微環(huán)境誘導ipscs和bmscs向神經元樣細胞分化-reelin對細胞分化和極性化的調節(jié)作用

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2、nmentsinducingiPSCsandBMSCsintoneuron-likecells--Reelin’sregulativeroleoncelldifferentiationandpolarizationADissertationSubmittedtotheGraduateSchoolofHenanUniversityinPartialFulfillmentoftheRequirementsfortheDegreeofMasterofMedicineByFuSuSupervisor:Prof.

3、DengJinboApril,2015關于學位論文獨創(chuàng)聲明和學術誠信承諾本人向河南大學提出碩士學位申請。本人鄭重聲明：所呈交的學位論文是本人在導師的指導下獨立完成的，對所研究的課題有新的見解。據(jù)我所知，除文中特別加以說明、標注和致謝的地方外，論文中不包括其他人已經發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不包括其他人為獲得任何教育、科研機構的學位或證書而使用過的材料。與我一同工作的同事對本研究所做的任何貢獻均已在論文中作了明確的說明并表示了謝意。在此本人鄭重承諾：所呈交的學位論文不存在舞弊作偽行為，文責自負。學位申請人

4、（學位論文作者）簽名：201年月日關于學位論文著作權使用授權書本人經河南大學審核批準授予碩士學位。作為學位論文的作者，本人完全了解并同意河南大學有關保留、使用學位論文的要求，即河南大學有權向國家圖書館、科研信息機構、數(shù)據(jù)收集機構和本校圖書館等提供學位論文（紙質文本和電子文本）以供公眾檢索、查閱。本人授權河南大學出于宣揚、展覽學校學術發(fā)展和進行學術交流等目的，可以采取影印、縮印、掃描和拷貝等復制手段保存、匯編學位論文（紙質文本和電子文本）。（涉及保密內容的學位論文在解密后適用本授權書）學位獲得者（學位論文

5、作者）簽名：201年月日學位論文指導教師簽名：201年月日摘要目的：研究小鼠誘導性多能干細胞（inducedpluripotentstemcells,iPSCs）和小鼠骨髓間充質干細胞（Bonemarrowmesenchymalstemcells，BMSCs）在大腦微環(huán)境的誘導下向神經元樣細胞分化的過程；尤其是探討細胞極性的關鍵分子Reelin蛋白對干細胞分化的影響。方法：將iPSCs和BMSCs分別與WT和Reelin缺失小鼠（reeler小鼠）的海馬腦片以及兩種小鼠的腦勻漿上清共培養(yǎng)，觀察二者在腦片

6、微環(huán)境下的細胞分化和極性化改變，揭示Reelin蛋白對細胞分化和極性化的影響。結果：與WT和Reeler小鼠腦片共培養(yǎng)的iPSCs和BMSCs均出現(xiàn)神經元樣細胞的分化。二者在WT小鼠海馬腦片呈雙C字型海馬片層化分布，同時表現(xiàn)出很強的方位性；而與reeler小鼠海馬腦片共培養(yǎng)的細胞分布則無明顯規(guī)律性，呈均勻分布。此外，與腦勻漿上清培養(yǎng)基共培養(yǎng)的iPSCs和BMSCs，在共培養(yǎng)72小時后，部分類神經元樣細胞可以被神經干細胞標記物（Nestin）和神經元特異標記物（NeuN）所標記，表明他們可以分化成為功能性

7、神經元。且在共培養(yǎng)初期reeler微環(huán)境培養(yǎng)基中神經元分化和突起生長相對滯后。結論：在大腦微環(huán)境的誘導下，iPSCs和BMSCs可以向神經元樣細胞，甚至功能性神經元分化，Reelin蛋白參與了細胞極性化過程，Reelin缺乏可造成神經細胞極性紊亂，并對神經元分化及突起生長有一定影響。關鍵詞：誘導多能干細胞，骨髓間充質干細胞，Reelin蛋白，大腦微環(huán)境，細胞分化，細胞極性化IABSTRACTObjective:Thepresentstudyaimstoinvestigatehowtheinducedpl

8、uripotentstemcells(iPSCs)andbonemarrowmesenchymalstemcells(BMSCs)differentiateintoneuron-likecellsundertheinductionofhippocampalmicroenvironmentsandReelin’sregulation.Methods:iPSCsorBMSCswereco-culturedwithWT(wildtype)orga