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《國家標準：gb 1886.257-2016 食品安全國家標準 食品添加劑 溶菌酶》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關內容在行業(yè)資料-天天文庫。
1、中華人民共和國國家標準GB1886.257—2016食品安全國家標準食品添加劑溶菌酶2016-08-31發(fā)布2017-01-01實施中華人民共和國發(fā)布國家衛(wèi)生和計劃生育委員會GB1886.257—2016食品安全國家標準食品添加劑溶菌酶1范圍本標準適用于以雞蛋清為原料,經提取、精制等工藝制得的食品添加劑溶菌酶。2技術要求2.1感官要求感官要求應符合表1的規(guī)定。表1感官要求要求項目檢驗方法固體液體色澤白色至淡黃色淺黃色至深褐色將適量試樣均勻置于燒杯或白瓷盤內,于自然狀態(tài)粉末液體光線下觀察其色澤和狀態(tài)2.2理化指標理化指標應符合表2的規(guī)定。表2
2、理化指標指標項目檢驗方法固體液體酶活力/[U/mg(mL)]符合標示值附錄A中A.2水分,w/%≤6—GB5009.3灰分,w/%≤1.50.3GB5009.4pH3.0~7.0附錄A中A.3鉛(Pb)/(mg/kg)≤2.0GB5009.12總砷(以As計)/(mg/kg)≤1.0GB5009.112.3微生物指標微生物指標應符合表3的規(guī)定。1GB1886.257—2016表3微生物指標項目指標檢驗方法菌落總數(shù)/[CFU/g(mL)]≤50000GB4789.2霉菌和酵母/[CFU/g(mL)]≤100GB4789.15大腸埃希氏菌/[M
3、PN/g(mL)]<3.0GB4789.38沙門氏菌/25g(mL)不得檢出GB4789.4金黃色葡萄球菌/25g(mL)不得檢出GB4789.10定性檢驗2GB1886.257—2016附錄A檢驗方法A.1一般規(guī)定本標準除另有規(guī)定外,所用試劑的純度應在分析純以上,所用標準滴定溶液、雜質測定用標準溶液、制劑及制品,應按GB/T601、GB/T602、GB/T603的規(guī)定制備,實驗用水應符合GB/T6682中三級水的規(guī)定。試驗中所用溶液在未注明用何種溶劑配制時,均指水溶液。A.2酶活力的測定A.2.1方法原理溶菌酶可水解細菌的細胞壁,造成藤黃
4、微球菌的溶解而引起溶液吸光度值的降低。一個溶菌酶活力單位定義為25℃,pH6.2條件下,使用藤黃微球菌懸濁液在450nm處每分鐘引起吸光度變化為0.001所需溶菌酶的量。A.2.2試劑和材料A.2.2.1藤黃微球菌:ATCC4698或CICC10680。A.2.2.20.1mol/L磷酸鹽緩沖液:pH6.2。稱取11.70g磷酸二氫鈉(NaH2PO4·2H2O)、7.86g磷酸氫二鈉(Na2HPO4·12H2O)及0.372g乙二胺四乙酸二鈉(EDTA-2Na)于無菌水中并稀釋定容至1000mL。調整緩沖溶液pH至6.2±0.1。注:用小份
5、緩沖溶液檢查pH,以避免緩沖溶液被污染。如果需要,通過加入更多的磷酸二氫鈉溶液或磷酸氫二鈉溶液調整pH。A.2.2.3溶菌酶標準品:蛋清溶菌酶。A.2.2.4底物溶液:用磷酸鹽緩沖液制備50mL藤黃微球菌懸濁液。使用前,底物于37℃培養(yǎng)30min。該底物溶液室溫下可穩(wěn)定2h。以磷酸鹽緩沖液調分光光度計零點,然后測定底物溶液的吸光度,450nm下讀數(shù)應為0.70±0.1。A.2.3儀器和設備A.2.3.1分光光度計:精度±0.001。A.2.3.2pH計。注:所用的器皿應保持無菌,保證工作環(huán)境的清潔。A.2.4分析步驟A.2.4.1試樣溶液的
6、制備準確稱取100mg±0.1mg試樣,置于50mL容量瓶中,用約25mL磷酸鹽緩沖液攪拌溶解并稀釋定容,充分混勻。再轉移3mL上述試樣制備溶液至100mL容量瓶中,用磷酸鹽緩沖液攪拌溶解并稀釋定容。3GB1886.257—2016A.2.4.2標準溶液的制備精確稱取50mg蛋清溶菌酶標準品于50mL容量瓶中,用約25mL磷酸鹽緩沖液攪拌溶解并稀釋定容,充分混勻(如果需要,冷凍該溶液以備后續(xù)測定)。轉移3mL上述標準制備溶液至100mL容量瓶中,用磷酸鹽緩沖液攪拌溶解并稀釋定容。A.2.4.3測定取3份標準溶液和3份試樣溶液進行測定。25℃
7、室溫下,將1cm比色皿放入分光光度計,用磷酸鹽緩沖液調整吸光度零點。吸2.9mL底物溶液于比色皿,最初450nm處吸光度應為0.70±0.10,3min之內初始吸光度值變化應小于或等于0.003時,方可開始測定。吸取0.1mL標準溶液加入底物溶液,充分混合。記錄3min吸光度值的變化,每15s記錄一次吸光度值。每分鐘吸光度值變化應在0.03~0.08,若不在要求范圍需調整試樣溶液的濃度。重復操作測定試樣溶液。反應1min后穩(wěn)定,計算時忽略最初1min的讀數(shù)。A.2.4.4結果計算酶活力X,按式(A.1)計算:(A)1-A2X=…………………
8、…………(A.1)2×m×0.001式中:A1———試樣在450nm處反應1min時的吸光度;A2———試樣在450nm處反應3min時的吸光度;m———用于分析的試樣制備溶液中
