不同氮源對北冬蟲夏草生長影響的研究

不同氮源對北冬蟲夏草生長影響的研究

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1、第26卷第3期佛山科學(xué)技術(shù)學(xué)院學(xué)報(自然科學(xué)版)Vol.26No.32008年5月JournalofFoshanUniversity(NaturalScienceEdition)May2008文章編號:100820171(2008)0320052203不同氮源對北冬蟲夏草生長影響的研究楊宣華(佛山市華材職業(yè)技術(shù)學(xué)校,廣東佛山528251)摘要:以硝酸鉀、蛋白胨、黃豆粉、硫酸銨、尿素5種不同氮源對北冬蟲夏草的菌球數(shù)量、干重,菌絲生長狀況及子實體的鮮重和干重進(jìn)行研究,結(jié)果表明:液體培養(yǎng)的菌球最多的是蛋白胨,其次是黃豆粉,最差是硝酸鉀;固體斜面培養(yǎng)基從菌絲長勢來看最好是蛋白胨,最差的是

2、硝酸鉀。北冬蟲夏草最佳的氮源是黃豆粉。關(guān)鍵詞:北冬蟲夏草;氮源;生長中圖分類號:S567.3文獻(xiàn)標(biāo)識碼:A[1]北冬蟲夏草(CordycepsmilitarisLink)又名蛹蟲草,是一種具有廣闊開發(fā)前景的珍稀藥用保健食品,也是我國名貴中藥之一,其所含藥用成分蟲草酸、蟲草素、蟲草多糖和SOD可與冬蟲夏草相媲美,特[2]別是其所含的活性成分蟲草酸和蟲草素明顯高于冬蟲夏草。據(jù)報道,北冬蟲夏草具有重要的滋補(bǔ)價[3]值,對慢性支氣管炎、肝炎、高血壓、心臟病、腎炎、癌癥以及消除疲勞、緊張等有顯著治療和預(yù)防作用。近十年來,對北冬蟲夏草的研究有很大進(jìn)步。我們采用液體深層培養(yǎng)和固體培養(yǎng)的方法對北

3、冬蟲夏草生物特性方面做了一系列研究。1材料與方法1.1供試菌種北冬蟲夏草母種由山東省濟(jì)寧光大食用菌研究中心提供,華材職業(yè)技術(shù)學(xué)校進(jìn)行提純復(fù)狀與保存。1.2菌種活化采用PDA培養(yǎng)基,接入保存菌種,置于22℃恒溫生化培養(yǎng)箱培養(yǎng),8~10d菌絲滿后備用。1.3試驗配方(1)液體培養(yǎng)基配方。馬玲薯200g,葡萄糖200g,KH2PO43g,MgSO41g,VitB120片,微量元素少許,馬玲薯汁液1000mL,pH值自然。(2)固體斜面培養(yǎng)基配方。在(1)的基礎(chǔ)上,增加瓊脂20g。(3)生產(chǎn)培養(yǎng)基配方。大米95%,葡萄糖1%,KH2PO40.3%,MgSO40.1%,VitB12%,微量

4、元素少許,料水比為1∶1.6,pH值自然。1.4試驗方法(1)以1000mL水加15g的蛋白胨比例進(jìn)行計算氮含量為標(biāo)準(zhǔn),在(1)配方中分別加入等量的硝酸鉀、蛋白胨、黃豆粉、硫酸銨、尿素,依次標(biāo)記為A,B,C,D,E5個處理,每個處理10瓶,重復(fù)10次,以沒有加氮源的為對照(CK)。分別裝于250mL的三角瓶中,每瓶裝120mL,在0.14Mpa壓力下126℃滅菌30min,冷卻后,無菌操作接入10%的備用菌種,22~23℃下,轉(zhuǎn)速120rpm振蕩培養(yǎng)10d,測定菌球數(shù)量與菌絲干重并記錄。菌球測定方法是在終止發(fā)酵后,分別取10個培養(yǎng)瓶測定菌球數(shù)量,重復(fù)10收稿日期:20082032

5、21作者簡介:楊宣華(19752),男,廣東佛山人,華材職業(yè)技術(shù)學(xué)校教師。第3期楊宣華:不同氮源對北冬蟲夏草生長影響的研究53次;菌絲體干重測定是用冷凍離心機(jī)8000rpm,離心10min,獲得北冬蟲夏草菌絲體,60℃下烘干恒重,計算100mL培養(yǎng)液里中菌絲干重(mg?100mL)。(2)以20g的蛋白胨中氮為標(biāo)準(zhǔn),在(2)配方中分別加入等量的硝酸鉀、蛋白胨、黃豆粉、硫酸銨、尿素,依次標(biāo)記為A,B,C,D,E5個處理,每個處理14支,重復(fù)10次,以沒有加氮源的為對照(CK)。分裝試管,每支裝試管1?3,塞好棉花塞,7支為1扎包好,在0.14Mpa壓力下126℃滅菌30min,冷卻

6、后,無菌操2作接入1cm的備用菌種,22~23℃下,觀察菌絲的生長速度和菌絲特征,并記錄。(3)以20g的蛋白胨中氮為標(biāo)準(zhǔn),在(3)配方中分別加入等量的硝酸鉀、蛋白胨、黃豆粉、硫酸銨、尿素,依次標(biāo)記為A,B,C,D,E5個處理,每個處理20瓶,重復(fù)10次,以沒有加氮源的為對照(CK)。分別裝于500mL的罐頭瓶中,在0.14Mpa壓力下126℃滅菌60min,冷卻后,無菌操作接入20mL的備用液體菌種,22~23℃下,觀察菌絲生長狀況、封底情況和子實體的鮮重和干重,并記錄。2結(jié)果與分析2.1不同氮源對北冬蟲夏草菌球數(shù)量的影響從表1可以看出,北冬蟲夏草對氮源的利用是比較廣泛的,氮源

7、能夠促進(jìn)菌絲的生長和菌球的形成。在試驗中,各氮源與對照之間存在明顯差異,以蛋白胨對菌球形成最好。表1不同氮源對北冬蟲夏草菌球數(shù)量的影響表2不同氮源對北冬蟲夏草菌球干重的影響平均菌球總數(shù)量菌球鮮重?菌球含水量?菌絲體干重?處理?(個·100mL-1)差異顯著性處理(mg·100mL-1)%(mg·100mL-1)A336dA2512.793.7158.3dB1004aB9198.692.8662.3bC989abC7876.191.2693.1aD613cD5251.392.439

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