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1、第六章植物組織培養(yǎng)脫毒技術(shù)全世界已發(fā)現(xiàn)植物病毒近700種。大多數(shù)農(nóng)作物，尤其是無性繁殖的家作物都受到一種或一種以上病毒侵染，且?guī)Ф局曷矢摺２《緦?duì)寄主植物可造成滅性危害，導(dǎo)致大幅度減產(chǎn)，甚至全株死亡。潛隱性病毒侵染植物造成癥狀不明顯的慢性危害，不易被發(fā)現(xiàn)，尤其危險(xiǎn)。受病毒侵染的植物全身終生帶毒，目前尚無藥物可治愈。國內(nèi)外解決這一問題的有效途徑是培育無病毒苗，實(shí)施農(nóng)作物無病毒化栽培。第一節(jié)常見植物病毒及其癥狀一種病毒可侵染許多植物，而同種植物又可被許多病毒侵染。植物病毒對(duì)農(nóng)作物的危害可使農(nóng)業(yè)生產(chǎn)受到巨大的損失。在一年生種子繁殖作物上，可以采取一些預(yù)防措施，減輕當(dāng)年病害的
2、發(fā)生程度，一般不影響下一季的發(fā)病。木本植物一旦發(fā)病，以后連年都發(fā)病。營養(yǎng)繁殖的作物如馬鈴薯，番木瓜，草莓等，連年種植可以積累多種病毒侵染。馬鈴薯的退化，就是由多種病毒引起的。一、植物病毒的發(fā)現(xiàn)很多植物體內(nèi)都帶有植物病毒，由于人類視覺所限，形體越小的生物就越不易被發(fā)現(xiàn)，所以病毒的發(fā)現(xiàn)比其它生物要晚得多。直到19世紀(jì)末期，德國的A．Mayer發(fā)現(xiàn)煙草上出現(xiàn)深淺相間的綠色條紋，稱之為煙草花葉病，并證實(shí)其具有傳染性；后經(jīng)俄國植物病理學(xué)家D．Ivanowski對(duì)煙草花葉病病原進(jìn)行研究，認(rèn)為它是由一種極小的“細(xì)菌”引起的；最終由荷蘭人M．W．Beijerinck首先提出煙草花葉
3、病病原是一種“傳染性的活性液體”或稱“病毒”。此后，許多學(xué)者陸續(xù)發(fā)現(xiàn)了各種植物病毒。1935年美國人Stanley和Bawden揭示了煙草花葉病毒的化學(xué)本質(zhì)不是純蛋白而是核蛋白；1940年德國的Kausche等首次在電鏡下視察到煙草花葉病毒的桿狀外形。由此，病毒研究進(jìn)入了更深入的領(lǐng)域。目前，人們不但能在實(shí)踐生產(chǎn)中有效地防治病毒的侵染，而且能利用病毒作為遺傳工程的載體改造植物。二、植物病毒的類型植物病毒大部分屬于單鏈RNA病毒，少數(shù)為DNA病毒。其基本形態(tài)有桿狀、絲狀和等軸對(duì)稱的近球形二十面體。植物病毒雖是嚴(yán)格的細(xì)胞內(nèi)寄生物，但專一性并不強(qiáng)，往往一種病毒可寄生在不同種
4、、屬甚至不同科的植物上。如煙草花葉病毒能侵染十多個(gè)科，200多種草本和木本植物。已知的植物病毒種類有600多種，絕大多數(shù)種子植物易發(fā)生病毒病。植物被病毒感染后，一般表現(xiàn)出三類癥狀：①因寄主細(xì)胞的葉綠素或葉綠體被破壞，使植物出現(xiàn)花葉或黃化病癥。②阻礙植株發(fā)育，使植株發(fā)生矮化、叢枝或畸形等。③殺死植物細(xì)胞使植株出現(xiàn)枯斑或壞死。三、植物病毒對(duì)植物的侵染途徑由于植物病毒一般無專門吸附結(jié)構(gòu)，而且植物細(xì)胞表面至今也未發(fā)現(xiàn)有病毒特異性受體部位，因而植物病毒的侵染途徑主要是通過傷口。如：①借昆蟲刺吸式口器損傷植物而侵入細(xì)胞。②借帶病汁液與植物傷口相接觸而侵入。③借人工嫁接時(shí)的傷口而
5、侵入。植物病毒侵入植物細(xì)胞后，病毒按其各自的核酸類型進(jìn)行復(fù)制。其增殖過程因病毒類型不同其細(xì)節(jié)也很不相同，但步驟大致相似。四、植物病毒病的防治目前防治植物病毒病的基本策略是：防重于治和綜合防治。一般采取以下措施：1、選育抗病品種選育病毒不能侵入或即使侵入也無法復(fù)制的抗病品種和對(duì)病毒感染有較強(qiáng)適應(yīng)性的耐病品種。2、消滅傳毒昆蟲利用化學(xué)農(nóng)藥、生物農(nóng)藥或物理誘捕等方法治蟲。3、用無性繁殖法培育無毒苗利用植物莖尖生長(zhǎng)點(diǎn)并結(jié)合熱處理（35～40℃）和組織培養(yǎng)的方法得到無毒苗。此法在防治馬鈴薯、葡萄、柑桔及某些觀賞植物的病毒病方面十分有效。4、接種弱毒株來保護(hù)植物這是一種“給莊稼
6、種牛痘”的方法。目前在許多國家已可用此法來預(yù)防蕃茄花葉病，用于其他植物病毒的弱毒株也在實(shí)驗(yàn)之中。5、采用合理的栽培措施等五、植物病毒的癥狀植物病毒引起植株的癥狀是各異的，在觀賞植物上由病毒引起外部癥狀主要有以下幾種：（1）變色：褪綠、黃化、花葉、斑駁、紅葉等，常見病毒有；香石竹斑駁病毒、黃瓜花葉病毒、芋花葉病毒等。（2）壞死：常見的壞死是病斑或斑點(diǎn)。有輪斑、環(huán)斑、條斑‘條紋等。如香石竹壞死斑點(diǎn)病毒、，鳳仙花壞死斑點(diǎn)病毒草等。（3）畸形：植株可出現(xiàn)矮縮、矮化或葉片皺縮、卷葉、蕨葉等病狀。（4）萎蔫：主要是指植物根或莖的維管束組織受到破壞而發(fā)生供水不足所出現(xiàn)的凋萎現(xiàn)象。
7、第二節(jié)脫毒材料的獲取目前在生產(chǎn)上常用的脫毒材料獲取方法主要有：熱處理脫毒、莖尖脫毒、抗病毒藥劑脫毒等。此外，也有人通過愈傷組織、花絲組培等方法獲取無毒植株。一、熱處理脫毒帶毒植株經(jīng)高溫處理后，病毒濃度會(huì)降低。通常處理方法是：把適當(dāng)?shù)牟牧弦迫胍粋€(gè)熱處理室或光照培養(yǎng)箱中，在35~40℃高溫下，根據(jù)種類特征和材料情況處理數(shù)天到數(shù)周不等。如香石竹在38℃連續(xù)處理2個(gè)月，消除了莖尖內(nèi)所有病毒。百合、郁金香、，風(fēng)信子等球根花卉，用休眠種球進(jìn)行熱處理，可大大降低種球生長(zhǎng)點(diǎn)內(nèi)的病毒含量。熱處理有一定的局限性，一方面熱處理只能降低植株內(nèi)病毒的含量，單獨(dú)處理難以獲得無毒材料；另一方
