高效液相色譜法測(cè)定辣椒中維生素C的含量

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1、2008年11月南京曉莊學(xué)院學(xué)報(bào)Nov.2008第6期JOURNALOFNANJINGXIAOZHUANGUNIVERSITYNo.6高效液相色譜法測(cè)定辣椒中維生素C的含量1211胡應(yīng)杰,潘康標(biāo),陳昌云,柳閩生(1.南京曉莊學(xué)院化學(xué)系,江蘇南京210017;2.江蘇省農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量檢驗(yàn)測(cè)試中心,江蘇南京210036)摘要:文章建立了一種高效液相色譜測(cè)定辣椒中維生素C含量的方法.采用0.1%的草酸作為提取劑,色譜中采用Hypersil2C18色譜柱,pH=6,0.05mol/L磷酸二氫鉀緩沖溶液:甲醇=95∶5(v/v)作流動(dòng)相.流速1.0ml/min,

2、DAD檢測(cè)器,檢測(cè)波長(zhǎng)254nm.維生素C在20—100mg/L內(nèi)有良好的線(xiàn)性關(guān)系,線(xiàn)性回歸方程為y=29.664x-12.37,相關(guān)系數(shù)為0.9953,方法回收率為91.24%-105.6%,相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差小于2%.本文測(cè)定方法簡(jiǎn)便,快速,能準(zhǔn)確測(cè)定辣椒中維生素C的含量.關(guān)鍵詞:辣椒;高效液相色譜;維生素C中圖分類(lèi)號(hào):O642文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A文章編號(hào):100927902(2008)06200302030引言1實(shí)驗(yàn)部分辣椒營(yíng)養(yǎng)價(jià)值很高,堪稱(chēng)“蔬菜之冠”,其富含1.1儀器與試劑維生素B、維生素C、蛋白質(zhì)、胡蘿卜素、鐵、磷、鈣,HP1100高效液相色譜儀配

3、有二極管陣列檢測(cè)以及糖等成分,尤其是維生素C的含量特別豐富,器(美國(guó)惠普公司);色譜柱Hypersil2C18(5μm,150居蔬菜中的前列.每百克辣椒中所含維生素C比茄mm×416mm)(中國(guó)科學(xué)院蘭州化學(xué)物理研究所);子多35倍,比西紅柿多9倍,比大白菜多3倍.KQ5200B型超聲波清洗器;AE系列電子天平(梅特維生素C又名抗壞血酸,是一類(lèi)水溶性的活性物勒2托利多儀器上海有限公司);組織搗碎機(jī),布氏漏質(zhì),有較強(qiáng)的還原作用,及重要的生理功能.維生素C斗,燒杯,25ml棕色容量瓶.維生素C標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照品[122]它廣泛存在于新鮮的水果、蔬菜中,人體本身

4、不能(維生素C含量99.17%,中國(guó)醫(yī)藥集團(tuán)化學(xué)試劑公合成,必須依靠膳食供給,因此研究水果蔬菜中維生司);2次蒸餾水;甲醇(色譜純,美國(guó)Fisher公司);素C的含量測(cè)定方法具有重要意義.維生素C測(cè)定草酸、鹽酸、磷酸二氫鉀、磷酸氫二鉀均為分析純;市的方法一般有化學(xué)法、比色法、紫外分光光度法、熒光售青椒、虎皮尖椒、甜椒、杭椒、小紅尖椒.[324]法等,這些方法所需試劑較多、操作繁瑣.高效液1.2樣品處理及實(shí)驗(yàn)條件[5][9]相色譜法具有高效、快速、穩(wěn)定、可靠等特點(diǎn).在所樣品處理采用國(guó)標(biāo)的方法:將辣椒洗凈,切開(kāi),放測(cè)樣品較多的情況下,借助儀器的分析方法

5、能更快更置于勻漿機(jī)中,加0.1%的草酸為提取劑,勻漿,然后用布準(zhǔn)確的進(jìn)1行含量的測(cè)定,且準(zhǔn)確性較高.近年來(lái)用氏漏斗過(guò)濾.稱(chēng)取5g樣品濾液于50mL容量瓶中,用高效液相色譜法測(cè)定維生素C含量已有一些報(bào)011%草酸溶液定容,分析前用0145μm濾膜過(guò)濾.[628]道,但用此方法測(cè)定幾種辣椒中的維生素C含量高效液相色譜的條件:A:pH=6,0.05mol/L磷尚未見(jiàn)報(bào)道.本文選擇五種常見(jiàn)辣椒,通過(guò)液相色譜酸二氫鉀,B:甲醇(A:B=95∶5v/v)為流動(dòng)相,流速分離條件優(yōu)化,建立了一種簡(jiǎn)便、快速、穩(wěn)定的辣椒中為1.0ml/min,檢測(cè)波長(zhǎng)254nm,進(jìn)樣

6、量10μl,柱溫各種維生素C含量測(cè)定方法.該方法同樣適合于其它20℃維生素C標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備:準(zhǔn)確稱(chēng)取維生素C水果和蔬菜中維生素C的含量測(cè)定.標(biāo)準(zhǔn)品50mg于小燒杯中,用0.1%的草酸溶解,攪收稿日期:2008206201修改日期:2008209201基金項(xiàng)目:南京曉莊學(xué)院院級(jí)科研項(xiàng)目(2006NXY18)作者簡(jiǎn)介:胡應(yīng)杰,男,南京曉莊學(xué)院化學(xué)系教師,碩士.—30—-1拌,轉(zhuǎn)移至50ml棕色容量瓶中,加水定容,得到維100mg·L維生素C標(biāo)準(zhǔn)溶液,定容至50ml,溶液生素C含量為1000μg/ml的標(biāo)準(zhǔn)溶液.用0.45μm濾膜過(guò)濾,用微量進(jìn)樣器進(jìn)樣1

7、0μL,依次測(cè)出峰面積.然后以維生素C標(biāo)準(zhǔn)溶液質(zhì)量濃度2結(jié)果與討論(mg/L)作自變量,相對(duì)應(yīng)的峰面積作因變量,繪制2.1維生素C提取劑的選擇標(biāo)準(zhǔn)工作曲線(xiàn),如圖1所示.標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的相關(guān)系數(shù)2維生素C溶液熱穩(wěn)定性較差,在中性或堿性水R=0.9953,說(shuō)明曲線(xiàn)的線(xiàn)性關(guān)系良好.溶液中易被氧化,但在酸性溶液中卻很穩(wěn)定.提取維[3,9,10]生素C的方法很多,為防止樣品及標(biāo)樣中維[8]生素C被氧化分解,用0.1%草酸溶液作溶劑來(lái)溶解樣品及標(biāo)樣.2.2流動(dòng)相的選擇考慮到維生素C在酸性環(huán)境中比較穩(wěn)定,選擇調(diào)節(jié)流動(dòng)相的pH值為酸性.經(jīng)過(guò)采用不同值的實(shí)驗(yàn)證明,pH值在

8、5.0～6.5之間,維生素C的吸收比較大,靈敏度比較高,因此本文選擇磷酸二氫鉀為流動(dòng)相,調(diào)節(jié)pH值為6.0[11].本文選