磷酸化akt在乳腺癌組織中的表達(dá)及其對淋巴轉(zhuǎn)移的作用

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1、圓碩士學(xué)位論文《IIIIIllllIlllIIWF2809072論文題目：磷酸化AKT在乳腺癌組織中的表達(dá)及其對淋巴轉(zhuǎn)移的作用作者姓名：胡瀟方學(xué)科、專業(yè)：外科學(xué)學(xué)位類型：科學(xué)學(xué)位型研究方向：普外科指導(dǎo)教師：李湘奇教授入學(xué)時問：2010年9月論文工作起止時間：2012年1月-2013年4月目錄中文摘要??????????????????????????????????n1英文摘要?????????????????????????????????·2符號說明????????????????????????????????????????????·5盲茸言????????????????

2、???????????????????????”．----------------"6日Ⅱ舌???????????????????????????????????????”材料與方法????????????????????????????????·1l結(jié)果?????????????????????????????????????????????·13討論?????????????????????????????????????????????·19結(jié)論?????????????????????????????????????????????·29附表????????????????

3、?????????????????????????????·41參考文獻(xiàn)?????????????????????????????????3l綜j苤?????????????????????????????????????????????·33致謝?????????????????????????????????????????????43原創(chuàng)性聲明????????????????????????????????44磷酸化AKT在乳腺癌組織中的表達(dá)及其對淋巴轉(zhuǎn)移的作用研究生：專業(yè)：胡瀟方外科學(xué)導(dǎo)師：李湘奇教授中文摘要目的在女性的惡性腫瘤中，乳腺癌占據(jù)著重要首發(fā)地位，乳腺癌淋巴轉(zhuǎn)移，

4、是最常見的轉(zhuǎn)移途徑，是決定乳腺癌分期和選擇治療方案最關(guān)鍵的因素之一。因此在乳腺癌的診斷與治療過程中，如何能夠早期檢測和控制淋巴轉(zhuǎn)移則就成為了乳腺癌防治的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。目前研究己發(fā)現(xiàn)，磷脂酰肌醇3．激酶／絲蘇氨酸蛋白激酶(P13K／AKT)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路在腫瘤發(fā)生發(fā)展中起著關(guān)鍵作用，其中AKT，也被稱為蛋白激酶B(proteinkinaseB，PKB)，是胞內(nèi)關(guān)鍵的效應(yīng)蛋白，AKT的磷酸化在乳腺癌的發(fā)生、發(fā)展，浸潤轉(zhuǎn)移中起著非常重要的作用。抑癌因子PTEN是目前研究最多的一個P13K／AKT信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的一個逆向調(diào)控因子，PTEN具有雙重磷酸酶活性，通過PIP3調(diào)節(jié)包括AKT在內(nèi)的許多下游

5、信號蛋白，抑制腫瘤的發(fā)生，發(fā)展。血管內(nèi)皮生長因子C(vascularen．dothelialgrowthfactor—C，VEGF—C)是目前研究最廣泛的促淋巴管生成因子，它能夠誘導(dǎo)腫瘤的淋巴管生成和淋巴道轉(zhuǎn)移，在淋巴道轉(zhuǎn)移過程中起著至關(guān)重要的作用，乳腺癌的淋巴轉(zhuǎn)移中可能存在P13K／AKT／VEGF—C信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路。本研究旨在探討P13K／AKT信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路與乳腺癌淋巴轉(zhuǎn)移的關(guān)系，進(jìn)一步闡明乳腺癌淋巴轉(zhuǎn)移的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)機制，有可能會成為抑制乳腺癌淋巴轉(zhuǎn)移的一個新靶點。材料和方法收集2011年7月至2012年l2月，泰山醫(yī)學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院普外科乳腺癌手術(shù)標(biāo)本60例，以乳腺癌石蠟標(biāo)本和新

6、鮮標(biāo)本為研究對象，采用免疫組織化學(xué)法、Western—blot檢測與乳腺癌淋巴管生成及轉(zhuǎn)移的相關(guān)調(diào)控因子VEGF．C、以及P-AKT(Thr308)、P-AKT(Ser473)和抑癌因子PTEN蛋白水平的表達(dá)；RT-PCR實驗技術(shù)檢測標(biāo)本VEGF．C、P—AKT、PTEN基因水平的表達(dá)，分析AKT磷酸化與淋巴管生長因子、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的關(guān)系。160例乳腺癌組織標(biāo)本，石蠟包埋，切片厚4I．tmm，免疫組化法檢測VEGF．C、以及P-AKT(Thr308)、P-AKT(Ser473)和抑癌因子PTEN蛋白水平的表達(dá)。2選取乳腺浸潤性導(dǎo)管癌新鮮標(biāo)本20例，Western．blot檢測VEGF

7、—C、P-AKT(Thr308)、P-AKT(Ser473)和抑癌因子PTEN蛋白水平的表達(dá)。3選取乳腺浸潤性導(dǎo)管癌新鮮標(biāo)本20例，RT-PCR實驗技術(shù)檢測標(biāo)本VEGF．C及AKT、PTEN基因水平的表達(dá)。4實驗所有數(shù)據(jù)均采用SPSSl3．0統(tǒng)計軟件進(jìn)行分析。根據(jù)資料類型和統(tǒng)計目的不同分別做四格表)C2檢驗，行×列表)C2檢驗，Spearman相關(guān)分析，兩個獨立樣本檢驗。P<0．05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。分析PTEN對P13K／AKT信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的作用，磷酸化AKT對乳