茶皂素的初步分離及對(duì)其抗菌作用的研究

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1、第三屆大學(xué)生科研創(chuàng)新計(jì)劃（SRIP）論文題目：茶皂素的初步分離及對(duì)其抗菌作用的研究摘要本課題主要研究茶皂素的分離及其抗菌性。我們?cè)诳偨Y(jié)前人研究的基礎(chǔ)上，采用硅膠薄層層析法分析不同展開劑對(duì)茶皂素的展開效果，找到最佳的展開劑，然后采用硅膠柱層析法對(duì)差皂素進(jìn)行分離，并對(duì)分離開的各組分進(jìn)行抗菌性研究。關(guān)鍵詞：薄層層析，柱層析，分離，抗菌性16目錄第一章引言41茶皂素的概述42茶皂素的應(yīng)用43茶皂素的抗菌作用5164立題和研究的意義5第二章試驗(yàn)方法與試驗(yàn)結(jié)果61實(shí)驗(yàn)材料、試劑和器材61.1實(shí)驗(yàn)材料與試劑61.2實(shí)驗(yàn)儀

2、器61.3薄層層析展開劑61.4柱層析洗脫液……………………………………………………………………………..62實(shí)驗(yàn)方法72.1薄層層析72.2柱層析82.3抗菌性實(shí)驗(yàn)83結(jié)果及分析…………………………………………………………………...….93.1薄層層析實(shí)驗(yàn)結(jié)果及分析…………………………………………………………93.2柱層析分離結(jié)果及分析…………………………………………………………..103.3抗菌活性試驗(yàn)結(jié)果及分析………………………………………………………..113.3.1茶皂素復(fù)合物對(duì)不同菌種的抑菌試

3、驗(yàn)………………………………………113.3.2茶皂素的分離物對(duì)酵母菌種的抑菌試驗(yàn)…………………………………...12第三章總結(jié)與展望14參考文獻(xiàn)15致謝16第一章引言161.茶皂素的概述茶皂素是從油茶籽餅中提取的一種五環(huán)三萜類化合物，由糖體、甙元及有機(jī)酸組成，它是一種性能優(yōu)良的天然非離子表面活性劑，而且還具有消炎、鎮(zhèn)痛、殺菌、止癢等藥理作用。研究發(fā)現(xiàn)茶皂素中可分離出七種配基(甙元)組分,糖體含有阿拉伯糖、木糖、半乳糖、葡萄糖醛酸等,有機(jī)酸則主要是當(dāng)歸酸、惕各酸。茶皂素在配基組分中結(jié)合有機(jī)酸的形式不同,而結(jié)合

4、糖體的形式卻相同,均在酸基A環(huán)C-3位置上的羥基與糖體的葡萄糖醛酸以苷鍵形式結(jié)合[1]。純茶皂素是無色微細(xì)柱狀結(jié)晶體，具有吸濕性，味苦辛辣，同時(shí)具有刺激鼻粘膜特性。主要理化常數(shù)[2]見表1.1。表1.1茶皂素主要理化常數(shù)分子量分子式元素分析值（%）熔點(diǎn)（℃）酸堿度（pH）1203C57H90O26C=59.93H=7.09223-2246.2茶皂素在冷水中難溶，在熱水中易溶，在稀堿性水溶液中溶解顯著增加，能較好溶解在含水甲醇、含水乙醇、正丁醇、冰醋酸，醋酐和吡啶中，但不溶于乙醚、氯仿、丙酮、苯、石油醚等溶劑

5、。2.茶皂素的應(yīng)用茶皂素具有表面活性和生物活性。其分子中具有親水性的糖體和疏水性的配位基團(tuán),是一種優(yōu)良的非離子型表面活性劑。首先茶皂素的親水親油平衡值HLB為16,因此是制備水包油型O.W乳狀液的良好乳化劑。茶皂素又具有溶血性,能收濕殺蟲,治療陰囊濕疹,跌打損傷,燙火傷，抗炎和擴(kuò)張血管以及能較好的抗真菌，而且在工業(yè)、農(nóng)業(yè)、醫(yī)藥等領(lǐng)域也有著廣泛的用途。3.茶皂素的抗菌作用茶皂素的抗菌作用已在茶籽餅作為防治某些皮膚病的應(yīng)用中得到體現(xiàn)。熊文淑[3]研究發(fā)現(xiàn),茶皂素對(duì)白色念珠菌、大腸桿菌均有抑制作用。金繼曙等[4]

6、研究表明,茶皂素有較好的抗菌作用,對(duì)淺表真菌感染具有治療效果。也有報(bào)道,16茶皂素對(duì)多種皮膚病瘙癢有抑制作用。金繼曙等對(duì)油茶餅抗菌成分的研究表明,與茶皂素結(jié)構(gòu)類似的油茶皂素,經(jīng)體外和臨床預(yù)試驗(yàn)均證明有較強(qiáng)的抗菌活性。4.立題的意義及研究意義可以從上述知茶皂素具有抗菌性，茶皂素是由多種單體組成的，我們要做的是盡可能多的分離出茶皂素中有抗菌性的組分。眾所周知，現(xiàn)在由真菌引起的皮膚病很多，而茶皂素對(duì)頭癬小孢霉菌、絮狀表皮癬菌、須發(fā)癬霉菌、深紅發(fā)癬霉菌、白假絲酵母等皮膚病原真菌有較為顯著的抗菌活性，為現(xiàn)在皮膚病的治

7、療提供了有效的治療方法，為茶皂素在生物醫(yī)藥上開發(fā)和應(yīng)用提供理論依據(jù)。我國各類茶籽資源十分豐富，是茶油生產(chǎn)大國，南方各省山區(qū)均有廣泛的栽培。從油茶果中榨取食用油后,得到了大量茶餅,據(jù)分析其中茶皂素的含量為10%～15%。我們的原料提供是很豐富的，可是我們的分離工藝卻有待改進(jìn)。迄今為止,茶皂素的純化方法有丙酮沉淀法,有機(jī)溶劑法和硅膠柱層析等傳統(tǒng)的純化方法,也有離子交換樹脂,絮凝劑等最新被采用的方法。但是這些方法都存在著不足,或是很難使茶皂素達(dá)到無色,質(zhì)感好,純度高,性能穩(wěn)定等要求,或是收率很低。我們希望能在前人

8、的基礎(chǔ)上探索出一種更優(yōu)化的分離條件，使茶皂素中的不不同成份盡可能的分離開，甚至得到單體，從而為茶皂素在基礎(chǔ)理論和應(yīng)用研究中存在的問題的解決提供一定的參考價(jià)值。第二章試驗(yàn)方法與試驗(yàn)結(jié)果1.實(shí)驗(yàn)材料、試劑和器材（1）實(shí)驗(yàn)材料、試劑：粗茶皂素16馬鈴薯硅膠甲醇（分析純）濃硫酸（分析純）正丁醇（分析純）丙酮（分析純）95%乙醇（分析純）（2）實(shí)驗(yàn)儀器：燒杯玻璃板（12cm×20cm）層析缸移液槍玻璃棒噴霧器烘箱培養(yǎng)箱層析