慢性乙型肝炎病毒感染樹鼩 Kupffer 細(xì)胞 TLR2 和 TLR4 的表達(dá)及其意義-論文.pdf

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1、686細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志(ChinJCellMolImmuno1)2014,30(7·論著·文章編號:1007—8738(2014)07—0686—05慢性乙型肝炎病毒感染樹購Kupfer細(xì)胞TLR2和TI,R4的表達(dá)及其意義阮萍一,楊春,蘇建家,歐超,曹驥,駱成漂,唐艷萍,秦虹一,孫雯一,李瑗(。廣西腫瘤醫(yī)院實驗研究部,廣西醫(yī)科大學(xué)研究生院,廣西南寧5~021;。廣西中醫(yī)藥大學(xué)附屬瑞康醫(yī)院病理科,廣西南寧530011)[摘要]目的探索慢性乙型肝炎病毒(HBV)感染樹嗣Kupfer細(xì)胞Toll樣受體(TLR)家族中的TLR2和TLR4在mRNA水平的表達(dá)

2、情況及其對Kupfer細(xì)胞功能的影響。方法樹嗣分為確定慢性感染HBV的樹嗣、疑似慢性感染HBV的樹嗣和未接種HBV的正常對照樹胸。全部動物定期抽血和進(jìn)行肝活檢手術(shù),采用實時熒光定量PCR(qRT.PCR)分析血清和肝組織的HBVDNA水平;對手術(shù)切取的樹胸肝組織進(jìn)行Kupfer細(xì)胞的分離、純化和原代培養(yǎng),采用qRT—PCR檢測TLR2、TLR4以及TNF.0【的mRNA表達(dá)水平;采用遷移實驗及溶酶體熒光探針等方法分析rLR2和TLR4對Kupfer細(xì)胞遷移能力及溶酶體數(shù)量的影響。結(jié)果確定慢性感染HBV的樹嗣TLR2mRNA和,I’LR4mRNA表達(dá)水平均低

3、于疑似慢性感染HBV的樹胸和未接種HBV的正常對照樹嗣(P<0.05),表達(dá)水平均與動物肝組織的HBVDNA拷貝數(shù)呈負(fù)相關(guān)(P<0.05),與Kupfer細(xì)胞的細(xì)胞遷移數(shù)、溶酶體密度及TNF-僅mRNA表達(dá)水平呈正相關(guān)(P<0.05)。結(jié)論Kupfer細(xì)胞中的TLR2和TLR4可能通過影響Kupfer細(xì)胞功能而參與樹嗣HBV感染后肝臟病變的慢性化發(fā)展過程。[關(guān)鍵詞]T0l1樣受體;Kupfer細(xì)胞;乙型肝炎病毒;樹駒[中圖分類號]R392.11;R373.21[文獻(xiàn)標(biāo)志碼]AExpressionsandsignificanceofTLR2andTLR4in

4、KupfercellsoftreeshrewschronicallyinfectedwithhepatitisBvirusRUANPing,一,YANGChun,SUJianjia,OUChao,CAOJi,LUOChengpiao,TANGYanping,QINHong一,SUNWen一,LIYuanDepartmentofExperiment,GuangxiTumorHospital,GraduateCollege,GuangxiMedicalUniversity,Nanning530021;DepartmentofPathology,RuikangH

5、ospital,GuangxiUniversityofChineseMedicine,Nanning530011,China【AbstractJ0bjecfiveToinvestigatethemRNAexpressionlevelsofToll_likereceptors2(TLR2)andTLR4inKupfercellsoftreeshrewsthatwerechronicallyinfectedwithhepatitisBvirus(HBV),andtheefectsofthesereceptorsonthefunctionofKuIpfercel

6、ls.MethodsThetreeshrewsweredividedintotreeshrewsprovedwithchronicHBVinfection.treeshrewssuspectedwithchronicHBVinfection.a(chǎn)ndnormalcontroltreeshrewswithouthepatitisBvaccination.ThesamplesofserumandIiverbiopsywerecollectedperiodically.a(chǎn)ndthelevelsofHBVDNAinserumandIivertissueswerede

7、tectedbyfluorescence-basedquantitativereal-timePCR(qRT-PCR).Meanwhile。Kupfercellswereisolatedfr0mthebiopsiedlivertissues,andthenpurifiedandprimarilycultured.Afterwards.qRT-PCRWaSappliedtodetectthemRNAexpressionlevelsofTLR2,TLR4andTNF-aintheKupfercells.Cellmigrationassayandlysosome

8、-specificfluorescentprobewereadop

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