD(micro.vesseldensity);采用免疫細(xì)胞化學(xué)技術(shù)檢測VEGFR.1和VEGFR.2在四株細(xì)胞中的表達情況;采用熒光定量PCR方法檢測上皮性卵巢癌組織、卵巢良性腫瘤組織和正常卵巢組織中miR-205、Ezrin和LaminA/C的相對表達量。結(jié)果(1)ELISA檢測VEGF在上皮性卵巢癌患者血清中的表達水平(10

5、1.48士19.44)高于在健康志愿者血清中的表達水平(30.69士3.13),且差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05);(2)免疫組化結(jié)果顯示:IIⅦGFR.1、VEGFR-2在上皮性卵巢癌組織中的陽性表達率分別為75.9%31191.4%,高于卵巢良性腫瘤組織和正常卵巢組織中的陽性表達率(P<0.05),且差異具有統(tǒng)計學(xué)意義;VEGFR.1和VEGFR-2在卵巢良性腫瘤組織和正常卵巢組織中的表達差異無統(tǒng)計學(xué)意義(胗O.05);(3)免疫細(xì)胞化學(xué)顯示:VEGFR.1和VEGFR.2在四株卵巢癌細(xì)胞株中呈強陽性表達;(4)MVD在上皮性卵巢癌組織中的平均計數(shù)(7.56士O.508)高于在

6、正常卵巢組織中的平均計數(shù)(1.224-0.556),差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05);在上皮性卵巢癌組織中的平均計數(shù)(7.564-0.508)高于在卵巢良性腫瘤組織的MVD平均計數(shù)(0.74-0.389),差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(氏0.05)。MVD在卵巢良性腫瘤組織和正常卵巢組織中的表達差異無統(tǒng)計學(xué)意義(胗0.05);(5)Ezrin蛋白和LaminA/C蛋白在上皮性卵巢癌組織中的陽性表達率分別為51.7%和60.3%,低于卵巢良性腫瘤組織和正常卵巢組織中的陽性表達率,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(尸<0.05),但兩者分別在卵巢良性腫瘤組織和正常卵巢組織中的表達差異無統(tǒng)計學(xué)意義(胗0.05)

7、.(6)熒光定量PCR結(jié)果顯示:miR.205在上皮性卵巢癌中的相對表達量高于在正常卵巢組織中的相對表達量,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義伊<0.05);miR-205在上皮性卵巢癌組織中的相對表達量高于在卵巢良性腫瘤組織中的相對表達量,但差異無統(tǒng)計學(xué)意義(胗0.05)。Ezrin和LaminA/CmRNA在上皮性卵巢癌組織中的相對表達量低于在正常卵巢組織中的相對表達量,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義儼<0.05);Ezrin和LaminA/CmRNA在上皮性卵巢癌組織中的相對表

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