枝桿菌屬、諾卡菌屬、放線菌屬鑒定

《枝桿菌屬、諾卡菌屬、放線菌屬鑒定》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在教育資源-天天文庫(kù)。

1、微生物學(xué)檢驗(yàn)第十章分枝桿菌屬、諾卡菌屬、放線菌屬鑒定返回總目錄本章內(nèi)容第一節(jié)分枝桿菌屬12第三節(jié)放線菌屬3第二節(jié)諾卡菌屬學(xué)習(xí)目標(biāo)及重點(diǎn)學(xué)習(xí)目標(biāo)：1.掌握結(jié)核分枝桿菌生物學(xué)特征，痰涂片抗酸染色及報(bào)告。2.熟悉結(jié)核菌素試驗(yàn)的臨床意義；結(jié)核分枝桿菌和麻風(fēng)分枝桿菌；星形諾卡菌的鑒別要點(diǎn)，諾卡菌與分枝桿菌、棒狀桿菌的鑒別。3.了解結(jié)核分枝桿菌的致病物質(zhì)；麻風(fēng)分枝桿菌致病性；放線菌屬的生物學(xué)特性、致病及免疫性本章重點(diǎn)：★結(jié)核分枝菌的生物學(xué)特性、培養(yǎng)特性★結(jié)核分枝菌的微生物學(xué)檢驗(yàn)★結(jié)核分枝菌與其他分枝菌的鑒別第一節(jié)分枝桿菌屬分枝桿菌屬（Mycobacterium）概述是一

2、類細(xì)長(zhǎng)彎曲的桿菌，因有分枝生長(zhǎng)的趨勢(shì)而得名主要特點(diǎn)細(xì)長(zhǎng)彎曲，分枝狀生長(zhǎng)細(xì)胞壁含有大量脂質(zhì)（分枝菌酸）常用抗酸染色鑒定，呈抗酸染色陽(yáng)性（紅色）引起疾病多呈慢性，且伴肉芽腫一、結(jié)核分枝菌(一)生物學(xué)性狀1.形態(tài)與染色：G+（不易著色），細(xì)長(zhǎng)略彎，分枝狀，有莢膜，抗酸染色陽(yáng)性。菌體外有莢膜2.培養(yǎng)特性營(yíng)養(yǎng)要求較高，最適pH6.5～6.8，在羅氏（Lowenstein-Jensen，L-J）培養(yǎng)基上生長(zhǎng)良好生長(zhǎng)緩慢，14～18h分裂1次，在固體培養(yǎng)基上2～5w才出現(xiàn)肉眼可見(jiàn)的菌落典型菌落為粗糙型，表面干燥呈顆粒狀，不透明，乳白色或淡黃色，如菜花樣第一節(jié)分枝桿菌屬結(jié)核

3、菌抗酸染色結(jié)果結(jié)核菌菌落第一節(jié)分枝桿菌屬一、結(jié)核分枝菌３.生化反應(yīng)不發(fā)酵糖類，觸酶試驗(yàn)陽(yáng)性，而熱觸酶試驗(yàn)陰性——加熱68℃散失活性（區(qū)別非結(jié)核菌）煙酸合成試驗(yàn)、硝酸鹽還原試驗(yàn)、吡嗪酰胺試驗(yàn)均陽(yáng)性，可與牛型結(jié)核分枝菌鑒別４.抵抗力對(duì)乙醇、濕熱、紫外線、抗結(jié)核藥物（鏈霉素、異煙肼、利福平等）敏感對(duì)干燥、酸（3%HCl或6%H2SO4)或堿（4%NaOH)、堿性染料（孔雀綠、結(jié)晶紫）、青霉素等抗生素等有抵抗力第一節(jié)分枝桿菌屬一、結(jié)核分枝菌５.變異性（１）形態(tài)結(jié)構(gòu)變異：結(jié)核桿菌的L型：顆粒狀（Much顆粒——病灶中革蘭陽(yáng)性非抗酸性）、絲狀（２）毒力變異：卡介苗(BC

4、G)：Calmette和Guérin將牛型分枝桿菌經(jīng)13年230次傳代而獲得的減毒菌株——活疫苗（３）耐藥性變異：耐異煙肼及其他抗結(jié)核藥物的結(jié)核菌株日益增多第一節(jié)分枝桿菌屬一、結(jié)核分枝菌（二）微生物檢驗(yàn)1.標(biāo)本：根據(jù)感染部位的不同來(lái)采集不同的標(biāo)本，最常用痰液標(biāo)本2.標(biāo)本前處理目前有酸（4%HCl）處理和堿（4%NaOH）處理兩種方法3.檢驗(yàn)程序第一節(jié)分枝桿菌屬標(biāo)本核酸檢測(cè)接種固體培養(yǎng)基可疑菌落涂片抗酸染色鏡檢抗體檢測(cè)慢性生長(zhǎng)菌快速生長(zhǎng)菌菌種鑒定標(biāo)本前處理接種液體培養(yǎng)基接種小白鼠豚鼠臟器涂片鏡檢抗酸染色鑒定試驗(yàn)檢驗(yàn)程序第一節(jié)分枝桿菌屬一、結(jié)核分枝菌4.形態(tài)學(xué)檢

5、查（高壓滅菌后進(jìn)行）（1）直接涂片染色鏡檢（2）濃縮集菌涂片檢查法（3）熒光染色：觀察形態(tài)黃綠色、橙色熒光（4）初步報(bào)告：檢出抗酸分枝桿菌（結(jié)核桿菌？）第一節(jié)分枝桿菌屬報(bào)告方式抗酸染色鏡檢結(jié)果-仔細(xì)檢查300個(gè)視野未發(fā)現(xiàn)抗酸桿菌±300個(gè)視野內(nèi)發(fā)現(xiàn)1~2條抗酸菌＋100個(gè)視野內(nèi)發(fā)現(xiàn)1~9條抗酸菌2＋10個(gè)視野內(nèi)發(fā)現(xiàn)1~9條抗酸菌3＋每個(gè)視野內(nèi)發(fā)現(xiàn)1~9條抗酸菌4＋每個(gè)視野內(nèi)發(fā)現(xiàn)9條以上抗酸菌一、結(jié)核分枝菌（5）報(bào)告方式第一節(jié)分枝桿菌屬一、結(jié)核分枝菌5.分離培養(yǎng)L-J斜面或平板：生長(zhǎng)緩慢，涂片抗酸染色快速培養(yǎng)系統(tǒng)：自動(dòng)報(bào)告6.核酸檢測(cè)：PCR法第一節(jié)分枝桿菌屬

6、一、結(jié)核分枝菌(三)臨床意義1.致病物質(zhì)：主要與菌體成份有關(guān)。（1）脂質(zhì)分枝菌酸：與抗酸性有關(guān)蠟質(zhì)D:具有佐劑作用硫酸腦苷脂:阻礙吞噬磷脂:促類上皮細(xì)胞形成索狀因子:與該菌毒力有密切關(guān)系第一節(jié)分枝桿菌屬一、結(jié)核分枝菌（2）蛋白質(zhì)誘發(fā)超敏反應(yīng)（3）糖類抵抗吞噬作用2.所致疾?。?）經(jīng)多途徑感染，引起全身各組織結(jié)核病，以肺結(jié)核最多見(jiàn)（2）類型原發(fā)感染和繼發(fā)感染3.免疫性抗結(jié)核免疫以細(xì)胞免疫為主※抗結(jié)核免疫屬帶菌免疫或稱傳染性免疫※抗結(jié)核免疫與Ⅳ型超敏反應(yīng)同時(shí)出現(xiàn)第一節(jié)分枝桿菌屬一、結(jié)核分枝菌4.結(jié)核菌素試驗(yàn)（1）原理用結(jié)核菌素進(jìn)行皮膚試驗(yàn)，以檢測(cè)受試者對(duì)結(jié)核桿菌

7、是否有細(xì)胞免疫及遲發(fā)型超敏反應(yīng)的試驗(yàn)。（2）結(jié)核菌素試劑（PPD5單位）舊結(jié)核菌素（oldtuberculin，OT)，純蛋白衍化物(purifiedproteinderivative，PPD)（3）結(jié)果48h-72h,根據(jù)注射部位是否出現(xiàn)紅腫判斷結(jié)果＜5mm為陰性≥5mm為陽(yáng)性＞15mm為強(qiáng)陽(yáng)性第一節(jié)分枝桿菌屬一、結(jié)核分枝菌（4）結(jié)核菌素試驗(yàn)意義選擇卡介苗接種對(duì)象、測(cè)定卡介苗接種后的免疫效果了解人群結(jié)核菌的自然感染率作為嬰幼兒結(jié)核病的輔助診斷測(cè)定腫瘤患者的細(xì)胞免疫功能第一節(jié)分枝桿菌屬二、麻風(fēng)分枝菌1.生物學(xué)特性1873年挪威學(xué)者ArmauerHansen從

8、麻風(fēng)患者皮膚結(jié)節(jié)中發(fā)現(xiàn)，又名Hansen桿菌，具抗酸