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《狗舌草總黃酮的提取及抗腫瘤作用研究》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、摘要1摘要通過對狗舌草總黃酮的提取分離、定性、定量及毒性試驗，對狗舌草總黃酮進行了系統(tǒng)的分析，并就其抗腫瘤活性進行評價。1.狗舌草總黃酮的提取利用冷浸法和熱回流法從狗舌草粉中提取出總黃酮。狗舌草熱回流浸膏的得率明顯高于冷浸法，但其總黃酮得率卻低于冷浸法。本試驗采用冷浸法提取狗舌草中總黃酮。2.狗舌草總黃酮定性試驗結(jié)合濾紙顯色反應(yīng)和薄層色譜檢測結(jié)果，推斷狗舌草總黃酮中主要含有黃酮類、黃酮醇類、二氫黃酮醇類和異黃酮類等，結(jié)構(gòu)可能主要含有無5-OH黃酮類、5-OH,4'-OH黃酮類、5-OH,4'-OH,3-OR黃酮醇類、4‘一羚基黃酮醇或7,4'一二羚基黃酮醇等。
2、3.狗舌草總黃酮定量試驗以蘆丁為標樣，蒸餾水為空白參比對照，在波長510nm處進行比色測定狗舌草中總黃酮為5.711，為下一步的研究提供基本的理論指導(dǎo)。4.狗舌草總黃酮LDsa測定通過改良寇氏法，用腹腔注射給藥測定狗舌草總黃酮對KM雌性小鼠的LDS。值為1392.52士94.62mg.kg1，其毒性明顯低于狗舌草60%乙醇提取物L(fēng)D5o(791.22士170.17mg-kg-1)及狗舌草屬植物中可能含有的生物堿單體LD5o，屬于低毒范圍，因此可推斷臨床上狗舌草中毒主要由其中所含的雙稠毗咯吮生物堿類物質(zhì)引起，而與其中所含的黃酮類化合物相關(guān)性不大。其中所含的黃酮類
3、化合物可能與狗舌草的抗癌活性有關(guān)。5.狗舌草總黃酮對三種腫瘤細胞的作用通過MTT比色法測定狗舌草總黃酮對L121o"Hep-G2和HCC細胞的抑制率(IR)。狗舌草總黃酮對三種腫瘤細胞的IR均隨濃度升高而增高，說明其生長抑制率和濃度正相關(guān)。不同濃度狗舌草總黃酮對Hep-G2的IR最小，為不敏感;100.011g-ml"1狗舌草總黃酮對HCC的IR為中度敏感，其余不同濃度均為不敏感;10.0ag-ml-1和100.011g-ml"狗舌草總黃酮對淋巴性白血病細胞L121。的IR分別為中度敏感和高度敏感，其中半數(shù)致死濃度ICS。為7.75611g-ml"1e說明狗舌
4、草總黃酮對L121o有一定抑制作用，對肝癌細胞HCC及Hep-G2作用不明顯。6.狗舌草總黃酮對L21o細胞的體外作用研究由細胞生長曲線和mPDT測定結(jié)果表明，當(dāng)狗舌草總黃酮濃度為10.0ug-ml-，時，L121o細胞的生長緩慢，mPDT極顯著增加(P<0.01)。當(dāng)狗舌草總黃酮濃度為100.011g-ml-!時，表現(xiàn)出較強的細胞毒性，使L121。細胞生長基本停滯。臺盼藍拒染率結(jié)果表明，不同濃度狗舌草總黃酮均可顯著抑制L121。細胞的活性，且隨著劑量的增加活細胞率減少。其中10.0和100.0tog-MI"I的狗舌草總黃酮可顯著抑制Li2i。細胞活性護<0.
5、01)。說明狗舌草總黃酮能夠抑制L1210細胞活性，且該作用具有劑量依賴性。狗舌草總黃酮還可使細胞形態(tài)有變圓、聚集傾向，隨著劑量的增加，L121。細胞數(shù)量明顯減少，聚集現(xiàn)象加劇，有大量的細胞碎ii西北農(nóng)林科技大學(xué)2003屆碩士學(xué)位論文:狗舌草總黃酮的提取及抗腫瘤作用研究片出現(xiàn)。流式細胞術(shù)檢測，10.0gg-ml"i狗舌草總黃酮(TF)引起S期L121。細胞數(shù)目顯著增加，引起S-G2阻滯，出現(xiàn)S期的細胞不能正常向q期發(fā)展，從而阻斷了細胞周期的正常發(fā)展。狗舌草總黃酮(TF)可能具有促進DNA斷裂，激活了腫瘤細胞chk活性，加快已受損的腫瘤細胞的分裂速度，使損傷大量
6、積累，導(dǎo)致細胞死亡的抗癌機理。關(guān)鍵詞:狗舌草總黃酮定性試驗定量試驗LD,,玩to細胞杭腫瘤活性摘要一一一—一一—目—一一一~—一71竺一一一2C一一——一—一止于上一ABSTRACTThesystematicanalysisandanti-tumoractivitywereachievedthroughtheextraction,determinant,quantitativeandtoxictestonthetotalflavonoids(TF)fromTephroseriskirilowii(Turcz.)Holub1.Theextractionofthe
7、totalflavonoids仃瑪fromT.kirilowiiThetotalflavonoids(TF)wereextractedbycoolandhotmethanolmethodsfrompowderofT.kirilowil.Theextractionrateofgumfromthehotmethanolmethodwashigherthanthecoolleachmethod,butthecontentofthetotalflavonoidswaslower.Thecoolleachmethodwasappliedintheexperiment.2
8、.Thedeterminanttest
