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《狗舌草總黃酮的提取及抗腫瘤作用研究》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、摘要1摘要通過對(duì)狗舌草總黃酮的提取分離、定性、定量及毒性試驗(yàn)，對(duì)狗舌草總黃酮進(jìn)行了系統(tǒng)的分析，并就其抗腫瘤活性進(jìn)行評(píng)價(jià)。1.狗舌草總黃酮的提取利用冷浸法和熱回流法從狗舌草粉中提取出總黃酮。狗舌草熱回流浸膏的得率明顯高于冷浸法，但其總黃酮得率卻低于冷浸法。本試驗(yàn)采用冷浸法提取狗舌草中總黃酮。2.狗舌草總黃酮定性試驗(yàn)結(jié)合濾紙顯色反應(yīng)和薄層色譜檢測(cè)結(jié)果，推斷狗舌草總黃酮中主要含有黃酮類、黃酮醇類、二氫黃酮醇類和異黃酮類等，結(jié)構(gòu)可能主要含有無5-OH黃酮類、5-OH,4'-OH黃酮類、5-OH,4'-OH,3-OR黃酮醇類、4‘一羚基黃酮醇或7,4'一二羚基黃酮醇等。
2、3.狗舌草總黃酮定量試驗(yàn)以蘆丁為標(biāo)樣，蒸餾水為空白參比對(duì)照，在波長(zhǎng)510nm處進(jìn)行比色測(cè)定狗舌草中總黃酮為5.711，為下一步的研究提供基本的理論指導(dǎo)。4.狗舌草總黃酮LDsa測(cè)定通過改良寇氏法，用腹腔注射給藥測(cè)定狗舌草總黃酮對(duì)KM雌性小鼠的LDS。值為1392.52士94.62mg.kg1，其毒性明顯低于狗舌草60%乙醇提取物L(fēng)D5o(791.22士170.17mg-kg-1)及狗舌草屬植物中可能含有的生物堿單體LD5o，屬于低毒范圍，因此可推斷臨床上狗舌草中毒主要由其中所含的雙稠毗咯吮生物堿類物質(zhì)引起，而與其中所含的黃酮類化合物相關(guān)性不大。其中所含的黃酮類
3、化合物可能與狗舌草的抗癌活性有關(guān)。5.狗舌草總黃酮對(duì)三種腫瘤細(xì)胞的作用通過MTT比色法測(cè)定狗舌草總黃酮對(duì)L121o"Hep-G2和HCC細(xì)胞的抑制率(IR)。狗舌草總黃酮對(duì)三種腫瘤細(xì)胞的IR均隨濃度升高而增高，說明其生長(zhǎng)抑制率和濃度正相關(guān)。不同濃度狗舌草總黃酮對(duì)Hep-G2的IR最小，為不敏感;100.011g-ml"1狗舌草總黃酮對(duì)HCC的IR為中度敏感，其余不同濃度均為不敏感;10.0ag-ml-1和100.011g-ml"狗舌草總黃酮對(duì)淋巴性白血病細(xì)胞L121。的IR分別為中度敏感和高度敏感，其中半數(shù)致死濃度ICS。為7.75611g-ml"1e說明狗舌
4、草總黃酮對(duì)L121o有一定抑制作用，對(duì)肝癌細(xì)胞HCC及Hep-G2作用不明顯。6.狗舌草總黃酮對(duì)L21o細(xì)胞的體外作用研究由細(xì)胞生長(zhǎng)曲線和mPDT測(cè)定結(jié)果表明，當(dāng)狗舌草總黃酮濃度為10.0ug-ml-，時(shí)，L121o細(xì)胞的生長(zhǎng)緩慢，mPDT極顯著增加(P<0.01)。當(dāng)狗舌草總黃酮濃度為100.011g-ml-!時(shí)，表現(xiàn)出較強(qiáng)的細(xì)胞毒性，使L121。細(xì)胞生長(zhǎng)基本停滯。臺(tái)盼藍(lán)拒染率結(jié)果表明，不同濃度狗舌草總黃酮均可顯著抑制L121。細(xì)胞的活性，且隨著劑量的增加活細(xì)胞率減少。其中10.0和100.0tog-MI"I的狗舌草總黃酮可顯著抑制Li2i。細(xì)胞活性護(hù)<0.
5、01)。說明狗舌草總黃酮能夠抑制L1210細(xì)胞活性，且該作用具有劑量依賴性。狗舌草總黃酮還可使細(xì)胞形態(tài)有變圓、聚集傾向，隨著劑量的增加，L121。細(xì)胞數(shù)量明顯減少，聚集現(xiàn)象加劇，有大量的細(xì)胞碎ii西北農(nóng)林科技大學(xué)2003屆碩士學(xué)位論文:狗舌草總黃酮的提取及抗腫瘤作用研究片出現(xiàn)。流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)，10.0gg-ml"i狗舌草總黃酮(TF)引起S期L121。細(xì)胞數(shù)目顯著增加，引起S-G2阻滯，出現(xiàn)S期的細(xì)胞不能正常向q期發(fā)展，從而阻斷了細(xì)胞周期的正常發(fā)展。狗舌草總黃酮(TF)可能具有促進(jìn)DNA斷裂，激活了腫瘤細(xì)胞chk活性，加快已受損的腫瘤細(xì)胞的分裂速度，使損傷大量
6、積累，導(dǎo)致細(xì)胞死亡的抗癌機(jī)理。關(guān)鍵詞:狗舌草總黃酮定性試驗(yàn)定量試驗(yàn)LD,,玩to細(xì)胞杭腫瘤活性摘要一一一—一一—目—一一一~—一71竺一一一2C一一——一—一止于上一ABSTRACTThesystematicanalysisandanti-tumoractivitywereachievedthroughtheextraction,determinant,quantitativeandtoxictestonthetotalflavonoids(TF)fromTephroseriskirilowii(Turcz.)Holub1.Theextractionofthe
7、totalflavonoids仃瑪fromT.kirilowiiThetotalflavonoids(TF)wereextractedbycoolandhotmethanolmethodsfrompowderofT.kirilowil.Theextractionrateofgumfromthehotmethanolmethodwashigherthanthecoolleachmethod,butthecontentofthetotalflavonoidswaslower.Thecoolleachmethodwasappliedintheexperiment.2
8、.Thedeterminanttest
