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《KLD-12多肽_rhBMP-2纖維凝膠復(fù)合BMSCs誘導(dǎo)異位成骨的實(shí)驗(yàn)研究.pdf》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫(kù)。
1、分類號(hào)：密級(jí)：學(xué)號(hào)：2015202114單位代碼：10759石河子大學(xué)碩士學(xué)位論文KLD-12多肽/rhBMP-2纖維凝膠復(fù)合BMSCs誘導(dǎo)異位成骨的實(shí)驗(yàn)研究學(xué)位申請(qǐng)人杜龑指導(dǎo)教師孫建華申請(qǐng)學(xué)位門類級(jí)別醫(yī)學(xué)碩士學(xué)科、專業(yè)名稱外科學(xué)研究方向脊柱外科所在學(xué)院醫(yī)學(xué)院中國(guó)·新疆·石河子2018年5月ExperimentalstudyofinduceingectopicossificationofKLD-12polypeptide/rhBMP-2nanofibergelcombinewithBoneMar
2、rowMesenchymalStemCellsADissertationSubmittedtoShiheziUniversityInPartialFulfillmentoftheRequirementsfortheDegreeofMasterofMedicineByDuYan(SpineSurgery)Supervisor:SunJianhuaMay,2018摘要目的：探討KLD-12多肽/重組人類骨形態(tài)發(fā)生蛋白-2（recombinanthumanbonemorphogeneticprotei
3、n2，rhBMP-2）纖維凝膠復(fù)合兔BMSCs在兔臀肌內(nèi)的成骨效果。方法：取6月齡新西蘭大白兔48只，體重3.0-3.5kg，雌雄不限，密度梯度法分離培養(yǎng)兔BMSCs，隨機(jī)分為A、B、C、D4組，每組12只。A組（實(shí)驗(yàn)組）：兔臀肌植入KLD-12多肽/rhBMP-2/BMSCs凝膠；B組（陽(yáng)性對(duì)照組）：臀肌內(nèi)植入KLD-12多肽/rhBMP-2凝膠；C組（陽(yáng)性對(duì)照組）：臀肌內(nèi)植入rhBMP-2；D組（陰性對(duì)照組）：臀肌內(nèi)植入KLD-12凝膠。分別于術(shù)后4周、8周、12周行X線、Micro-CT、
4、大體觀察、組織形態(tài)學(xué)染色、堿性磷酸酶（ALP）活性檢測(cè)。結(jié)果：（1）X線：A、B、C三組在植入后4周，兔臀肌均出現(xiàn)成骨表現(xiàn)，成骨區(qū)面積隨時(shí)間推移逐漸增大；D組：無成骨影像表現(xiàn)。（2）Micro-CT結(jié)果：骨塊形狀不規(guī)則，外層骨質(zhì)向骨塊中央部不規(guī)則延伸。隨時(shí)間推移，各組骨體積分?jǐn)?shù)、骨小梁數(shù)量、骨小梁厚度、組織骨密度逐漸增大。12周時(shí)，骨體積分?jǐn)?shù)BV/TV（%）：A組24.274±1.034、B組21.141±0.998、C組20.163±1.096；骨小梁數(shù)量TB.N（個(gè)/mm3）：A組6.869
5、±0.247、B組5.616±0.232、C組5.098±0.199；組織骨密度TMD(mg/cm3)：A組409.363±12.933、B組370.366±9.733、C組350.396±13.379；骨小梁厚度Tb.Th(mm)：A組0.104±0.006、B組0.092±0.004、C組0.083±0.005，以上Micro-CT各指標(biāo)測(cè)得的數(shù)據(jù)，A組與B組相比、A組與C組相比、A組與B、C兩組相比，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）（3）大體標(biāo)本觀察：4周時(shí)：A、B、C三組可見鈣化結(jié)節(jié)，
6、鉗夾硬度均較低；8周、12周時(shí)：A、B、C三組骨組織硬度均較高；D組：未發(fā)現(xiàn)骨組織（4）HE染色：100×，第4周時(shí)：A組可見編織骨和類骨質(zhì)，B組可見少量形成的骨小梁，C組可見少量編織骨和類骨質(zhì)；8周時(shí)：A組可見較成熟板層骨及少許編織骨，B組可見大量編織骨，C組可見少量成熟板層骨及大量編織骨；12周時(shí)：A、B兩組為較成熟骨組織，C組為較成熟骨組織和少量編織骨。（5）姬姆薩染色（Giemsa染色）：4周時(shí)：A組可見少量的深藍(lán)色的成熟骨組織，B組可見較多量湖藍(lán)色類骨質(zhì)，C組可見淺藍(lán)色新礦化骨；8周時(shí)
7、：A組可見較多量深藍(lán)色成熟骨組織，B組可見少量深藍(lán)色成熟骨組織，C組可見少量深藍(lán)色成熟骨組織，并見較多量的淺藍(lán)色新礦化骨；12周時(shí)：A組可見大量深藍(lán)色成熟骨組織，B組可見較多量深藍(lán)色成熟骨組織，C組可見深藍(lán)色成熟骨組織和淺藍(lán)色新礦化骨。（6）ALP活性（金氏單位/gprot）：12周時(shí)：A組20.236±0.351、B組17.697±0.533、C組16.981±0.246，A組與B組相比、A組與C組相比、A組與B、C兩組相比，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。結(jié)論：KLD-12多肽/rhBM
8、P-2凝膠復(fù)合BMSCs在臀肌內(nèi)成骨活性良好，在KLD-12多肽凝膠內(nèi)，BMSCs與rhBMP-2可以相互促進(jìn)成骨活性?！娟P(guān)鍵詞】KLD-12多肽；rhBMP-2；骨組織工程；異位成骨IAbstractObjective:ToinvestigatetheectopicosteogenicactivityofKLD-12polypeptide/recombinanthumanbonemorphogeneticprotein-2(rhBMP-2)nanofibergelcombinewithbone
