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1、甘草總黃酮的提取工藝研究摘要：目的：用正交法研究提取甘草中的甘草總黃酮類化合物最佳提取工藝。方法：選取乙醇濃度、提取時(shí)間、溫度、料液比個(gè)主要影響因素，采用正交法，以甘草總黃酮類化合物得率作為檢測指標(biāo)。結(jié)果：應(yīng)用酸溶堿沉法獲得甘草總黃酮類化合物的最佳提取工藝是：75%的乙醇，提取2h，酸沉PH為2.5，液料比為20:1。結(jié)論：該方法提取率高，穩(wěn)定性好，操作簡便，適合工業(yè)化生產(chǎn)。關(guān)鍵詞：甘草甘草總黃酮正交設(shè)計(jì)提取工藝甘草為雙子葉植物豆科甘草，脹果甘草，或光果甘草的根及根莖。始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，列為上品。甘草性平，味甘，歸十二經(jīng)。有解毒、祛痰、止痛、解痙以至抗癌等藥理作用。在中醫(yī)上，甘草補(bǔ)脾
2、益氣，滋咳潤肺，緩急解毒，調(diào)和百藥。臨床應(yīng)用分“生用”與“蜜炙”之別。生用主治咽喉腫痛，痛疽瘡瘍，胃腸道潰瘍以及解藥毒、食物中毒等；蜜炙主治脾胃功能減退，大便溏薄，乏力發(fā)熱以及咳嗽、心悸等。甘草是我國傳統(tǒng)常用中草藥之一，也是我國重要的植物資源[1]。甘草黃酮類成分是甘草中最重要的活性成分之一，具有抗氧化、抗腫瘤、增強(qiáng)心血管功能、增強(qiáng)免疫力等作用[2-5]。因此，開展甘草的深加工，使甘草資源得以充分利用，增加資源的附加值，前景十分可觀。為此，筆者以甘草為對(duì)象，研究了甘草黃酮的乙醇回流提取工藝，單因素試驗(yàn)確定各因素對(duì)提取工藝的影響，正交試驗(yàn)確定甘草黃酮提取的最佳工藝條件。1、儀器與試藥1.1
3、儀器:燒杯、容量瓶、移液管、玻璃棒、量筒、回流裝置、濾紙、HH24數(shù)顯恒溫水浴鍋、分析天平、AB1042N電子天平、布氏漏斗、SHZ2C型循環(huán)水多用真空泵1.2試劑:甘草，市售;試劑:蒸餾水、氫氧化鈉、鹽酸2、方法與結(jié)果在利用堿溶酸沉法從甘草中獲得甘草總黃酮的過程中，我們通過預(yù)試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)影響提取得率的主要因素為乙醇濃度、提取時(shí)間、溫度、料液比。故選擇乙醇濃度(A)、提取時(shí)間(B)、酸沉pH值(C)、料液比(D)作為考察的四個(gè)因素，各取三個(gè)水平(見表1)，以甘草總黃酮得率(%)為考察指標(biāo)。提取工藝與試驗(yàn)結(jié)果、方差分析和驗(yàn)證試驗(yàn)結(jié)果依次見表2、表3、和表42.1正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)2.1.1正交因素水
4、平設(shè)計(jì)采用堿溶酸沉法進(jìn)行提取，選擇乙醇濃度、提取時(shí)間、酸沉PH值、料液比四個(gè)因素，每個(gè)因素選擇三個(gè)水平，設(shè)計(jì)正交試驗(yàn)因素水平表(見表1)表1正交因素水平設(shè)計(jì)表Table1Orthogonaldesignfactorleveltable因素水平A乙醇濃度(%)B提取時(shí)間(h)C酸沉PH值D液料比1651.53.0152752.02.5203852.52.0252.1.2正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)結(jié)果分別取藥材10g，按上述L9(34)正交表方案進(jìn)行試驗(yàn)，以最后甘草總黃酮得率為指標(biāo)進(jìn)行分析，結(jié)果見表2，方差分析見表3。表2正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)及結(jié)果Table2Orthogonaltestdesignandresu
5、lts實(shí)驗(yàn)號(hào)因素結(jié)果ABCD11.00001.00001.00001.00002.3121.00002.00002.00002.00002.4131.00003.00003.00003.00002.4242.00001.00002.00003.00002.4452.00002.00003.00001.00002.5362.00003.00001.00002.00002.4573.00001.00003.00002.00002.4183.00002.00001.00003.00002.3593.00003.00002.00001.00002.36K17.14007.16007.11007.
6、2000K27.42007.29007.21007.2700K37.12007.23007.36007.2100R0.30000.13000.25000.0700SS0.01880.00280.01060.0010表3方差分析表Table3AnalysisofVarianceTable方差來源離差平方和SS自由度f均方SF值顯著性PA0.01882.00000.009419.6279P<0.05B0.00282.00000.00142.9535P>0.05C0.01062.00000.005311.0465P>0.05D0.00102.00000.00051.0000P>0.052.13
7、結(jié)果分析由直觀分析可知，利用水提醇沉法提取甘草總黃酮的過程中，影響提取效果的因素順序?yàn)椋阂掖紳舛龋舅岢罰H值＞提取時(shí)間＞液料比，以乙醇濃度影響最大，為主要因素，其它為次要因素。考慮到繼續(xù)增加乙醇濃度和延長提取降低酸沉PH對(duì)結(jié)果影響較小，從工業(yè)生產(chǎn)節(jié)約能源、費(fèi)用，省時(shí)考慮，確定利用堿溶酸沉法提取甘草總黃酮的最佳提取工藝為A2B2C2D2，即75%的乙醇，提取2h，酸沉PH為2.5，液料比為20:1。2.2工藝流程甘草藥材75%乙醇加熱
