實(shí)驗(yàn)：阿司匹林血藥濃度測(cè)定ppt課件.ppt

《實(shí)驗(yàn)：阿司匹林血藥濃度測(cè)定ppt課件.ppt》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在教育資源-天天文庫(kù)。

1、阿司匹林血藥濃度測(cè)定一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?.掌握阿司匹林血樣的處理方法2.掌握血藥濃度-時(shí)間曲線的測(cè)定方法3.掌握單室模型血管外給藥藥物動(dòng)力學(xué)參數(shù)的提取方法二、實(shí)驗(yàn)原理阿司匹林在體內(nèi)轉(zhuǎn)化為水楊酸鹽。把混合試劑加到家兔口服阿司匹林后采集不同時(shí)間的血清樣本中，升汞沉淀蛋白質(zhì)，而鐵鹽與水楊酸作用顯紫色，在一定溫度范圍內(nèi)，顯色強(qiáng)度與水楊酸的濃度成正比。在λ540nm波長(zhǎng)處測(cè)定紫色溶液的吸光度（A），再根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線進(jìn)行濃度換算，即得到給藥后不同時(shí)間的血藥濃度值。采用殘數(shù)法求出Cmax，tmax，K，t1/2，V等有

2、關(guān)藥動(dòng)學(xué)參數(shù)。三、試劑1.混合試劑。（升汞+硝酸鐵）2.水楊酸標(biāo)準(zhǔn)溶液（500μg/ml）四、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容1.血清水楊酸標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作取刻度離心管5只，各加入空白血清0.5ml，依次加入水鹽酸標(biāo)準(zhǔn)液0.1、0.3、0.5、0.7、0.9ml，各加蒸餾水至2.0ml，加入混合試劑4.0ml，振搖混合，離心10min，分離上清液。測(cè)定吸收度，并以2ml蒸餾水加4ml混合試劑作空白對(duì)照。在λ540nm處測(cè)定上清液的吸收度（A）試管號(hào)12345C（μg/ml）99.5298.5497.5696.5895.5A

3、0.1350.2820.4430.6430.7872.血藥濃度測(cè)定（1）實(shí)驗(yàn)家兔的準(zhǔn)備及給藥方法體重2.5～3kg，耳完整無(wú)缺，靜脈清晰，血流通暢無(wú)阻滯的健康家兔，提前12h禁食口服片劑劑量為50～100mg/kg給藥時(shí)，二人協(xié)作，一人坐好，將兔軀干體夾于兩腿之間，左手握住雙耳，固定頭部，右手抓住前肢，另一人將開口器橫放于兔口中，將舌壓在開口器下面，固定開口器，用鑷子夾住藥片，從開口器洞孔送入咽部，用20ml水沖服下。（2）實(shí)驗(yàn)家兔取血時(shí)間和方法取血時(shí)間：給藥后，在0.250.51.01.52.0

4、2.53.04579h分別取兔耳靜脈血2ml取血方法：家兔耳靜脈切口法固定家兔，在兔耳靜脈處剪毛，用酒精棉球擦洗，并用手彈打耳根部，使局部充血，用手術(shù)刀片在耳緣靜脈遠(yuǎn)心端進(jìn)行橫切，滴血取血樣1.5～2ml。取血畢，用干棉球壓住出血口數(shù)分鐘即可止血，下次取血時(shí)，可在原刀口出進(jìn)行。，出血太慢時(shí)，可用二甲苯涂擦兔耳，使其充血。（3）分離血清及測(cè)定將血樣置于室溫下，10～30min凝血，若室溫在10℃以下，可將血樣置于37℃水浴中或孵箱內(nèi)保持2h左右，加速血清滲出，待血清滲出后，離心（2500轉(zhuǎn)/min）

5、，分離上清液（血清）。吸取血清0.5ml置試管中，按實(shí)驗(yàn)內(nèi)容1……從各加蒸餾水至2.0ml起操作，在λ540nm處測(cè)定上清液的吸收度A，并在標(biāo)準(zhǔn)曲線方程計(jì)算出水楊酸的濃度。五、實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)處理1.作圖：在座標(biāo)紙上以血藥濃度-時(shí)間描點(diǎn)作圖。2.用線性回歸法法求出口服給藥后的各藥物動(dòng)力學(xué)參數(shù)（Cmax，tmax，K，Ka，t1/2，V，CL），同時(shí)計(jì)算AUC0～∞（積分法或梯形法）。