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《大學(xué)研究生課程-色譜概論-研究生》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在教育資源-天天文庫。
1、1色譜分析-----研究生2第一章色譜分析法概論第一節(jié)色譜法概述一、什么是色譜法色譜分析法簡稱色譜法(chromatography)，是一種物理或物理化學(xué)分離分析方法。3圖示固定相——CaCO3顆粒流動相——石油醚色帶4第二節(jié)色譜法的分類與歷史一、色譜法的歷史1.新型固定相和檢測器的研制2.色譜新方法的研究3.色譜聯(lián)用技術(shù)4.色譜專家系統(tǒng)5二、分類：1．按兩相分子的聚集狀態(tài)分：流動相固定相類型液相色譜液體固體液-固色譜液體液體液-液色譜氣體固體氣-固色譜氣體液體氣-液色譜氣相色譜6續(xù)前2．按操作方式分：平面色譜紙色譜薄層色譜高分子薄膜色譜柱色譜填充柱色譜毛細(xì)管柱色
2、譜73．按分離機制分：分配色譜法吸附色譜法離子交換色譜法空間排阻色譜法親合色譜法化學(xué)鍵合相色普法毛細(xì)管電色譜法毛細(xì)管電泳法8圖示色譜法簡單分類9第二章色譜基本理論定性參數(shù)定量參數(shù)柱效參數(shù)分離參數(shù)相平衡參數(shù)第一節(jié)色譜參數(shù)10續(xù)前（一）色譜流出曲線和色譜峰1．色譜流出曲線是由檢測器輸出的電信號強度對時間作圖所繪制的曲線，又稱為色譜圖。2．基線是在操作條件下，沒有組分流出時的流出曲線。一、色譜流出曲線和有關(guān)概念11123．色譜峰是流出曲線上的突起部分。正常色譜峰為對稱形正態(tài)分布曲線。不正常色譜峰有兩種：拖尾峰和前延峰。色譜峰的對稱與否可用對稱因子fs(symmetryf
3、actor)，或叫拖尾因子(tailingfactor)，來衡量。13對稱因子在0.95～1.05之間的色譜峰為對稱峰；小于0.95者為前延峰。大于1.05者為拖尾峰。1415二、定性參數(shù)（一）保留值1．保留時間(retentiontime；tR)是從進(jìn)樣到某組分在柱后出現(xiàn)濃度極大時的時間間隔，即從進(jìn)樣開始到某個組分的色譜峰頂點的時間間隔。2．死時間(deadtime；t0)是分配系數(shù)為零的組分，即不被固定相吸附或溶解的組分的保留時間。16173．調(diào)整保留時間(adjustedretentiontime；)4．保留體積(retentionvolume；VR)是從進(jìn)
4、樣開始到某個組分在柱后出現(xiàn)濃度極大時，所需通過色譜柱的流動相體積。185．死體積(deadvolume；V0)196．調(diào)整保留體積(adjustedretentionvolume；)與流動相流速無關(guān)7．相對保留值(relativeretention；r)208．保留指數(shù)(retentionindex；I)又稱Kovats指數(shù)，定義式如下：Ix-----待測組分的保留指數(shù)z與z+n---正構(gòu)烷烴對的碳原子數(shù)n可為1、2…，通常為1。21規(guī)定正己烷、正庚烷、正辛烷的保留指數(shù)分別為600、700、800，依次類推。同系物中，每增加1個CH2，保留指數(shù)增加100。例如在阿
5、皮松柱上，測定某樣品的保留指數(shù)，測得數(shù)據(jù)如下：22tRt0樣品乙酸正丁酯340s30s物質(zhì)對正庚烷(Z)204s正辛烷(Z+n)403.4s說明乙酸正丁酯的保留行為，相當(dāng)于7.756個碳的正構(gòu)烷烴的保留行為。23三、柱效參數(shù)（一）色譜峰區(qū)域?qū)挾?．標(biāo)準(zhǔn)差(standarddeviation；σ)是正態(tài)色譜流出曲線上兩拐點間距離之半。σ越大，組分越分散；反之越集中。24252．半峰寬(peakwidthathalfheight；W1/2)是峰高一半處的峰寬。W1/2=2.355σ3．峰寬(peakwidth；W)是通過色譜峰兩側(cè)拐點作切線在基線上所截得的距離。W=4
6、σ或W=1.699W1/226（二）理論塔板數(shù)和理論塔板高度1.理論塔板數(shù)27282.理論塔板高度29四、分離參數(shù)若R=1，4σ分離，兩峰基本分開。若R=1.5，6σ分離，兩峰完全分開(基線分離)。302.基本分離方程式（1）柱色譜31a項取決于柱效，n↑，a項↑b、c項相關(guān)在GC中：b項主要受色譜柱性質(zhì)影響c項主要受柱溫影響在HPLC中：b項主要取決于流動相的種類c項主要取決于流動相的配比32（2）薄層色譜：討論：①a項為薄層板板效項。N↑，斑點越集中，R↑。②b項為選擇項。選擇合適的流動相，提高α。③c項為容量項。Rf2↑，R↓。最佳分離條件：Rf值在0.3~
7、0.5。調(diào)整展開劑極性，使Rf值落入最佳范圍。33（二）有效峰數(shù)（effectivepeaknumber,ENP)ENP的含義：在含有Z與Z+1個碳的正構(gòu)同系物的色譜峰間能容納的色譜峰數(shù)。ENP越大，色譜柱的分離性能越好。34例如：在一個20m0.24mm內(nèi)徑的WCOT柱，固定液為Carbowax20M，柱溫80℃，測定正構(gòu)醇同系物得：正戊醇、正己醇和正庚醇的保留時間分別為：554.0，870.6和1459.2s，色譜峰寬分別為：7.54，12.03和20.40s。用正戊醇、正己醇的數(shù)據(jù)計算ENP35（三）分離值1.分離值在柱色譜中的定義和含義36例1若RZ+1/
8、Z=6，R
