實驗：阿司匹林血藥濃度測定ppt課件.ppt

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1、阿司匹林血藥濃度測定一、實驗目的1.掌握阿司匹林血樣的處理方法2.掌握血藥濃度-時間曲線的測定方法3.掌握單室模型血管外給藥藥物動力學參數(shù)的提取方法二、實驗原理阿司匹林在體內轉化為水楊酸鹽。把混合試劑加到家兔口服阿司匹林后采集不同時間的血清樣本中，升汞沉淀蛋白質，而鐵鹽與水楊酸作用顯紫色，在一定溫度范圍內，顯色強度與水楊酸的濃度成正比。在λ540nm波長處測定紫色溶液的吸光度（A），再根據(jù)標準曲線進行濃度換算，即得到給藥后不同時間的血藥濃度值。采用殘數(shù)法求出Cmax，tmax，K，t1/2，V等有

2、關藥動學參數(shù)。三、試劑1.混合試劑。（升汞+硝酸鐵）2.水楊酸標準溶液（500μg/ml）四、實驗內容1.血清水楊酸標準曲線的制作取刻度離心管5只，各加入空白血清0.5ml，依次加入水鹽酸標準液0.1、0.3、0.5、0.7、0.9ml，各加蒸餾水至2.0ml，加入混合試劑4.0ml，振搖混合，離心10min，分離上清液。測定吸收度，并以2ml蒸餾水加4ml混合試劑作空白對照。在λ540nm處測定上清液的吸收度（A）試管號12345C（μg/ml）99.5298.5497.5696.5895.5A

3、0.1350.2820.4430.6430.7872.血藥濃度測定（1）實驗家兔的準備及給藥方法體重2.5～3kg，耳完整無缺，靜脈清晰，血流通暢無阻滯的健康家兔，提前12h禁食口服片劑劑量為50～100mg/kg給藥時，二人協(xié)作，一人坐好，將兔軀干體夾于兩腿之間，左手握住雙耳，固定頭部，右手抓住前肢，另一人將開口器橫放于兔口中，將舌壓在開口器下面，固定開口器，用鑷子夾住藥片，從開口器洞孔送入咽部，用20ml水沖服下。（2）實驗家兔取血時間和方法取血時間：給藥后，在0.250.51.01.52.0

4、2.53.04579h分別取兔耳靜脈血2ml取血方法：家兔耳靜脈切口法固定家兔，在兔耳靜脈處剪毛，用酒精棉球擦洗，并用手彈打耳根部，使局部充血，用手術刀片在耳緣靜脈遠心端進行橫切，滴血取血樣1.5～2ml。取血畢，用干棉球壓住出血口數(shù)分鐘即可止血，下次取血時，可在原刀口出進行。，出血太慢時，可用二甲苯涂擦兔耳，使其充血。（3）分離血清及測定將血樣置于室溫下，10～30min凝血，若室溫在10℃以下，可將血樣置于37℃水浴中或孵箱內保持2h左右，加速血清滲出，待血清滲出后，離心（2500轉/min）

5、，分離上清液（血清）。吸取血清0.5ml置試管中，按實驗內容1……從各加蒸餾水至2.0ml起操作，在λ540nm處測定上清液的吸收度A，并在標準曲線方程計算出水楊酸的濃度。五、實驗數(shù)據(jù)處理1.作圖：在座標紙上以血藥濃度-時間描點作圖。2.用線性回歸法法求出口服給藥后的各藥物動力學參數(shù)（Cmax，tmax，K，Ka，t1/2，V，CL），同時計算AUC0～∞（積分法或梯形法）。