生理活動(dòng)活體染色

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1、CELLBIOLOGY細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)前確定實(shí)驗(yàn)用具、藥品是否齊全檢查實(shí)驗(yàn)用具是否清潔、無污染，這是實(shí)驗(yàn)成功的首要條件實(shí)驗(yàn)過程中盡量保持安靜多動(dòng)手多動(dòng)腦，不局限于要求的實(shí)驗(yàn)內(nèi)容實(shí)驗(yàn)結(jié)束后清理實(shí)驗(yàn)臺(tái)、清洗實(shí)驗(yàn)用具離開實(shí)驗(yàn)室前檢查實(shí)驗(yàn)用具是否齊全值日生清理實(shí)驗(yàn)臺(tái)、水池、地面實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)實(shí)驗(yàn)分組：自由組合，每組2-4人。值日分組：7組今天實(shí)驗(yàn)內(nèi)容細(xì)胞的滲透現(xiàn)象細(xì)胞生理活動(dòng)巨噬細(xì)胞吞噬動(dòng)、植物細(xì)胞的液泡系活體染色1.1細(xì)胞的滲透現(xiàn)象細(xì)胞內(nèi)外存在滲透壓差時(shí)水分子總是從滲透壓低處擴(kuò)散到滲透壓高處，這種現(xiàn)象稱為滲透。滲透作用是細(xì)胞膜的主要功能之一。細(xì)胞

2、膜是細(xì)胞與環(huán)境進(jìn)行物質(zhì)交換的選擇性屏障。細(xì)胞膜具有通透性,是半透膜。當(dāng)細(xì)胞處于低滲溶液中時(shí)，水分進(jìn)入細(xì)胞,可使細(xì)胞脹破.當(dāng)細(xì)胞處于高滲溶液中時(shí)，細(xì)胞失水，原生質(zhì)濃縮，細(xì)胞皺縮。實(shí)驗(yàn)原理細(xì)胞的滲透現(xiàn)象植物細(xì)胞與外界水溶液構(gòu)成的滲透系統(tǒng)細(xì)胞膜液泡質(zhì)液泡膜原生質(zhì)層質(zhì)壁分離:當(dāng)外界溶液濃度大于細(xì)胞液濃度時(shí)細(xì)胞失水發(fā)生收縮,由于細(xì)胞伸縮性小不能隨原生質(zhì)濃縮變形,細(xì)胞膜與細(xì)胞壁之間出現(xiàn)分離.質(zhì)壁分離的復(fù)原:當(dāng)外界溶液濃度小于細(xì)胞液濃度的時(shí)候，水可進(jìn)入細(xì)胞,使細(xì)胞恢復(fù)原來狀態(tài).實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備材料:洋蔥、家兔紅細(xì)胞懸液、1%雞紅細(xì)胞懸液、小白鼠儀器和器材:顯

3、微鏡、眼科剪子、眼科鑷子、載玻片、蓋玻片、吸水紙?jiān)噭?500U/ml肝素、0.4%1.2%和4%的氯化鈉水溶液、含有臺(tái)酚藍(lán)6%淀粉肉湯動(dòng)物細(xì)胞的滲透現(xiàn)象1.2%NaCl蓋片、觀察蓋片、觀察0.4%NaCl一滴兔紅細(xì)胞懸液一滴兔紅細(xì)胞懸液一滴兔紅細(xì)胞懸液蓋片、觀察實(shí)驗(yàn)操作植物細(xì)胞的滲透現(xiàn)象一小塊洋蔥表皮一滴清水蓋片、觀察蓋片、觀察一小塊洋蔥表皮4%NaCl取下蓋玻片，在一側(cè)滴清水，另一側(cè)吸出觀察質(zhì)壁分離復(fù)原1.2巨噬細(xì)胞的吞噬單核細(xì)胞：由骨髓生成，在血液內(nèi)僅生活3～4天，即進(jìn)入肝、脾、肺和淋巴等組織轉(zhuǎn)變?yōu)榫奘杉?xì)胞。變?yōu)榫奘杉?xì)胞后，體積加大

4、，溶酶體增多，吞噬和消化能力也增強(qiáng)。巨噬細(xì)胞吞噬對(duì)象：病毒、瘧原蟲和細(xì)菌等。巨噬細(xì)胞還參與激活淋巴細(xì)胞的特異免疫功能。巨噬細(xì)胞能夠識(shí)別和殺傷腫瘤細(xì)胞，清除衰老與損傷細(xì)胞實(shí)驗(yàn)原理白細(xì)胞機(jī)體的防御細(xì)胞粒細(xì)胞系單核細(xì)胞系淋巴細(xì)胞系巨噬細(xì)胞吞噬過程由于趨化作用向異物游走伸出偽足包繞異物內(nèi)吞作用將異物吞入細(xì)胞吞噬泡與溶酶體融合異物被消化實(shí)驗(yàn)操作實(shí)驗(yàn)前兩天每天向小白鼠腹腔注射淀粉肉湯（臺(tái)酚藍(lán)），實(shí)驗(yàn)前30分鐘腹腔注入1ml雞紅細(xì)胞懸液處死、剖開腹腔1ml生理鹽水?dāng)嚢枞「骨灰旱纹^察液泡系的活體染色液泡系（vacuoles）細(xì)胞內(nèi)凡是由膜包裹的小泡和

5、液泡，除線粒體和質(zhì)體外，都屬于液泡系，都由單層膜包圍。種類：動(dòng)植物細(xì)胞都含有液泡，共有約13種，有些為植物細(xì)胞所特有。高爾基液泡、收縮泡、包被小泡：溶酶體、圓球體、糊粉粒：含各種水解酶，功能是消化，由內(nèi)膜系統(tǒng)生成；微體：過氧化物酶體、乙醛酸循環(huán)體，特殊代謝酶系；消化泡、吞噬泡、殘?bào)w：與胞吞作用相關(guān)；中央液泡：由起源于內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的小泡合并而成。液泡系的一般性質(zhì)動(dòng)物細(xì)胞高爾基區(qū)的液泡主要功能是蛋白質(zhì)的濃縮與凝結(jié)，軟骨細(xì)胞內(nèi)含有較多的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和發(fā)達(dá)的高爾基復(fù)合體，能合成與分泌軟骨粘蛋白及膠原纖維等，因而液泡系發(fā)達(dá)。植物細(xì)胞幼期，液泡很小，但隨著

6、細(xì)胞生長，液泡長大。小液泡逐漸合并為大液泡，位于細(xì)胞中央，占有大部分的細(xì)胞體積。植物細(xì)胞的大液泡主要成分為水，起滲透調(diào)節(jié)作用。液泡中溶解的溶質(zhì)種類繁多，其來源與質(zhì)膜、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基器關(guān)系密切。活體染色是能使生活的細(xì)胞或組織特異性著色，但對(duì)活樣品又沒有毒害作用的一種染色方法，其目的是顯示生活細(xì)胞內(nèi)的某些結(jié)構(gòu)，而不影響細(xì)胞的生命活動(dòng)，也不產(chǎn)生任何物理、化學(xué)變化，不會(huì)引起細(xì)胞死亡。并非任何染料均可用于活體染色，理論上應(yīng)選擇那些對(duì)細(xì)胞無毒性或毒性極小的染料，且使用時(shí)需要配成稀淡的溶液。詹納斯綠B(Janusgreen?B)和中性紅(neutra

7、l?red)是活體染色劑中最重要的染料，對(duì)于線粒體和液泡系的染色分別具有專一性。中性紅只將液泡系染成紅色，在細(xì)胞處于生活狀態(tài)時(shí)，細(xì)胞質(zhì)及核不被染色。細(xì)胞的活體染色一小塊胸骨劍突中性紅10min吸去染液加一滴Ringer蓋片觀察一塊洋蔥內(nèi)表皮中性紅-詹納斯綠B30min蓋片觀察實(shí)驗(yàn)內(nèi)容成熟植物細(xì)胞的中央大液泡植物細(xì)胞中央大液泡的演變過程一滴兔紅細(xì)胞懸液蓋片、觀察一滴兔紅細(xì)胞懸液+1.2%NaCl蓋片、觀察一滴兔紅細(xì)胞懸液+0.4%NaCl蓋片、觀察一小塊洋蔥表皮+一滴清水蓋片、觀察一小塊洋蔥表皮+4%NaCl蓋片、觀察取下，蓋玻片一側(cè)滴清

8、水，另一側(cè)吸出觀察質(zhì)壁分離復(fù)原小鼠處死、剖開腹腔1ml生理鹽水?dāng)嚢枞「骨灰旱纹^察蟾蜍處死一小塊胸骨劍突中性紅10min吸去染液加一滴Ringer蓋片觀察一塊洋蔥內(nèi)表皮中性紅-詹納斯綠B30min蓋片觀察（